mRNA telah digunakan secara meluas dalam kajian fungsi gen atau protein. Pada masa yang sama, ia adalah perkara biasa dalam pembangunan biologik preventif dan terapeutik. Sebagai strategi sintesis yang umum untuk molekul RNA, penulisan dalam bahan (IVT) membolehkan kita mendapatkan transkrip kustom dengan cekap.
Yaohai Bio-Pharma telah membina satu set teknologi penjanaan mRNA untuk menyediakan RNA berkualiti tinggi, seperti reka bentuk urutan dan optimasi, IVT, pemurnian, pelaruan dan penyampulan dalam nanopartikel lemak (LNP). Semua produk dikeluarkan di bawah piawaian kawalan kualiti (QC) yang ketat.
Dengan wabak pandemik COVID-19 pada tahun 2020, teknologi mRNA telah maju dengan melompat batas, dan penyelidikan serta aplikasi berkaitannya telah mendapat pembangunan yang tidak pernah terdapat sebelum ini, termasuk vaksin preventif untuk pencegahan penyakit menular, vaksin onkologi terapi dan ubat, rawatan tumor, terapi penggantian protein, perubatan regeneratif, dan terapi sel dan gen (CGT).
vaksin mRNA | terapeutik mRNA |
|
Proses | Perkhidmatan Pilihan | Butiran Perkhidmatan | Tempoh Penghantaran (hari kerja) | Hasil Kerja |
reka Bentuk dan Optimumkan Urutan mRNA | Reka bentuk dan optimumkan urutan kod | Reka bentuk urutan CDS dan optimumkan kodon | 1-3 | Fail urutan |
Reka bentuk dan optimasi urutan tak bertindak | Reka bentuk dan optimasi UTR, urutan polyA | |||
Penyediaan Templat Transkripsi Plasmid | Penyediaan plasmid rekombinan | Sintesis gen | 7-10 | |
Pemalaran dan pengekskan plasmid | 4 | |||
Linearisasi plasmid dan pemurnian | ||||
transkripsi mRNA In Vitro | Penutupan kosemutif (kaedah satu langkah) | Transkripsi in vitro (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Pemodifikasian nukleotida (pemodifikasian UTP/CTP) | ||||
Pembuangan templat DNA (DNase I) | ||||
Penutupan enzimatik (proses dua langkah) | IVT | 2-3 | ||
Pemodifikasian nukleotida (pemodifikasian UTP/CTP) | ||||
Pembuangan templat DNA (DNase I) | ||||
pemurnian mRNA (lithium klorida/bead magnetik) | ||||
Penutupan enzimatik | ||||
pembersihan mRNA | Skema pemurnian konvensional | Penyucian lithium klorida | 1 | bahan aktif mRNA |
Pemurnian bead magnetik | ||||
Skema pemurnian kolom kromatografi | Kombinasi beberapa kaedah kromatografi | 1-2 | ||
Tukar pegeraian | Ultrafiltrasi | 1 | ||
liofilisasi mRNA | Liofilisasi | Pembekuan prasebelum | 2-3 | serbuk liofilisasi mRNA |
Keringan pertama (sublimasi) | ||||
Keringan kedua (desorbsi) | ||||
pengekapsulan mRNA | Penyampulan LNP | Penyampulan LNP | 2-3 | produk ubat mRNA-LNP |
Konsentrasi dan tukar pegeraian | ||||
analisis Kualiti mRNA | bahan ubat mRNA / serbuk keringan | Kekuatan, kepurenan | 1 | Laporan ujian |
Integriti, kecekapan capping, taburan ekor polyA | 2-5 | |||
produk ubat mRNA-LNP | Ketepatan Pensampulan | 1 | ||
Saiz dan taburan zarah | ||||
Muatan permukaan | ||||
penilaian Penyata mRNA | penilaian sel 293T | Penyusunan sel | 4 | |
Transfeksi sementara sel | ||||
Pemerhatian isyarat fluoresen | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Ensaime-linked immunosorbent assay (ELISA) |
5' Cap |
▪ Tidak berkap ▪ Cap0, bersamaan berkap ▪ Cap1, bersamaan berkap ▪ Cap1, penambahan kap enzimatik |
5' UTR/3' UTR |
▪ Jujukan UTR Alamiah ▪ Jujukan UTR Mutan/Disusun Semula |
ekor PolyA 3' |
▪ Ekor 100A ~120A (dianjurkan) ▪ Ekor polyA tersegmen ▪ Ekor Suaian Lain |
Nukleosida dimodifikasi |
▪ Asas tak dimodifikasi ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-methyluridine (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Pengubahsuaian lain |
Aliran Perkhidmatan Terpadu
Menyediakan siri perkhidmatan dari reka bentuk urutan di hujung hadapan hingga penyiapan mRNA di hujung belakang, kawalan kualiti dan pengesahan ungkapan.
Reka Bentuk dan Optimasi Urutan Berperingkat Antarabangsa
Reka bentuk dan optimumkan urutan mRNA secara profesional memudahkan ungkapan mRNA yang cekap.
Pemodifikan Nukleotida Berpelbagai
Meningkatkan secara berkesan ungkapan mRNA dan mengurangkan tindak balas imun yang tidak diingini terhadap mRNA.
Platform Pemurnian Dewasa
Dengan menggabungkan kaedah pemurnian konvensional dan dirancang sendiri, sampel mRNA diperoleh dengan keadaan kepekatan tinggi.
Platform QC Lengkap
Kaya pilihan QC untuk memenuhi keperluan ujian rutin seperti konsentrasi, kepekatan A260/280, dan integriti, serta keperluan kawalan kualiti yang tinggi seperti kecekapan penutupan/pembahagian polyA.
Penghantaran cepat
MRNA tersuai boleh disampaikan dalam tempoh 7 hari sahaja, kecuali sintesis urutan diluar sumber.