kõik kategooriad
Rekombinantne ensüüm

Rekombinantne ensüüm

Kodu >  Modaalsus  >  Valgud  >  Rekombinantne ensüüm

Modaalsus

Rekombinantsed ensüümid

Rekombinantne ensüüm terapeutiliseks kasutamiseks

Biotehnoloogiliste protsesside kaudu saadud terapeutilisi ensüüme kasutatakse laialdaselt mitmetes kliinilistes rakendustes, sealhulgas ensüümasendusravis, kogunenud metaboliitide ja toksiinide lagunemises, vähiravis ja genoomi redigeerimises. Mikroobide ekspressioonisüsteemis saab toota mitmeid terapeutilisi ensüüme.

taotlus

Ensüümid

Aine

Tüüpilised tooted/torujuhtmed

Ensüümi asendusravi

Adenosiindeaminaas, ADA

Adenosiin või desoksüadenosiin

Elapegademase-lvlr (Revcovi)

Fenüülalaniini ammoniaaklüaas, PAL

Fenüülalaniin

Pegvaliase-pqpz (Palynziq)

Kogunenud metaboliitide lagunemine

Urikaas/uraadi oksüdaas

Kusihappe

Pegltikaas (Krystexxa) Rasburikaas (Fasturtec)

Kollagenaas

Kollageeni "arm"

Clostridium histolyticum kollagenaas (Xiaflex, Qwo, Santyl)

Kärbitud plasmiin

Kollageen, fibronektiin ja laminiin

Okriplasmiin (Jetrea)

Kärbitud koe plasminogeeni aktivaator (tPA)

Plasminogeen

Reteplaas (retavase)

IgG proteaas

Immunoglobuliin G (IgG)

Imlifidaas (Idefrix)

IgA proteaas

Immunoglobuliin A (IgA)

PKU308/AP308IGAN IgA proteaas

Toksiinide lagunemine

Karboksüpeptidaas G2

Metotreksaat

Glükarpidaas (Voraxaze)

Vähiravi

Asparagiinispetsiifiline ensüüm

Asparagiin

Asparaginaas (Elspar) Calaspargase pegol-mknl (Asparlas)

Genoomi redigeerimine

Cas9 nukleaas

Sihtgeen

Exagamglogene autotemcel (Exa-cel, CTX001)

Rekombinantne ensüüm kui materjal

Pikalt kodeeriva RNA (nt mRNA, saRNA, tsircRNA), antikeha-ravimi konjugaatide (ADC) tootmiseks ja teistes kasutatakse mitmeid ensüüme. Mikroobide toodetud ensüümid on kuluefektiivsemad kui imetajarakud, eriti E. coli ekspressioonisüsteem.

taotlus

Ensüümid

funktsioon

Ensüümid lineaarseks RNA tootmiseks, RNaasivabad

Restriktsiooni endonukleaasid

Plasmiidse DNA (pDNA) lineariseerimine, et vältida pikema transkripti genereerimist.

T7 RNA polümeraas (T7 RNAP)

Seostuda T7 promootoriga ja genereerida spetsiifiline RNA transkript; Mängige võtmerolli in vitro transkripti (IVT) reaktsiooni ajal.

Vaktsiinia piirav ensüüm

Lisage IVT mRNA 5'-otstele Cap-struktuurid.

Pürofosfataas, anorgaaniline (iPPase)

Vältige pürofosfaadi tekkimist IVT reaktsiooni ajal.

RNaasi inhibiitor, rekombinantne

Inhibeerib RNaasi aktiivsust IVT reaktsiooni ajal.

DNAaas I

Eemaldage DNA matriit.

Ensüüm tsirkulRNA tootmiseks, RNaasivaba

RNaas R

Seedige lineaarne RNA ja rikastage ringikujulist RNA-d.

Ensüümi vahendatud glükaani konjugatsioon

Peptiid-N-glükosidaas (PNGaas F)

Lõikab amiidsideme esimese sahhariidi GlcNAc ja Asn297 kõrvalahela L vahel; Vabastage glükaanid IgG antikehadest.

Bakteriaalne transglutaminaas (BTG)

Konjugeerige kasulikud koormused saidipõhiselt ADC-de genereerimiseks.

Sortaas A

Katalüüsige valkude ligeerimist.

