N-glükosüülimiskoha analüüs on glükaanide funktsioonide mõistmiseks ülioluline. Yaohai Bio-Pharma kasutab N-glükosüülimiskoha jaoks pärast ensümaatilist lõhustamist vedelikkromatograafia-massispektromeetriat (LC-MS).
Oleme osalenud erinevate suurte molekulide, sealhulgas rekombinantsete subühikute vaktsiinide, nanokehade/VHH-de/ ühedomeeniliste antikehade (sdAb), antikehade fragmentide, hormoonide/peptiidide, tsütokiinide, kasvufaktorite (GF), ensüümide, valgu struktuuri iseloomustamises. jne.
Regulatiivsed nõuded N-glükosüülimiskohale
Vastavalt ICH Q6B juhistele "määratakse glükoproteiinide puhul süsivesikute sisaldus (neutraalsed suhkrud, aminosuhkrud ja siaalhapped). Lisaks analüüsitakse parimal võimalikul määral süsivesikute ahelate struktuuri, oligosahhariidide mustrit (antenniprofiili) ja polüpeptiidahela glükosüülimiskohta.
Analüütiline meetod
Analüüs |
Meetodid |
N-glükosüülimiskoht |
Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LC-MS) pärast ensümaatilist lõhustamist |
Protseduurid
1. Valgu seedimine ensüümidega, kasutades trüpsiini või muud proteaasi
2. Eraldage glükopeptiidide fragment
3. Kinnitage N-glükosüülimiskoht LC-MS abil
4. Analüüsige andmeid