Kõik kategooriad
ENEN
mRNA jada disain

mRNA jada disain

Avaleht >  IVT RNA  >  Kohandatud RNA süntees  >  Kohandatud mRNA süntees  >  mRNA jada disain

IVT RNA

mRNA jada disain

Keskpunkti järgi on hõimuline RNA (mRNA) ülekandmise mosterina DNA-st proteiinideks.

mRNA mängib bioloogilist rolli, kodeerides proteiine elus organis, ja eukariotsete organismide täisiksmRNA koosneb viiest komponendist: 5' Kap (kappstruktuur), 5' UTR (kodeerimata piirkond), ORF (avatud lugemisraam), 3' UTR ja 3' polyA hääl (polyadeeniline hääl).

undefined

Teenuste üksikasjad
Protsess Valikuline teenus Teenuste üksikasjad Toimetamisperiood (päev)
mRNA jada kujundamine ja optimeerimine Koodivate jadade kujundamine ja optimeerimine

CDS jada võrdlemine

CDS kodooni optimeerimine

1
Mittekodeerivate jadade kujundamine ja optimeerimine

5' UTR jada disain ja optimeerimine

3' UTR jada disain ja optimeerimine

polyA jada disain ja optimeerimine

1-2
Kohandatavad valikud
5’ UTR/3’ UTR
  • Looduslik UTR-juht
  • Mutant/Muundatud UTR-juht
3' PolyA saba
  • 100A ~120A saba (soovitatav)
  • Segmenteeritud polyA saba
  • Muud kohandatud sabad
Tavalised strateegiad mRNA jada disainimiseks
mRNA komponendid Bioloogilised funktsioonid Optimeerimisstrateegiad
5' Kap Kaitseb mRNA eksoneükleasite poolt toimuva hajumast eest ja koostöös polyA sabaga lõpul 3', polyA siduv proteiinide ja tõlgete alguse faktoriproteiinidega käivitab protseini tõlge. Looduslik Cap1 struktuur vältib möödaparemituste tuvastamise reseptoreid ning nii vähendab loodvat immuunivastut, mis saab teha ühe-sammulise kokkutranskriptsioonilise kapimise või kahe-sammulise enzyymkapimise abil [vaata mRNA enzyymkapimist ja kokkutranskriptsioonilist kapimist detailides].
5' UTR 5' UTR'i võivad ribosoomid tuvastada, määratleda mRNA tõlkimise ja mõjutada mRNA stabiilsust. Sisaldavad Kozaki jadasid ilma liiga stabiilse sekundaarstruktuurita. Loodud UTR'id kõrgelt ekspresseeritavatest geenidest on eelistatud in vitro transkriptsiooni (IVT) mRNA-de jaoks, nagu α-globiin ja β-globiin.
CDS Proteiini-koodivad piirkonnad ja kodeerivad jadased antigeenide, antikehade või teiste funktsionaalsete proteiinide jaoks. Koodonoptimeerimine suurendab tõlkimise taseme, märkides, et mõned mitte-optimaalsed koodonid võivad mängida rolli proteiini lihtspiraamises.
3’ UTR Määratlevad mRNA tõlkimise ja stabiilsuse. Loodud UTR'id kõrgelt ekspresseeritavatest geenidest on eelistatud IVT mRNA-de jaoks, nagu α-globiin ja β-globiin.
3’ polyA saba Määratlevad proteiini ekspresiooni ja kaitsavad kapistruktuuri hajumast. Piisav pikkus (100-150 bp) on vajalik; transkriptsiooniplaasma polyA-häli kodeerimine tagab täpsema polyA-halli pikkuse.
Meie omadused
  • Mitmekesine UTR allikate valik

Mitmeid allikaid ülimalt väljenduvatest loodustest ja muudetud UTR teekidest; tõelise UTR muutmismeetod;

  • Tehnoloogiline CDS optimeerimismeeskond

Koostöös spetsialistlike AI algoritmide meeskonnaga täiendada koodooni optimeerimist.

  • Ühtlane polyA-halli jagamine

Lisa polyA-järjendid DNA-mallide järgi, et kontrollida mRNA pikkust täpsemalt.

  • Mitmekesed optimeerimiskombinatsioonid

Saavuta tõhus mRNA väljendamine madalaima immunogeensega.

Praktikunne

Kahe raportööri mRNA järjestuse disain: mCherry-eGFP mRNA

Yaohai Bio-Pharma mRNA teenus jätkab arendamist kahe raportööri gene tandemjada disainimisega ja optimeerimisega, mis võimaldab kahe gene koos väljendamist.

Kasutades traditsioonilist transfeerimisreost, transfekteeritakse kahe gene tandemjada mCherry-eGFP mRNA 293T rakudesse ning tuvastatakse kaks fluoresentsignaali: mCherry (punane) ja tugevasti fluoreseeriv roheline prot eiine (eGFP), mis väljenduvad 48 tunni pärast samal ajal, ja liitmiskuju on esiletõstetud kollases.

图片

图片

MCherry-eGFP mRNA väljendamine 293T rakudes

Saada Tasuta Hindamiskinnitus

Get in touch