Bioloogilised ravimained on keerulised suured molekulid, eriti tundlikud keskkonna teguritele: temperatuurile, oksidatsioonile, valgusel, ioonide sisaldusele ja rööpamisele. Ravimahe ja ravimisätte stabiilsuse uurimine on kriitiline määratud hoideskondisjonides, kiirendatud tingimustes ja sunditud halvendumise tingimustes. Stabiilsuse andmed kasutatakse tavaliselt toetusena ravimi kestva eluaja, aegumiskuupäeva ja hoideskondisjonide määramiseks.
Järgides ICH Q5C juhiseid pakub Yaohai Bio-Pharma stabiilsuse uurimiste teenuseid proteiinide, peptiidide, plasmiidide ja mRNAd jaoks, sealhulgas pikaajalisi stabiilsuse uurimisi, kiirendatud stabiilsuse uurimisi ja sunditud halvendumise uurimisi. Lisaks võime meie teha kõik vajalikud tööd näidete hoidmiseks ja Kvaliteedi Kriitiliste Omaduste (CQA) analüüsiks, et koguda stabiilsuse andmeid.
Reguleeritud nõuded stabiilsuse uurimistele
ICH Q5C juhendis öeldud: „Kooskõlas toetava stabiilsuseandmete peaks olema arendatud biotehnoloogilise/bioloogilise toote jaoks, kuna paljud välised tingimused võivad mõjutada toote tegevust, puhtust ja kvaliteeti. Soovitatakse tugevalt ka teostada uurimusi läbimustiku ja stressitingimustes nii läbimustiku kui ka valmismoodustise kohta.
Reaalajalised (pikaajalised) stabiilsusuurimised
Reaalajas (pikaajalises) stabiilsusproovi käigus hoidetakse läbimustikku või valmismoodustist mõeldud hoidingutingimustes ning jälgitakse neid, kuni bioloogilised omadused muutuvad lubatud piirides välja. Pikaajaliste stabiilsusuurimiste tulemusena saab määrata kehtetuksmiskuupäeva, aegumisaega, hoidingutingimused ja näidispunktide/testimisintervallid.
Tabel 1. Testamise sagedus pikaajalistes stabiilsusuurimistes enne heaksõnastamist bioloogiliste toodete puhul
| Aegumisaeg |
Testimisintervallid |
Ajapunktid |
| ühe aasta või vähem |
Igal kuul esimesel kolmel kuul;
Iga kolmandal kuul pärast seda
|
0, 1, 2, 3, 6, 9 ja 12 kuusel |
| Üle aasta |
Esimesel aastal igal kolmandal kuul;
Teisel aastal igal kuuel kuul;
Pärast seda igal aastal
|
0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 kuusel ja pärast seda igal aastal |
Kiirendatud stabiilsuse uuringud
Injektsioonsete biopoharvude soovitatav hoidetemperatuur on tavaliselt vahemikus 2 kuni 8℃. Kiirendatud stabiilsuse uuringud tehakse lühema perioodiga kiirendatud tingimustes, nagu kõrged temperatuurid. Stabiilsuse andmed kasutatakse toote stabiilsuse toetava teabe allena ning need on laialdaselt rakendatud ravimi kehtivusaja ja aegumiskuupäeva määramisel ning vormeeringu arendamisel.
Tabel 2. Kiirendatud stabiilsuse uuringute näited
| Stabiilsuse uuringud |
Kiirendatud tingimused |
Proovipunktide võtmine |
| Kiirendatud stabiilsuse uuringud |
ülempiirset temperatuuri
suhteline niiskus
|
0, 1, 2, 3, 6 kuusel |
Võimendatud haavutamise uuringud
Võimendatud haavutamise uurimiste eesmärk on koguda stabiilsuse teave stressitingimustes, nagu kõrge temperatuur, õhunenemiskraad, valgus, oksidatsioon, külm-viiumtsükkel või mehaaniline stress (katkamine, rippume). Ravimainimeste või ravimutoote võimendatud haavutamise uurimised äärmistes tingimustes aitavad tuvastada olulised tegurid/parameetrid, mis viivad bioloogiliste ainete haavatumiseni. See andmebaas on kasulik valemistamise ja tootmisprotsessi tugeva hinnangu jaoks.
Tabel 3. Võimendatud haavutamise uuringute näited
| Stress |
Stressitingimused |
Kestus |
| Temperatuur |
Kõrge temperatuur (nt 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Päevad-kuud |
| Õhukindlus |
Suhteline õhunemetus (0~100%) |
Päevad-kuud |
| Kerge |
Vähemalt 1,2 miljonit lx h ja 200 W h/m2 |
Mõned päevad |
| Sulamine-jäämines |
sulamine–jäämines (−20℃, −80℃ kuni 15℃) |
1~5 tsükli |
| Kastmine, segamine |
50~500 tpk |
Tundid-päevad |
Analüütilised meetodid stabiilsuse uurimiste toetamiseks
| Kriitilised kvaliteediomadused (CQAs) |
Analüütilised meetodid |
| Kokkuvõte proteiini sisaldus |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Nähtavad osakesed |
Näoviskontroll |
| Agregeering, fragmentid |
Dünaamiline valgusajaamet Suurus-järgne kromaatograafia (SEC) HPLC/UPLC, Kapillaareelektrofoorees CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Ei-reduktiivne SDS-PAGE |
| Peptiidikaartimine ja sekveneerimine |
LC-MS/MS |
| Disülfiidsidebendid |
LC-MS/MS |
| PTM (oksigeerumine, isomeerimine, deamidatsioon, glykosatsioon) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