β1,4-galaktosidaas

Vabastage kõik terminaalsed galaktoosid ja moodustage antikeha homogeenne G0 isovorm.

β1,4-galaktosüültransferaas (Gal-T)

Kandke üle keemiliselt reageeriva funktsionaalrühmaga suhkrujääk.

α2,6-sialüültransferaas (Sial T)

Lisage terminaalsed siaalhappejäägid antikeha natiivsesse glükaani struktuuri.

Ensüümide vahendatud glükaani ümberkujundamine ja glükotehnoloogia

Endo-N-atsetüülglükoosaminidaas (ENGaas)

Hüdrolüüsige β1,4-glükosiidside N-glükaanide GlcNAcβ1–4GlcNAc vahel; Eemaldage IgG antikehade Fc piirkonnast N-seotud glükaanid.

Endoglükosidaas S (EndoS)

Glükosüültransferaasid (GT-d)

Viige N-glükaanoksasoliin defukosüülitud IgG-desse.

teised

Mikroobitüve poolt toodetud ensüümid

Kohandatud vajadus

Rekombinantne ensüüm reaktiivina
Sildi eemaldamise proteaasid

Fusioonmärgiseid kasutatakse sageli huvipakkuvate rekombinantsete valkude lahustuvuse ja stabiilsuse parandamiseks ning nende puhastamise hõlbustamiseks. Tavaliselt kasutatavad märgised hõlmavad His-märgist, maltoosi siduvat valku (MBP), glutatioon-s-transferaasi (GST) jne.

Tavaliselt lisatakse märgise eemaldamiseks liitmärgise ja sihtvalgu järjestuse vahele linkerjärjestus. Liitmärgiste eemaldamiseks on vaja kohaspetsiifilisi proteaase, nagu enterokinaas (EK), trombiin, tubakasöövituse viiruse proteaas (TEVp), inimese rinoviiruse proteaas 3C (HRV3C), väikest ubikvitiini modifitseeriva valgu (SUMO) proteaas, tubakaveenide laiguline viirus ( TVMV) proteaas ja karboksüpeptidaas A/B (CPA/CPB).

KASUTUSALA

Ensüümid

Tunnustamise sait

Sildi eemaldamise endoproteaasid

Enterokinaas (EK), enteropeptidaas

DDDDK↓

trombiin

LVPR↓GS

TEV proteaas

ENLYFQ↓G

HRV3C proteaas

LEVLFQ↓GP

SUMO proteaas

SUMO tertsiaarne struktuur

TVMV proteaas

ETVRFQG↓S

Sildi eemaldamise eksoproteaasid

Karboksüpeptidaas A (CPA)

C-terminaalsed aminohapped, välja arvatud Pro, Lys ja Arg

Karboksüpeptidaas B (CPB)

C-terminali Lys ja Arg

Muud proteaasid, nukleaasid ja amidaasid

taotlus

Ensüümid

funktsioon

Muud proteaasid

Proteaas K

Seriinproteaas, mis lagundab valke peptiidsidemeid hüdrolüüsides.

IdeS, IgG proteaas

IgG-d lagundavad ensüümid (Ides), mis lõhustuvad immunoglobuliin G (IgG) spetsiifilises kohas, tekitades Fab ja Fc fragmente

IgA1 proteaas

Proteolüütiline ensüüm, mis lõhustab inimese immunoglobuliini A1 (IgA1) hingepiirkonna järjestuse spetsiifilise saidi.

Nukleaas

Nukleaas

Lõhustab nukleiinhappeid (DNA või RNA), hüdrolüüsides fosfodiestersidemeid.

Piirata ensüümi

Endonukleaas, mis lõikab DNA teatud kohtades või nende lähedal.

Amidaas

PNGase F

Lõhkub kõrge mannoosisisaldusega, hübriid- ja kompleksoligosahhariidide N-atsetüülglükoosamiini (GlcNAc) ja asparagiini jääkide vahelt.

Yaohai Bio-Pharma pakub ühekordset CDMO-lahendust rekombinantsete ensüümide jaoks
Viide:

[1] Hennigan JN, Lynch MD. Ensüümipõhiste ravimeetodite minevik, olevik ja tulevik. Narkodiscov täna. 2022 jaanuar;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.

Hangi tasuta tsitaat

Võta ühendust