Alluvialprotsessi (DSP) arenduse tähtsus
Tervislik fermentatsioonisis sisaldab sihtproteini või plasmidi ning ka toote- ja protsessiga seotud saasteid, näiteks aggregeete, mikrobioloogilisi rakusubstraate, Kandja Raku Proteineid (HCP), Kandja Raku DNA-d (HCD), endotoxineid ja antibiotikumeid.
Seega on oluline disainida tõhus DSP, stearifitseerimisprotsess, mis eemaldab mõned saastajad ja toodab kõrgelt stearifitseeritud ja kvaliteetset ravimainesed. Lisaks aitab stearifitseerimisprotsessi optimeerimine suurendada toote taastamist, vähendada kulueid ja parandada protsessi skaleeritavust ja kordatavust.
Võtmesõnad: protsessi arendamine, optimeerimine ja valideerimine, stearifitseerimisprotsess, kromaatograafia, saaste eemaldamine, HCP eemaldamine, HCD eemaldamine, endotoksiin eemaldamine, proteiini deenatureerimine ja ümbrefoldimine, VLP kokkupanek, konjugatsioon
Rakendus: biotehnoloogiline farmaatsia, inimravi, loomaravi, vaktsiinid, rekombinantne suur molekul bioainete, rekombinantne bioained, bioloogiline reageendi
Yaohai Bio-Pharma DSP lahendused
Meil on laias kogemus sihtproteenide või plasmiidide eraldamisel keerukatest maatriksidest, arendades ja optimeerides järeltöötamise protsessi. Bioloogiliste toodete järeltöötamiseks sobivad erinevad tüübid ühikoperatsioonidest, sealhulgas sentrifugeerimine, filtratsioon, homogeeneerimine, alkaline lüüs, ültrapürifikaator, sedimentatsioon, proteiini deformatsioon ja taaspolõige, kromaatograafia jne.
Meie saadaval olevad pürifikatsiooniarenduse teenused hõlmavad:
- Terviklik pürifikatsiooniprotsessi arendamine rakudest või süüpist kuni lõplikku aktiivsele alustootele.
- Pürifikatsiooniprotsessi optimeerimine toote- ja protsessiga seotud saasteainete põhjal, et parandada toote kvaliteeti ja ohutust, näiteks HCP, HCD, endotoxine.
- Definitsioon ja optimeerimine võtmelementide parameetrite suhtes ühes või mitmes protsessisammus, sealhulgas rakukahjustamine, tangentsuunaline filtreerimine, resiini ekraanimine, kromaatograafia, proteiini deformatsioon ja taasvõrkumine jne.
- Protsessi optimeerimine kvaliteedi, tootlustulemuse, taastamise, maksumuse ja skaalitavuse poolest.
- Puhastamisprotsessi allprotsessi valideerimine.
- Riskipõhine parameetri vahemiku hindamine ja eksperimentide plaanimine (DoE) protsessimudeli puhul.
Teenuste üksikasjad
Standardsete proteiinide või plasmidi puhastamisplatvormide puhul on rohkem kui üks lihtsustatud puhastamisfase ning vähem kui 4 kromaatograafiatöötlustöökuju, sealhulgas hankimine, keskmist puhastamist ja lõplikku töötlemist.
| Teenuste üksikasjad |
Ühikutoo |
Parameetrid |
| Algne puhastamine |
Centrifugeerimine |
Pöörlemissagedus, aeg |
| Kõrgepinge homogeeneerimine |
Kokkuvõte Tervise Kohta, Rõhk, Tsüklid |
| Pidev Alkaalne Liysis |
Liikumise Suhe Liysisse Ratule, Liysis Aeg |
| Tangentsiaalne Voolufiltratsioon |
Membrani Materjal ja Pordi Suurus, Toite Voolu Kiirus Transmembraaniline Rõhk (TMP), Filtrati Kogus Membrani Pindalaga Suhe |
| Sedimentatsioon |
Sedimentatsiooni tüüp ja konsentratsioon, Lisandmed, pH, Temperatuur, Aeg |
| Denaatureerimine ja Uuesti Seostamine |
Inklusiivkoera proteiini lahustamine |
Denaatureerija Konsentratsioon (nt Ure, Guanidiin HCl, Tugev Ioonne Detergeent), Detergeendid (nt Dodeeilsülfoonaat, SDS), Reduktsioonivälineained (nt Ditiotreitol, DTT), Kompleksvormivaained (Etyyleendiamiiintetraakoonne acid, EDTA), Temperatuur, Aeg |
| Proteiinide uuestikujundamine |
Uuestikujundamise meetodid (dilutsioon, dialüüs või SEC-uuestikujundamine), Proteiini koonused, Puhastikud, pH, Temperatuur, Aeg, Oksidatsiooni ja reduktsiooni agentid (nt glutatiin, GSH/Oksiditud glutatiin, GSSH, DTT/GSSH, Cystein/Cystiin), Väikesed molekulilised lisandmed (L-arginiin, Ure, Guanidiin/HCl, ja Puhastikud) |
| Kaptsentimine, Vahepuhastus ja Lõpppuhastus |
AK (Afinseeriv kromaatograafia) |
Mitmeid tüüpi kromaatograafia resiin/välimärk (nt AK, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Välimärki pikkus ja läbimõõt, Puhastiku koostis, Injektsioonimahuga, Liikumisfase koostis (Adsorpstsioon ja Desorpstsioon), pH, Voolushiir, Seotuse, Puhastamise ja Eraldamise tingimused. |
| IEX (Negatiivelt või Positiivelt laenguv kromaatograafia) |
| HIC (Hüdrofoobse interaktsiooni kromaatograafia) |
| Desaltimeerimine ja/või mahtupuhastus (SEC) |
| RPC (Reversed Phase Kromaatograafia) |
| MMC, Segarežiimiline kromaatograafia |
Praktikunne
JUHTUM 1
Meil on ülesanne arendada ja optimeerida järelmüratamisprotsessi, et tõsta proteiini puhtust 85%st 90%-ni samal ajal, kui vähendatakse kromaatograafiamittu.
Yaohai esitas kindla ja skaleeritava kromaatograafia protsessiga kolme sammu eesmärgiproteiini jaoks, mis on bakteriaalne allergiik. Lõplik puhtus jõudis 95%-ni.
JUHTUM 2
Yaohai nimetas klient meie poolt endotoxini eemaldamise protsessi optimeerimiseks virusnägelistel osakeste (VLP) vaktsiini puhul.
Meie tiim teostas kromaatograafia parameetrite optimeerimist ja ettevalmistasin ravimainimestega puhtusega 98% ja endotoxini jääkidega 12.8EU/mg.
Meie kogemused
- Oleme osalenud erinevate suurte molekulite arendamises ja tootmisel, sealhulgas rekombinantsete subüniivaktsiinide, VLP-de, hormoonide (insuliin, GLP-1, kasvuhormoon), sitokiinide (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), kasvufaktorite (EGF, FGF, NGF), nanokülgade/ühesuunaliste antikehade (sdAbs), enzyymide jms tootmisel.
Seade
Me kasutame tööstuses juhtivaid süsteeme AKTA Pure, AKTA Avant ja ettevalmistavat HPLC süsteemi erinevate kromaatomeetodite läbiviimiseks, sealhulgas aafinuse, ionivahetuse, hüdrofoobse interaktsiooni, pöördfaaase ja suurusekskeerukromaatia meetodeid.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
