N-glykosülaatsiooni aadressi analüüs on oluline glykaanide funktsioonide mõistmiseks. Yaohai Bio-Pharma kasutab enzyymilise lõigamise pärast Nestehromaatograafia-Massispektromeetria (LC-MS) meetodit N-glykosülaatsiooni aadressi jaoks.
Oleme osalenud erinevates suurte molekulite proteiinistruktuuri karakteriseerimises, sealhulgas rekombinantsetes subüünivaktsiinides, nanokehades/VHHs/d ühe domeeni kehadest (sdAbs), antikehaosades, hormoonides/vedelikutest, sütokiinides, kasvuasjades (GF), enzyymides, kollageenides jne.
Reguleeriva nõuete kohta N-glykosülaatsiooni aadressil
ICH Q6B juhendis öeldakse: „glykopepteidite puhul määratakse karbohidraatisisaldus (neutraalsed suhkruad, aminosuhkruad ja siialiinsuurused). Lisaks analüüsitakse karbohidraatikahju struktuuri, oligosuhkruaside musterit (antennaprofiil) ning polüpeptiidikahju glykosülaatsiooni aadress(i) võimalikult täielikult.“
Analüütiline meetod
Analüüs |
Meetodid |
N-glykosüülatsiooni koht |
Vedelkromaatograafia-mass-spektromeetria (LC-MS) enzyymse lõigamise järel |
Menetlused
1. Enzüümi abil toimuva proteiini katkestamise kasutades tripsiini või muud proteasiidit
2. Eraldada fragmenteeritud glycopeptide
3. Kinnitage N-glykosüleerimispaigat LC-MS abil
4. Analüüsida andmeid