Penyediaan CircRNA memerlukan RNA linear sebagai bahan asal (RNA precursor) untuk pengikatan, di mana RNA asal biasanya disediakan menggunakan DNA plasmid yang telah dilinierkan sebagai templat transkripsi dan ditranskrip secara in vitro dengan bantuan polimerase T7 RNA.
DNA plasmid berkualiti tinggi adalah penting untuk transkripsi in vitro (IVT). Berdasarkan platform perkhidmatan penyediaan plasmid yang matang, Yaohai Bio-Pharma boleh menyediakan perkhidmatan penyediaan DNA plasmid linear (pDNA) dengan kepekatan tinggi dan piawai untuk memastikan integriti produk IVT.
Butiran Perkhidmatan
| Proses |
Perkhidmatan Pilihan |
Butiran Perkhidmatan |
Tempoh Penghantaran (hari kerja) |
| Penyediaan Plasmid Bulat |
Sintesis gen |
Pembentukan Gen (Pihak Ketiga) |
7-10 |
| Peningkatan Plasmid |
Peningkatan Plasmid |
2 |
| Penstrakan Plasmid |
| Persediaan Plasmid Linear |
Linearisasi plasmid dan pemurnian |
Linearisasi plasmid |
1 |
| Pemurnian DNA Linear |
| Kawalan kualiti DNA plasmid |
Ketumpatan kepurelan |
Spektrofotometri Ultraviolet (UV) |
1-2 |
| Konformasi Plasmid |
Elektroforesis Gel Agarosa (AGE) |
| Elektroforesis Kapiler (CE)-Pilihan |
| Kenalpasti Plasmid |
Pengecaman enzim pembatasan / UMB |
Ciri-ciri Kami
Pemilihan fleksibel kaedah linearisasi
Penyempurnaan kaedah pengecaman dan penyucian DNA untuk mencapai kadar pemulihan yang tinggi.
Piawaian kawalan proses yang ketat, dengan kadar konformasi superhelikal sampel plasmid untuk penyelidikan lebih daripada 80%.
Perkhidmatan persiapan dan kawalan kualiti plasmid piawai tinggi dan cekap untuk memenuhi keperluan eksperimen.
Kajian Kes
Mengambil contoh produk Yaohai Bio-Pharma, mCherry circRNA, nisbah supercoil sampel templat plasmid transkripsi (gred penyelidikan) adalah lebih daripada 70%, dengan kadar linearisasi hampir 100%.
mCherry circRNA disediakan dengan plasmid linear sebagai templat dan ditransfeksi ke dalam sel 293T. Tingkat ekspresi fluoresensi yang tinggi (fluoresensi merah) terdeteksi selepas 24 jam transfeksi, yang akan diperkuat selepas 48 jam, dan masih boleh terdeteksi pada hari ke-7 dan hari ke-14 selepas transfeksi.
protein mCherry diekspresikan secara stabil dan cekap, dan keadaan kepurehan templat transkripsi boleh memenuhi keperluan produk ubat circRNA (DP) dengan kualiti tinggi.
Penilaian ungkapan in vitro bagi mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
