mRNA шырока выкарыстоўваецца ў даследаванні функцый генаў ці белкаў. Падчас гэтага яно часта зустрэчаецца ў развіцці прафілацтычных і лячальных біягалактых. Як частая стратэгія сінтэза RNA-малекул, транскрыпцыя за межамі організама (IVT) дазваляе нам атрымліваць настраеныя транскрыpty звышайшай ефектыўна.
Yaohai Bio-Pharma стварыла набор технологій сінтэза mRNA для атрымання вышэйшага якасці RNA, такіх як дызайн і аптымізацыя секвенцыі, IVT, чыстка, ліофілізацыя і энкапсуляцыя у ліпідных наначастинах (LNP). Усе produkty выдаюцца па строгіх стандартakh каントролю якасці (QC).
З пачатку пандэміі COVID-19 у 2020 годзе, мРНК-тэхналогія розвіўлася з неймальваючай хуткасцю, і яе сувязаныя даследаванні і прыменення атрымалі небывалы рост, уключна вакцыны для прадапаложэння ад інфекцыйных захворванняў, лячасьцвы онкалагічных вакцин і лекарстваў, лячасьцву тумараў, замена белкаў, рэгэнaratыўнай медицыне і клеткавай і генаўнай лячасьцве (CGT).
вакцына mRNA | лячасьцвы мРНК |
|
ПРОЦЕС | Апцыянальная служба | Дэталі сервісу | Тэрмін выканання (робальны дзень) | Выданне |
праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці mRNA | Праектаванне і аптымізацыя кодуючых паследавательнасцей | Дызайн паследавання CDS і аптымізацыя кодонаў | 1-3 | Файл паследавання |
Праектаванне і аптымізацыя не кодуючых паследавательнасцей | Дызайн і аптымізацыя паследаванняў UTR, polyA | |||
Падготовка плазміднага шаблона транскрыпцыі | Падготовка рекамбінацыйных плазмід | Сінтэз гена | 7-10 | |
Ампліфікацыя і вылічэнне плазмід | 4 | |||
Лінейрызацыя і чысценне плазмід | ||||
ін вітро транскрыпцыя mRNA | Капінг падчас транскрыпцыі (адна-этапны метад) | Транскрыпцыя вітру (IVT) / Аналаг капа | 1-2 | Н/А |
Модыфікацыі нуклеатадаў (модыфікацыі UTP/CTP) | ||||
Выдаленне ДНК-шаблона (ДНаза I) | ||||
Энзыматычны капінг (два-этапны працэс) | IVT | 2-3 | ||
Модыфікацыі нуклеатадаў (модыфікацыі UTP/CTP) | ||||
Выдаленне ДНК-шаблона (ДНаза I) | ||||
чыстка mRNA (хлорак літава / намагнітае часткі) | ||||
Энзыматычны капінг | ||||
чыстка mRNA | Прадстаўны схема чысткі | Адкладванне хлоракам літава | 1 | падлога лекарства mRNA |
Чысціць магнітнымі бусінкамі | ||||
Схема чысцэння ў ступцы хроматографіі | Камбінацыя колькіх метадаў хроматографіі | 1-2 | ||
Змена буфара | Ультрафільтрацыя | 1 | ||
ліофілізацыя mRNA | Ліофілізацыя | Папярэдняя заморозка | 2-3 | ліофілізаваны порошок mRNA |
Першае сушэнне (сублімацыя) | ||||
Другая сушка (дезабсорцыя) | ||||
мRNAЭнкапсуляцыя | Энкапсуляцыя LNP | Энкапсуляцыя LNP | 2-3 | мRNA-LNPЛекарственная продукция |
Канцэнтрацыя і замена буфера | ||||
аналіз якасці mRNA | мRNA лекарственная субстанция/ліофілізаваны пыль | Канцэнтрацыя, чыстата | 1 | Прапозіцыя навуковых даследванняў |
Цэлыść, эфектыўнасць закрывання, распрадзел хвоста polyA | 2-5 | |||
мRNA-LNP лекарственная продукция | Эфектыўнасць энкапсуляцыі | 1 | ||
Размер чырынак і распрадзел | ||||
Паверхневыя заряд | ||||
пацверджэнне экспрэсіі mRNA | ацэнка клетак 293T | Клетачнае пластуваўванне | 4 | |
Часовая трансфекцыя клетак | ||||
Набліўванне флуарэсцэнтнага сігналу | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Аналітыйным методам ELISA |
5' Кап |
▪ Някапаваны ▪ Cap0, спалучана капаванасць ▪ Cap1, спалучана капаванасць ▪ Cap1, энзыматычная капаванасць |
5’ UTR\/3’ UTR |
▪ Прыродная секвенцыя UTR ▪ Мутагенная/інжынерная секвенцыя UTR |
3' ПоліA хвост |
▪ 100A ~120A хвост (рэкамендаваны) ▪ Сегмэнтованы хвост polyA ▪ Іншыя даследаваныя хвосты |
Мадифікаваныя нуклеазы |
▪ Немадифікаваныя базы ▪ Псевдаядынын (Ψ) ▪ N1-Метылпсевдаядынын (N1Ψ) ▪ 5-Метылцытызін (m5C) ▪ 5-Метылурыдын (m5U) ▪ 5-Метаксыурыдын (5moU) ▪ 2-Тыйянурыдын (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Іншыя модыфікацыі |
Інтэграваная сістэма сервісу
Прапануем серыю сервісаў ад дызайну парадкаў на пераднім этапе да падго́товкі mRNA, кантролю якасці і валідацыі экспрысіі ў заднім этапе.
Сучасны дызайн і аптымізацыя парадкаў
Прафесійны дызайн і аптымізацыя mRNA спрыяжае эфектыўнай экспрысіі mRNA.
Разнастайныя мадыфікацыі нуклеатадаў
Эфектыўна павялічваюць экспрысію mRNA і зменшуюць небезпасныя імунныя адказы mRNA.
Дасведчанае чысцёвы платформа
Пры злучэнні традыцыйнага і самастойна вымыханага спосабу чысцення атрымліваюцца пробы mRNA з вялікай чыстотай
Паўнастая платформа КС
Багатлеціць магчымасці КС, каб задавальняць патрабаванні рутынных тэsts, такіх як канцэнтрацыя, чыстата A260/280, і цэласнасць, а таксама высокія патрабаванні ў кантроле якасці, такія як эфектывнасць капіння/дыстырыбутыў polyA.
Шырокае дастаўленне
Дасланне спасаблена ў mRNA можа быць завершана за 7 дзён, за выключэннем замовлення сінтэза секвенцыі.