Semua Kategori
ENEN
reka Bentuk Urutan mRNA

reka Bentuk Urutan mRNA

Laman Utama >  IVT RNA  >  Sintesis RNA Suai  >  Sintesis mRNA Suai  >  reka Bentuk Urutan mRNA

IVT RNA

reka Bentuk Urutan mRNA

Berdasarkan doktrin pusat, RNA penghubung (mRNA) adalah jambatan untuk pemindahan bahan genetik dari DNA kepada protein.

mRNA memainkan peranan biologi dengan menyusun protein dalam badan, dan mRNA yang dewasa dalam organisma eukariot terdiri daripada lima komponen: 5' Cap (struktur cap), 5' UTR (kawasan bukan kod), ORF (rangka membukaan), 3' UTR, dan 3' polyA tail (ekor poliadenilat).

undefined

Butiran Perkhidmatan
Proses Perkhidmatan Pilihan Butiran Perkhidmatan Tempoh Penghantaran (hari)
reka Bentuk dan Optimumkan Urutan mRNA Reka bentuk dan optimumkan urutan kod

Penjajaran urutan CDS

Pengoptimuman Kodon CDS

1
Reka bentuk dan optimasi urutan tak bertindak

reka bentuk dan optimasi urutan 5' UTR

reka bentuk dan optimasi urutan 3' UTR

reka bentuk dan optimasi urutan polyA

1-2
Pilihan yang boleh disesuaikan
5' UTR/3' UTR
  • Urutan UTR semula jadi
  • Urutan UTR Mutan/Pelakon
ekor PolyA 3'
  • ekor 100A ~120A (dianjurkan)
  • Ekor polyA tersegmen
  • Ekor suai tersuai lain
Strategi Lazim untuk Reka Bentuk Urutan mRNA
komponen mRNA Fungsi Biologi Strategi pengoptimuman
kap 5' Melindungi mRNA daripada penguraian oleh eksonukleasa dan bertindak bersama-sama dengan ekor polyA pada hujung 3', protein pemberat polyA dan faktor pembentukan terjemahan protein untuk memulakan terjemahan protein. Struktur Kap1 semula jadi mengelakkan penerima pola dan oleh itu mengurangkan respon imun semula jadi, yang boleh dicapai melalui penutupan koftranskrip satu langkah atau penutupan enzimatik dua langkah [lihat penutupan enzimatik mRNA dan penutupan koftranskrip untuk maklumat lanjut].
uTR 5' UTR 5' boleh dikenal pasti oleh ribosom, mengawal terjemahan mRNA dan mempengaruhi kestabilan mRNA. Mengandungi urutan Kozak tanpa struktur sekunder yang sangat stabil. UTR semula jadi bagi gen yang diekspresikan secara tinggi dipilih untuk mRNA transkripsi in vitro (IVT) seperti α-globin dan β-globin.
CDS Kawasan pengkodean protein dan urutan pengkodean untuk antigen, antibodi, atau protein fungsional lainnya. Pembaikan kodon meningkatkan tahap penterjemahan, dengan menyedari bahawa beberapa kodon bukan optimum mungkin memainkan peranan dalam pelipatan protein.
3' UTR Menyelaras penterjemahan mRNA dan kestabilan. UTR semula jadi bagi gen yang sangat diekspresikan dipilih untuk mRNA IVT seperti α-globin dan β-globin.
ekor polyA 3' Menyelaras ungkapan protein dan melindungi struktur kap daripada pecahan. Panjang yang mencukupi (100-150 bp) diperlukan; pengekodan poliA ekor pada plasmid templat transkripsi memastikan panjang ekor poliA yang lebih tertakrif.
Ciri-ciri Kami
  • Pemilihan sumber UTR yang bermacam-macam

Banyak sumber perpustakaan UTR semula jadi & dimodifikasi yang sangat diekspresikan; strategi pemodifikasian UTR yang matang;

  • Pasukan pengoptimuman CDS terkini

Berkolaborasi dengan pasukan algoritma AI profesional untuk melengkapkan pengoptimuman kodon.

  • Taburan poliA ekoran yang seragam

Tambahkan urutan poliA mengikut templat DNA untuk mengawal panjang mRNA dengan lebih tepat.

  • Kombinasi pengoptimuman pelbagai

Capai ungkapan mRNA yang cekap dengan immunogeniciti rendah.

Kajian Kes

Reka Bentuk Urutan mRNA Pelapor Dua: mRNA mCherry-eGFP

Perkhidmatan mRNA Yaohai Bio-Pharma terus ditingkatkan dengan reka bentuk dan pengoptimuman urutan gen pelapor dua, yang mencapai ungkapan bersama dua gen.

Menggunakan bahan transfeksi konvensional, urutan gen tandem dua gen mRNA mCherry-eGFP ditransfeksikan ke dalam sel 293T, dan dua isyarat fluoresen mCherry (merah) dan protein fluoresen hijau diperkuat (eGFP) dideteksi dengan ungkapan serentak selepas 48 jam, dan graf tumpang ditonjolkan dalam kuning.

图片

图片

Ungkapan mRNA mCherry-eGFP dalam sel 293T

Dapatkan Penawaran Percuma

Get in touch