Pemprofilan N-glycans adalah penting untuk pengeluaran biofarmaseutikal. Yaohai Bio-Pharma menyediakan perkhidmatan pemprofilan N-glycan menggunakan Kromatografi Cecair-Spektrometri Jisim (LC-MS) glycan yang dilepaskan dan dilabel. Langkah-langkah umum untuk menyediakan sampel N-glycans termasuk pencernaan glikoprotein (GP), penyahglikosilasi, penulenan, pelabelan/penerbitan dan Pengekstrakan Fasa Pepejal (SPE).
Kami telah terlibat dalam Pencirian Struktur Protein pelbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodies/VHHs/ Antibodi domain Tunggal (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptida, Sitokin, Faktor Pertumbuhan (GF), Enzim, Kolagen, dan lain-lain.
Keperluan Kawal Selia untuk Pemprofilan N-Glycan
Menurut garis panduan ICH Q6B, “untuk glikoprotein, kandungan karbohidrat (gula neutral, gula amino dan asid sialik) ditentukan. Selain itu, struktur rantai karbohidrat, corak oligosakarida (profil antena), dan tapak glikosilasi rantai polipeptida dianalisis setakat yang mungkin.
Kaedah Analisis
| Analisis |
Kaedah |
| Pemprofilan N-glycan |
Analisis Kromatografi Cecair-Spektrometri Jisim (LC-MS) bagi glycan yang dilepaskan dan dilabel |
Prosedur
1. Pembebasan glycan enzimatik dengan Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. Derivatisasi glycans yang dibebaskan oleh 2-aminobenzamide (2-AB)
3. Pemurnian N-glycans yang dituai pada TSK Amide - 80 lajur jika terdapat sejumlah besar detergen, garam tidak meruap atau bahan dengan kumpulan amino bebas
4. Pelabelan oleh pendarfluor 2-aminobenzamide (2-AB)
5. Analisis LC-MS bagi N-glycans berlabel
6. Analisis data
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
