Disulfiidsidemeid nimetatakse mõnikord SS-sidemeteks või disulfiidsildadeks. Disulfiidsillad mõjutavad bioloogiliste ainete, nagu peptiidid, valgud ja antikehad, bioaktiivsust.
Yaohai Bio-Pharma pakub disulfiidsidemete analüüsiteenuseid, mis põhinevad peamiselt vedelikkromatograafia-massspektromeetrial (LC-MS).
Oleme osalenud erinevate suurte molekulide, sealhulgas rekombinantsete subühikute vaktsiinide, nanokehade/VHH-de/ ühedomeeniliste antikehade (sdAb), antikehade fragmentide, hormoonide/peptiidide, tsütokiinide, kasvufaktorite (GF), ensüümide, valgu struktuuri iseloomustamises. jne.
Regulatiivsed nõuded disulfiidsidemetele
Erinevates bioloogilistes ainetes on disulfiidsildade arv ja moodustumine erinev, mida tuleks valkude iseloomustamise uuringute käigus täielikult hinnata, kui toote eeldatav esmane aminohappejärjestus sisaldab aminohapet tsüsteiini. Seda nõutakse ka regulatiivdokumendis ICH Topic Q6B.
Analüütilised meetodid
Analüüs |
Meetodid |
Disulfiidsidemed |
Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LC-MS) pärast seedimist |
Disulfiidsildade ja vabade tioolide täielikuks hindamiseks vajalike andmete saamiseks viivad Yaohai Bio-pharma teadlased läbi peptiidide kaardistamise pärast seedimist spetsiifilise proteaasiga. Seejärel analüüsige enne ja pärast redutseerimist on-line LC/elektropihustus-ionisatsiooni massispektromeetria (ES-MS) ja/või LC/ES-MS/MS abil.
Yaohai Bio-pharma saab läbi viia ka Ellmani testi, mis on oluline osa täielikult tsüsteiini sisaldava toote hindamisel. Ellmani testis derivatiseerime sulfhüdrüülid, kasutades (5,5'-ditio-bis-[2-nitrobensoehapet]). Vabade tioolide taseme määramiseks analüüsitakse saadud produkti UV-spektrofotomeetriliselt 412 nm juures.