Рекамбінатны энзым для лячэння
Лячальныя энзымы, якія атрымліваюцца з дапамогай біатэкналагічных працэсав, шырока выкарыстоўваюцца ў кlinikальных прымененнях, уключаючы замяненне энзымоў, разкладанне накапліўшыхся метабалітаў і токсінаў, лячэнне рака і рэдагаванне гена. Некалькі лячальных энзымоў можна атрымаць у мікробным сістэме вырашэння.
Рекамбінантны энзым як матэрыял
Для выработы RNA з даўняй кодыраванай цепкі (напрыклад, mRNA, saRNA, circRNA), працэсу выработы антыйдна-лічыных кангліят (ADC) і іншых выкарыстоўваюцца некалькі энзымоў. Мікрабіальныя энзымы больш эканомічныя, чым тэ дзеяцца ў мlekавітальнічых клетках, у особлівасці сістэма экспрэсіі E. coli.
|
Зastosаванне
|
Энзымы
|
Функцыя
|
|
Энзымы для лінейнай выработкі RNA, без RNase
|
Рэстрыкцыйны эндануклеаза
|
Лінеарызацыя плазміднай ДНК (pDNA), каб ухіліць вытворэнне больш агульных транскрыптаў.
|
|
Палімераза RNA T7 (T7 RNAP)
|
Прыцягнуты да проматара T7 і генеруе спецыфічны транскрыпт RNA; Грае ключавую ролю падчас реакцыі транскрыпцыі віtro.
|
|
Энзым закрываць капсуламі Vaccinia
|
Дадaje структуры Cap да 5′ канцаў IVT mRNA.
|
|
Пірафосфата́за, неарганічная (iPPase)
|
Прадукаць пірофосфат падчас рэакцыі IVT.
|
|
Інгібітар RNase, рекамбінатны
|
Прыпыніць дзеянне RNase падчас рэакцыі IVT.
|
|
DNase I
|
Выдаліць ДНК-шаблон.
|
|
Энзым для выработкі цыркуляванага RNA, бяз RNase
|
RNase R
|
Пераварыць лінейны RNA і абагаціць кольцаўы RNA.
|
|
Энзым-медыйтыя глікановая кан'югацыя
|
Пептыдна-N-глікозідаза (PNGase F)
|
Разрывае амідную сувязь паміж першым sacharidam GlcNAc і боковым ланцугам Asn297; Адыяўняе гліканаў ад антыйснікаў IgG.
|
|
Бактыральная трансглутаміназа (BTG)
|
Кан'югуюць пляцы ў месцы для стварэння ADC.
|
|
Сортаза A
|
Каталізуюць спалучэнне белкаў.
|
|
β1,4-галактозідаза
|
Адыяўняе ўсе кансавыя галактозы і фармуе аднородны ізасформ G0 антыйсніка.
|
|
β1,4-галактозылтрансфераза (Gal-T)
|
Перадае цукорную рэзіду з хімічна рэакцыйнай функцыянальнай група.
|
|
α2,6-сіалілтрансфераза (Sial T)
|
Уключыць канчатковыя рэзіду саліяў у арODYчную гликанавую структуру антывіруса.
|
|
Энзымнае пераўтварэнне гліканоў і глікальнай інжынерыі
|
Эндо-N-ацэтальглюкозамідаза (ENGase)
|
Гідралізаваць β1,4-глікозідную сувязь паміж GlcNAcβ1–4GlcNAc N-гліканоў; Удаліць N-звяzanыя гліканы ў рэгіёне Fc IgG-антывірусаў.
|
|
Эндоглікозідаза S (EndoS)
|
|
|
Глікозілпераносцы (GTs)
|
Пераносіць N-гліканы ад оксазаліну на дэфукозыраваныя IgGs.
|
|
Іншыя
|
Энзымы, вырабляюцца мікробным штрыхам
|
Застаўленая патраба
|
Рекамбінатны энзым як рэагент
Протеазы для адмінення тэгав
Фузыяўныя тэгі часта выкарыстоўваюцца, каб падзейніць розтачальнасць і стаялісць рекамбінантных белкаў з цярты, дзеля латнейшага іх адчыненні. Папулярнымі тэгамі яляюцца His-тэг, белак, звязваемы з маляцовымі (MBP), глутатэна-S-трансфераза (GST) і іншыя.
Звычайна паміж фузыяўным тэгам і секвенцыяй мэтавага белка ўводзіцца спалучальная секвенцыя для адмінення тэгу. Адміненне фузыяўных тэгаў патрабуе пратэаз, якія дзеянне маюць на спецыфічныя месцы, такія як энтерокіназа (EK), тромбін, протеаза табачнага віруснага шкодніка (TEVp), пратэаза чалавечага ринавіруса 3C (HRV3C), маленькая убіквітіная модыфікуючая пратэаза (SUMO), протеаза табачнага віруснага моршчыста (TVMV) і карбоксілаза A/B (CPA/CPB).
|
Тып
|
Энзымы
|
Месца рэканістрацыі
|
|
Эндопротеазы для адмінення тэгаў
|
Энтерокіназа (EK), энтерапептыдаза
|
DDDDK↓
|
|
тромбін
|
LVPR↓GS
|
|
Протеаза TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
Пептыдаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
Пептыдаза SUMO
|
Трэцяя структура SUMO
|
|
Пептыдаза TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Экспептыдазы для адбырання тэгаў
|
Карбоксипептыдаза A (CPA)
|
Амінокіслоты ў каралёвай чарцы, кропка прымаючы ў уліку не Pro, Lys і Arg
|
|
Карбоксипептыдаза B (CPB)
|
C-кінцевыя Lys і Arg
|
Іншыя протэазы, нуклеазы і амідазы
|
Зastosаванне
|
Энзымы
|
Функцыя
|
|
Іншыя протэазы
|
Протеаза K
|
Серынная протеаза, якая пераварвае белкі праз гідралізаванне пептыдных звязоў.
|
|
IdeS, IgG протеаза
|
Энзымы, якія разламліваюць IgG (Ides) ў спецыфічным месцы, вырабляючы фрагменты Fab і Fc
|
|
IgA1 протеаза
|
Протеалітый энзым, які разламлівае спецыфічнае месца ў сяродковай частцы чалавечага immunoglobulin A1 (IgA1).
|
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Расчынае нуклеічныя кисліны (ДНК ці РНК) праз гідралізацыю фосфадыэстраў.
|
|
Рэстрыкцыйны энзым
|
Эндануклеаза, якая расчынае ДНК у ці сабачай близошчы ад спецыфічных месцаў.
|
|
Амідаза
|
PNGase F
|
Расчынае паміж найвнутрэйшым N-ацэтальглюкозаміном (GlcNAc) і аспарагіновымі рэзідурамі высоце манозовых, гібрыдных і складаных олігасахарыдаў.
|
Yaohai Bio-Pharma Прапануе Агульнае Рашэнне CDMO Для Рекамбінатных Энзымоў
Спадарожыце:
[1] Генніган ЯН, Лынч МД. Мінулае, цяперашняе і будувае ферментных тэрапій. Drug Discov Today. 2022 Січ;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
