mRNA-d on laialdaselt kasutatud geenide või valkude funktsioonide uurimisel. Vahepeal on see tavaline profülaktiliste ja terapeutiliste bioloogiliste ravimite väljatöötamisel. RNA molekulide tavalise sünteesistrateegiana võimaldab in vitro transkriptsioon (IVT) meil saada tõhusalt kohandatud transkripte.
Yaohai Bio-Pharma on loonud kvaliteetse RNA pakkumiseks mRNA sünteesitehnoloogiate komplekti, nagu järjestuste kujundamine ja optimeerimine, IVT, puhastamine, lüofiliseerimine ja lipiidide nanoosakeste (LNP) kapseldamine. Kõik tooted vabastatakse rangete kvaliteedikontrolli (QC) standardite alusel.
19. aastal puhkenud COVID-2020 pandeemiaga on mRNA tehnoloogia hüppeliselt edasi arenenud ning sellega seotud teadusuuringud ja rakendused on saavutanud enneolematu arengu, sealhulgas profülaktilised vaktsiinid nakkushaiguste ennetamiseks, onkoloogilised terapeutilised vaktsiinid ja ravimid, kasvajateraapia, valguravi asendusravi, regeneratiivne meditsiin ning raku- ja geeniteraapia (CGT).
mRNA vaktsiin | mRNA teraapia |
|
Protsess | Valikuline teenus | Teenuse üksikasjad | Tarneaeg (tööpäev) | Saavutatav |
mRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine | Kodeerimisjärjestuste kavandamine ja optimeerimine | CDS järjestuse disain ja koodonite optimeerimine | 1-3 | Järjestusfail |
Mittekodeerivate järjestuste kujundamine ja optimeerimine | UTR, polyA järjestuste kujundamine ja optimeerimine | |||
Transkriptsioonimalli plasmiidi valmistamine | Rekombinantse plasmiidi preparaat | Geenide süntees | 7-10 | |
Plasmiidi amplifikatsioon ja ekstraheerimine | 4 | |||
Plasmiidi lineariseerimine ja puhastamine | ||||
mRNA in vitro transkriptsioon | Kaastranskriptsiooni piiramine (üheastmeline meetod) | In vitro transkriptsioon (IVT) / Cap analoog | 1-2 | N / A |
Nukleotiidide modifikatsioonid (UTP/CTP modifikatsioonid) | ||||
DNA matriitsi eemaldamine (DNaas I) | ||||
Ensümaatiline piiramine (kaheetapiline protsess) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotiidide modifikatsioonid (UTP/CTP modifikatsioonid) | ||||
DNA matriitsi eemaldamine (DNaas I) | ||||
mRNA puhastamine (liitiumkloriid/magnethelmed) | ||||
Ensümaatiline korkimine | ||||
mRNA puhastamine | Tavaline puhastusskeem | Liitiumkloriidi sadestamine | 1 | mRNA ravimaine |
Magnethelmeste puhastamine | ||||
Kromatograafia kolonni puhastamise skeem | Mitme kromatograafiameetodi kombinatsioon | 1-2 | ||
Puhvri vahetus | Ultrafiltratsioon | 1 | ||
mRNA lüofiliseerimine | Lüofiliseerimine | Eelkülmutamine | 2-3 | mRNA lüofiliseeritud pulber |
Esmane kuivatamine (sublimatsioon) | ||||
Sekundaarne kuivatamine (desorptsioon) | ||||
mRNA kapseldamine | LNP kapseldamine | LNP kapseldamine | 2-3 | mRNA-LNPDrugi toode |
Kontsentratsioon ja puhvrivahetus | ||||
mRNA kvaliteedi analüüs | mRNA ravimaine/lüofiliseeritud pulber | Kontsentratsioon, puhtus | 1 | Test Report |
Terviklikkus, korkimise tõhusus, polüA saba jaotus | 2-5 | |||
mRNA-LNP ravimtoode | Kapseldamise efektiivsus | 1 | ||
Osakeste suurus ja jaotus | ||||
Pinnalaeng | ||||
mRNA ekspressiooni valideerimine | 293T-rakkude hindamine | Rakkude katmine | 4 | |
Rakkude mööduv transfektsioon | ||||
Fluorestsentssignaali vaatlus | 1-3 | |||
Western blot (WB) / ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) |
5' Cap |
▪ Korgita ▪ Cap0, kaaskork ▪ Cap1, kaaskork ▪ Cap1, ensümaatiline piiramine |
5' UTR/3' UTR |
▪ Looduse UTR järjestus ▪ Mutant / Engineered UTR järjestus |
3' PolyA Tail |
▪ 100A ~120A saba (soovitatav) ▪ Segmenteeritud polüA saba ▪ Muud kohandatud sabad |
Modifitseeritud nukleosiidid |
▪ Modifitseerimata alused ▪ Pseudouridiin (Ψ) ▪ N1-metüülseudouridiin (N1Ψ) ▪ 5-metüültsütosiin (m5C) ▪ 5-metüüluridiin (m5U) ▪ 5-metoksüuridiin (5 moU) ▪ 2-tiouridiin (s2U) ▪ 2'-O-metüül-U ▪ Muud muudatused |
Integreeritud teenusevoog
Pakkuge mitmeid teenuseid alates esiotsa järjestuse kujundamisest kuni tagaotsa mRNA ettevalmistamise, kvaliteedikontrolli ja ekspressiooni valideerimiseni.
Rahvusvaheline tipptasemel järjestuste kujundamine ja optimeerimine
Professionaalne mRNA järjestuse kujundamine ja optimeerimine hõlbustavad tõhusat mRNA ekspressiooni.
Mitmekesised nukleotiidide modifikatsioonid
Suurendage tõhusalt mRNA ekspressiooni ja vähendage mRNA ebasoodsaid immuunvastuseid.
Küps puhastusplatvorm
Kombineerides tavapärase ja ise väljatöötatud puhastusmeetodi, saadakse kõrge puhtusastmega mRNA proovid
Täielik QC platvorm
Rikastage kvaliteedikontrolli valikuid, et täita rutiinsete testide nõudeid, nagu kontsentratsioon, A260/280 puhtus ja terviklikkus, aga ka kõrged kvaliteedikontrolli nõuded, nagu piirangu tõhusus/polüA jaotus.
Fast Delivery
Kohandatud mRNA-d saab tarnida nii kiiresti kui 7 päevaga, välja arvatud järjestuste süntees.