Plasmid DNA, nagu in vitro transkriptsioon (IVT) mall, on oluline tooraine mRNA tootmiseks. Kõrge plasmid DNA tootlus, kõrge puhasus ja kõrge taastamine on peamised eesmärk plasmidprotsessi arendamisel.
Yaohai Bio-Pharma pakub ühepealset lahendust plasmidi arendamiseks, sealhulgas ülemvoo (fermentatsioon), madalamvoo (puhastamine) protsesside arendamiseks, protsessi karakteriseerimiseks ja valideerimiseks. Meil on laias kogemus plasmidi tootluse suurendamisega ja selle eraldamisega keerukatest maatriksidest, arendades ja optimeerides fermentatsiooni, puhastamise ja saaste eemaldamise protsesse.
Põhiline bioprotsess plasmidi tootmiseks hõlmab: Escherichia coli (E. coli) fermentatsioon, rakude kogumine ja alkaline liüs, seltsustamine, keskmistamine, kolme võetud kromaatikaprotsess (võtmine, vahepuhastus ja lõpppuhastus) ning keskmistamine.
Teenuste üksikasjad | Ühikutoo | Parameetrid |
E. coli fermentatsioon |
Klaaspuudel kliivimiseks | Meedi koostis, antibiotikum, inokulumi maht, kasvuhetkeline temperatuur ja jne. |
Fermentaator (7 L) |
Antibiotikum, inokulumi maht, kasvuhetkeline temperatuur, pH, lahunenud hapniks (DO), toitumismood (nt üleminek-toitumine), toitumismeedia, fermentatsiooni aeg ja jne. |
|
Rakkide kogumine | Mikrofiltratsioon | Standard E. coli kogumisprotsess |
Rakkude lüüs | Rakku uuesti suspenderdamine, alkaline lüüs, neutraliseerimine | Alkaali suhe, lüüsiaeg |
Selgitamine | Filtratsioon | Tühi filtreerimine, 20 µm ja 5 µm filterite jada (eelistatav) |
Kontsentraatsioon | Ultrafilteerimine, tangentsuunaline filtreerimine | Pordisuurus (või NMWC), Transmembraaniline surve (TMP), Flukss, filtraatvolume meelepärast suhe membraani pindalale |
Kolmevälisne kromatograafia | Suuruse järjestamise kromaatmeetod (SEC) või geelfiltratsioonikromaatmeetod (GFC) | Veergu pikkus ja läbimõõt, pufferi koostis, ekstraktseerimise maht, liikumisfase koostis (adsorptsioon ja desorptsioon), pH, vooluhinne, tasakaalustamine, sidumine, tühjendamine ja elutseerimise tingimused. |
Afinseeriv kromaatmeetod (AF) | ||
Negatiivelt laenguvaidseks vahetuseks suunatud kromaatomeetod (AEX) | ||
Kontsentraatsioon | Ultrafilteerimine, tangentsuunaline filtreerimine | Pordisuurus (või NMWC), Transmembraaniline surve (TMP), Flukss, filtraatvolume meelepärast suhe membraani pindalale |
Rohkem bioloogiliste ainetega seotud töötluste lahendusi |