Põleviku valimise tähtsus
Sobivate põlevike valimine on vajalik bioloogiliste ainate CMC arenduse jaoks, mis määrab toote kvaliteedi ja tootmisprotsessi konstantseisu. Põleviku valimise otsekohene eesmärk on anda kandidaatipõhivahend (PCB), mis omab kõrge väljendustaseme ja kõrget stabiilsust nii edastamise kui ka hoidluse poolest. Sobivate põlevike valimine on vajalik kahe peamise põhjuse tõttu:
- Esiteks on vaja valida mikroobipõlevik, mis võimaldab kõrget väljendustaset. On olemas mitmeid kaupadeks saadaval straatideid, mis kasutatakse erinevate tüüpide proteiinide väljendamiseks, nagu toksilisi proteiine, ratsionaalseid proteiine või eukariotilisi proteiine.
- Teiseks, ekraanida kandja genliku stabiilsusega. Genliku stabiilsuse testimine on oluline punkt kogu tootmise elutsükli jooksul. Soovitatakse, et suurepärane genlik stabiilsus tunnistataks teise olulise iseloomuliku omadusena sobiva puhapikasliendi korral.
Võtmesõnad: mikrobioloogilise puhapikasliendi valimine, mikrobioloogilise puhapikasliendi ekraanimine, bakterite või seidi üldtestimine, kõrge tõusu puhapikasliendi ekraanimine, äärmiselt stabiilse puhapikasliendi ekraanimine, geneetiliselt stabiilne puhapikasliendi ekraanimine Rakendus: inimravi, loomaravi, vaktsiin, sünteetiline bioloogia, rekombinantne suurte molekulide bioloogia, bioloogiline reagent
Yaohai Bio-Pharma Puhapikasliendi Ekraanimisteenused
Töötades üle 10 aasta kogemusega CDMO-s mikrobioloogiliste bioloogiliste toodete valdkonnas, toetame erinevate suurte molekulide arendamist ja tootmist, sealhulgas rekombinantsete alamüksuste vaktsiine, virusnäitelist (VLP), hormoonide (insuliin, GLP-1, kasvuhoone), sitokiinide (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), kasvufaktorite (EGF, FGF, NGF), nanobodyde/Single-domain antiboodyde (sdAbs), enzyymide jms.
Meie kogemus hõlmab mitmesuguste plasmidivektorite ja mikrobsete majutuskonna valikute valdkonda, sealhulgas bakteeriume Escherichia coli (E. coli), ja jääse Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Me leidame parima väljendussüsteemi teie unikaalsetele bioloogilistele toodetele.
Meil on kogunenud mitmesugused selgete allikatega mikrobsete majutuskonnad ja standardne CoA, sealhulgas E.Coli bakteeriumi väljendus ja kümmituspilte väljendus.
Teenuste üksikasjad
|
Teenused
|
Teenuste üksikasjad
|
Minimaalne ajaskaala/päev
|
Toodetavad tulemused
|
|
Põleviku loomine (E. coli)
|
Plasmidi transformatsoon (mitu majutajat)
|
5
|
Majutajate kvaliteetse analüüsi (COA) ja põleviku loomise aruanne
|
|
PCR-verifikatsioon
|
|
Põleviku tühjendamine
|
|
Põleviku hoidmine
|
|
Põleviku loomine (kempel)
|
Kempel-põleviku ettevalmistamine
|
10
|
|
Plasmidi lineaarneks tegemine
|
|
Elektrotransformatsioon
|
|
Vastupidavus/Nutitsiooniliste puuduste ekraanimine
|
|
Põleviku tühjendamine
|
|
Põleviku hoidmine
|
|
Sobiva majaorganismi ekraanimine
|
Plasmidi või geeni DNA ekstraktioon
|
15-20
|
Majaorganismi ekraanimise protsess COA geneeritud plokkide jaoks
|
|
PCR-verifikatsioon, piirivärvse digestioon
|
|
Sihtgendi sekveneerimine
|
|
Kõrge väljendusega majaorganismite ekraanimine
|
|
Geneetiliselt stabiilsete majaorganismite ekraanimine
|
|
Põleviku hoidmine
|
Praktikunne
Sobiv majaorganism suurendab proteiini väljendustaset 2,5 korda.
Meil on ülesanne arendada kõrge tootlikkusega E. coli liiki. Ja me proovisime kolme liigi kaubanduslike E. coli majapidamisi, põhjendades sihtproteiini omadusi. Ilmnes, et liigid S1-1 ja S1-2 (Fig A: Rida 1,2) parandasid proteiini taseme 3,5 korda võrreldes klienti algse liigiga (Fig A: Rida 3).
Lisaks näitas liik S1-1 kõrget geneetilist stabiilsust (Fig B), ning seda tunnistati peamiseks eelpankade (PCB) kandidaatliigiks.
Meie teenuste omadused
Tuntud oskused erinevate mikrobsete majapidamiste juures, näiteks, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae ja H. polymorpha .
Meil on kogemus E. coli periplaasmilise sekretseerimisega, ratsionaalsetega ja inklusiivsete kehade väljendamisega ning ka meesekretseerimisega või sekratsiooniga. Me ei kasuta antibiootikume või kasutame neid ainult regulatiivset juhtimist järgides.
Me loeme välja kõrge läbiviimisega ekspresiooniplatvormi, mis võimaldab meil tuvastada kandideerivatest sadasoost rühmast kõrge tootlikkusega ja stabiilsete perekondade.
Tagatakse, et perekonnainžeerimise ja valiku protsess on jälgitav ja toimub Heategevuse andmete ja kirjete haldamise alusel.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
