Рэкамбінантны фермент для тэрапеўтычнага выкарыстання
Тэрапеўтычныя ферменты, атрыманыя з дапамогай біятэхналагічных працэсаў, шырока выкарыстоўваюцца ў некалькіх клінічных мэтах, у тым ліку для замяшчальнай ферментнай тэрапіі, дэградацыі назапашаных метабалітаў і таксінаў, лячэння рака і рэдагавання геному. Некалькі тэрапеўтычных ферментаў могуць быць атрыманы ў мікробнай сістэме экспрэсіі.
Рэкамбінантны фермент як матэрыял
Ёсць некалькі ферментаў, якія выкарыстоўваюцца для вытворчасці РНК з доўгім кадаваннем (напрыклад, мРНК, саРНК, circRNA), вытворчасці кан'югатаў антыцела і лекаў (ADC) і іншых. Ферменты, вырабленыя мікробамі, больш эканамічна эфектыўныя, чым клетка млекакормячых, асабліва сістэма экспрэсіі E. coli.
|
дадатак
|
Ферменты
|
функцыя
|
|
Ферменты для вытворчасці лінейнай РНК, без РНКазы
|
Эндануклеазы рэстрыкцыі
|
Лінеарызацыя плазміднай ДНК (пДНК), каб пазбегнуць стварэння больш доўгай стэнаграмы.
|
|
Т7 РНК-палімераза (T7 RNAP)
|
Звязвацца з промотором Т7 і генераваць спецыфічны транскрыпт РНК; Гуляюць ключавую ролю падчас рэакцыі расшыфроўкі in vitro (IVT).
|
|
Вакцына кэпінг фермент
|
Дадайце структуры Cap да 5'-канцоў мРНК IVT.
|
|
Пірафасфатаза, неарганічная (iPPase)
|
Прадухіліць пірафасфат падчас рэакцыі IVT.
|
|
Інгібітар РНКазы, рэкамбінантныя
|
Інгібіруюць актыўнасць РНКазы падчас рэакцыі IVT.
|
|
ДНКаза I
|
Выдаліце шаблон ДНК.
|
|
Фермент для вытворчасці circRNA, без РНКазы
|
РНКаза Р
|
Пераварыць лінейную РНК і ўзбагаціць кальцавую РНК.
|
|
Ферментна-апасродкаваная кан'югацыя глікану
|
Пептыд-N-гліказідаза (PNGase F)
|
Расшчапляе амідную сувязь паміж першым сахарыдам GlcNAc і бакавым ланцугом Asn297L; Вызваленне гліканаў з антыцелаў IgG.
|
|
Бактэрыяльная трансглутаміназа (БТГ)
|
Кан'югат карысных нагрузак на сайце спецыяльна для стварэння АЦП.
|
|
Сартас А
|
Каталізуюць перавязку бялкоў.
|
|
β1,4-галактозидаза
|
Вызваляюць усе канчатковыя галактозы і ўтвараюць гамагенную ізаформу G0 антыцелаў.
|
|
β1,4-галактазілтрансфераза (Gal-T)
|
Перанесці астатак цукру з хімічна актыўнай функцыянальнай групай.
|
|
α2,6-сіалілтрансфераза (Sial T)
|
Уключыць канчатковыя рэшткі сіялавай кіслаты ў структуру натыўнага глікану антыцелаў.
|
|
Фермент-апасродкаванае ремоделірованія глікана і гликоинженерия
|
Энда-N-ацэтылглюкозамінідаза (ENGase)
|
Гідролізаваць β1,4-гліказідную сувязь паміж GlcNAcβ1–4GlcNAc N-гліканаў; Выдаленне N-звязаных гліканаў на Fc-вобласці антыцелаў IgG.
|
|
Эндагліказідаза S (EndoS)
|
|
|
Глікозілтрансферазы (ГТ)
|
Перанесці N-глікан оксазолін у дефукозилированные IgG.
|
|
іншыя
|
Ферменты, выпрацоўваемыя мікробным штамам
|
Індывідуальныя патрэбы
|
Рэкамбінантны фермент у якасці рэагента
Пратэазы для выдалення тэгаў
Тэгі Fusion часта выкарыстоўваюцца для паляпшэння растваральнасці і стабільнасці цікавых рэкамбінантных бялкоў і палягчэння іх ачысткі. Звычайна выкарыстоўваюцца тэгі ўключаюць His-тэг, бялок, які звязвае мальтозу (MBP), глутатыён-s-трансферазу (GST) і г.д.
Як правіла, паслядоўнасць лінкера дадаецца паміж тэгам зліцця і паслядоўнасцю бялку-мішэні, каб выдаліць тэг. Для выдалення злітых тэгаў патрэбны сайт-спецыфічныя пратэазы, такія як энтэракіназа (EK), трамбін, пратэаза віруса травлення тытуню (TEVp), пратэаза 3C рынавіруса чалавека (HRV3C), пратэаза малога бялку, які мадыфікуе убіквіцін (SUMO), вірус плямістасці тытунёвых жылак ( TVMV) пратэазы і карбоксипептидазы A/B (CPA/CPB).
|
тып
|
Ферменты
|
Сайт прызнання
|
|
Эндапратэазы выдалення тэгаў
|
Энтерокиназа (ЭК), энтеропептидаза
|
DDDDK↓
|
|
трамбін
|
LVPR↓GS
|
|
Протеаза TEV
|
ENLYFQ↓G
|
|
Пратэаза HRV3C
|
LEVLFQ↓GP
|
|
Протеаза SUMO
|
СУМО троесная структура
|
|
Пратэаза TVMV
|
ETVRFQG↓S
|
|
Экзопротеазы выдалення тэгаў
|
Карбаксіпептыдаза А (CPA)
|
C-канцавыя амінакіслоты, акрамя Pro, Lys і Arg
|
|
Карбаксіпептыдаза B (CPB)
|
С-канцавы Lys і Arg
|
Іншыя пратэазы, нуклеазы і амідазы
|
дадатак
|
Ферменты
|
функцыя
|
|
Іншыя протеазы
|
Пратэаза К
|
Серінавая пратэаза, якая расшчапляе вавёркі шляхам гідралізу пептыдных сувязяў.
|
|
IdeS, IgG протеаза
|
Ферменты, якія расшчапляюць IgG (Ides), якія расшчапляюць у пэўным месцы імунаглабулін G (IgG), ствараючы фрагменты Fab і Fc
|
|
Протеаза IgA1
|
Пратэялітычны фермент, які расшчапляе спецыфічны сайт у паслядоўнасці шарнірнай вобласці імунаглабуліну А1 (IgA1).
|
|
Нуклеаза
|
Нуклеаза
|
Расшчапляе нуклеінавыя кіслоты (ДНК або РНК) шляхам гідралізу фосфадыэфірных сувязяў.
|
|
Абмежаваць фермент
|
Эндануклеаза, якая расшчапляе ДНК у пэўных месцах або побач з імі.
|
|
Амідаза
|
PNGase Ф
|
Расшчапляе паміж самымі ўнутранымі рэшткамі N-ацетилглюкозамина (GlcNAc) і аспарагіну гібрыдных і складаных алігацукрыдаў з высокім утрыманнем маннозы.
|
Yaohai Bio-Pharma прапануе ўніверсальнае рашэнне CDMO для рэкамбінантных ферментаў
Спасылка:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Мінулае, сучаснасць і будучыня ферментных метадаў лячэння. Drug Discov Today. Студзень 2022 г.; 27 (1): 117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
BE
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
MK
UR
BN
