Bioloogilised ravimained on keerulised suured molekulid, mis on eriti tundlikud keskkonnategurite suhtes: temperatuur, oksüdatsioon, valgus, ioonisisaldus ja nihkejõud. Oluline on viia läbi ravimaine ja ravimtoote stabiilsusuuringud ettenähtud säilitustingimustes, kiirendatud tingimustes ja sunnitud lagunemistingimustes. Stabiilsusandmeid kasutatakse tavaliselt säilivusaja, kõlblikkusaja ja säilitustingimuste toetamiseks.
Järgides ICH Q5C juhiseid, pakub Yaohai Bio-Pharma valkude, peptiidide, plasmiidide ja mRNA-de stabiilsusuuringute teenuseid, mis hõlmavad pikaajalisi stabiilsusuuringuid, kiirendatud stabiilsusuuringuid ja sundlagunemise uuringuid. Lisaks on meil kõik vajalikud võimalused proovide salvestamiseks ja kriitiliste kvaliteediomaduste (CQA) analüüsiks stabiilsusandmete kogumiseks.
Stabiilsusuuringute regulatiivsed nõuded
Vastavalt ICH Q5C juhisele: "Biotehnoloogilise/bioloogilise toote jaoks tuleks välja töötada õiged toetavad stabiilsusandmed, kuna paljud välised tingimused võivad mõjutada toote tõhusust, puhtust ja kvaliteeti. Samuti on tungivalt soovitatav läbi viia uuringud ravimi aine ja ravimi kohta kiirendatud ja stressitingimustes.
Reaalajas (pikaajalised) stabiilsusuuringud
Reaalajas (pikaajalise) stabiilsuse testimisel säilitatakse ravimainet või ravimpreparaati ettenähtud säilitustingimustes ja jälgitakse, kuni bioloogilised omadused muutuvad üle vastuvõetavate piiride. Pikaajaliste stabiilsusuuringute tulemusena saab kindlaks määrata säilivusaja, kõlblikkusaja, säilitustingimused ja proovide võtmise/testimise intervallid.
Tabel 1. Kinnituseelsete bioloogiliste ravimite pikaajaliste stabiilsusuuringute testimise sagedus
| Säilitusaeg |
Testimise intervallid |
Ajapunktid |
| 1 aasta või vähem |
kord kuus esimese 3 kuu jooksul;
Seejärel iga 3 kuu tagant
|
0, 1, 2, 3, 6, 9 ja 12 kuud |
| Rohkem kui 1 aasta |
Esimesel aastal iga 3 kuu järel;
iga 6 kuu järel teist aastat;
Seejärel igal aastal
|
0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 kuud ja seejärel igal aastal |
Kiirendatud stabiilsusuuringud
Süstitavate biofarmatseutiliste ravimite soovitatav säilitustemperatuur on tavaliselt 2–8 ℃. Kiirendatud stabiilsusuuringud viiakse läbi lühema kestusega kiirendatud tingimustes, näiteks kõrgel temperatuuril. Stabiilsusandmeid peetakse toote stabiilsust toetavaks teabeks ja neid kasutatakse laialdaselt kõlblikkusaja ja kõlblikkusaja määramisel, samuti koostise väljatöötamisel.
Tabel 2. Näited kiirendatud stabiilsusuuringutest
| Stabiilsusuuringud |
Kiirendatud tingimused |
Proovivõtukohad |
| Kiirendatud stabiilsusuuringud |
kõrgendatud temperatuur
suhteline niiskus
|
0, 1, 2, 3, 6 kuu vanuselt |
Sunniviisilise lagunemise uuringud
Sundlagunemise uuringute eesmärk on koguda stabiilsusteavet pingetingimustes, nagu kõrge temperatuur, niiskus, valgus, oksüdatsioon, külmumine-sulatamine või mehaaniline pinge (raputamine, nihke). Raviaine või ravimtoote sundlagunemise uuringud äärmuslikes tingimustes võivad aidata ära tunda võtmetegureid/parameetreid, mis põhjustavad bioloogiliste ainete lagunemist. Need andmed on kasulikud koostise ja tootmisprotsessi vastupidavuse hindamiseks.
Tabel 3. Sundlagundamise uuringute näited
| Stress |
Stressitingimused |
Kestus aeg |
| Temperatuur |
Kõrge temperatuur (nt 25 ℃, 30 ℃, 37 ℃, 40 ℃) |
Päevad-kuud |
| Niiskus |
Suhteline õhuniiskus (0-100%) |
Päevad-kuud |
| valgus |
Minimaalselt 1.2 miljonit lx h ja 200 W h/m2 |
Mitu päeva |
| Külmutamine-sulatamine |
külmutamine-sulatamine (-20 ℃, -80 ℃ kuni 15 ℃) |
1-5 tsüklit |
| Loksutades, segades |
50 ~ 500 p / min |
Tunnid-päevad |
Stabiilsusuuringuid toetavad analüütilised meetodid
| Kriitilised kvaliteediatribuudid (CQA) |
Analüütilised meetodid |
| Üldine valgusisaldus |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Nähtavad osakesed |
Visuaalne kontroll |
| Agregatsioon, killud |
Dünaamiline valguse hajumine Suuruskromatograafia (SEC) HPLC/UPLC, kapillaarelektroforees CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), mitteredutseeriv SDS-PAGE |
| Peptiidide kaardistamine ja sekveneerimine |
LC-MS/MS |
| Disulfiidsidemed |
LC-MS/MS |
| PTM (oksüdatsioon, isomerisatsioon, deamiidimine, glükosüülimine) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
