Penyediaan CircRNA memerlukan RNA linear sebagai bahan prekursor (prekursor RNA) untuk kitaran, di mana prekursor RNA biasanya disediakan menggunakan DNA plasmid linear sebagai templat transkripsi dan ditranskripsi secara in vitro dengan bantuan T7 RNA polymerase.
DNA plasmid berkualiti tinggi adalah penting untuk transkripsi in vitro (IVT). Berdasarkan platform perkhidmatan penyediaan plasmid matang, Yaohai Bio-Pharma boleh menyediakan perkhidmatan penyediaan DNA plasmid (pDNA) linearized tinggi dan standard untuk memastikan integriti produk IVT.
Butiran Perkhidmatan
| Proses |
Perkhidmatan Pilihan |
Butiran Perkhidmatan |
Tempoh Penghantaran (Hari Kerja) |
| Penyediaan plasmid bulat |
Sintesis gen |
Sintesis gen (pihak ketiga) |
7-10 |
| Penguatan plasmid |
Penguatan plasmid |
2 |
| Pengekstrakan plasmid |
| Penyediaan plasmid linear |
Linearisasi dan penulenan plasmid |
Linearisasi plasmid |
1 |
| Pembersihan DNA linearisasi |
| Kawalan kualiti DNA plasmid |
Ketulenan kepekatan |
Spektrofotometri ultraungu (UV). |
1-2 |
| Konformasi plasmid |
Elektroforesis gel agarose (AGE) |
| Elektroforesis kapilari (CE)-pilihan |
| mengenal pasti plasmid |
Pengecaman enzim sekatan/ AGE |
Ciri-ciri kami
Pemilihan kaedah linearisasi yang fleksibel
Pengoptimuman kaedah pengekstrakan dan penulenan DNA untuk mencapai kadar pemulihan yang tinggi.
- Kawalan Kualiti yang Ketat
Piawaian kawalan proses yang ketat, dengan kadar konformasi superhelik sampel plasmid untuk penyelidikan melebihi 80%.
Perkhidmatan penyediaan dan kawalan kualiti standard dan kecekapan tinggi yang tinggi untuk memenuhi keperluan eksperimen.
Kajian kes
Mengambil produk Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA sebagai contoh, nisbah supergegelung sampel plasmid templat transkripsi (gred penyelidikan) adalah lebih daripada 70%, dengan kadar linearisasi hampir 100%.
CircRNA mCherry disediakan dengan plasmid linear sebagai templat dan ditransfeksi ke dalam sel 293T. Ekspresi pendarfluor tahap tinggi (pendarfluor merah) dikesan selepas 24 jam pemindahan, yang akan dipertingkatkan selepas 48 jam, dan masih boleh dikesan pada hari ke-7 dan hari ke-14 selepas pemindahan.
Protein mCherry dinyatakan secara stabil dan cekap, dan ketulenan templat transkrip boleh memenuhi keperluan produk ubat circRNA (DP) dengan kualiti tinggi.
Pengesahan ekspresi in vitro circRNA mCherry
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
