Падрыхтоўка CircRNA патрабуе лінейнай РНК у якасці матэрыялу-папярэдніка (папярэдніка РНК) для цыклізацыі, дзе папярэднік РНК звычайна рыхтуецца з выкарыстаннем лінеарызаванай плазміднай ДНК у якасці транскрыпцыйнай матрицы і транскрыбуецца in vitro з дапамогай РНК-палімеразы Т7.
Высокая якасць плазмидной ДНК неабходная для транскрыпцыі in vitro (IVT). Yaohai Bio-Pharma, заснаваная на спелай платформе паслуг па падрыхтоўцы плазмід, можа забяспечыць высокую чысціню і стандартную паслугу па падрыхтоўцы плазміднай ДНК (пДНК) высокай чысціні для забеспячэння цэласнасці прадуктаў IVT.
Падрабязнасці паслуг
| Працэс | Дадатковая паслуга | Падрабязнасці аб паслузе | Перыяд дастаўкі (рабочы дзень) |
| Прэпарат цыркулярнай плазміды | Сінтэз генаў | Сінтэз генаў (трэці бок) | 7-10 |
| Ампліфікацыя плазмид | Ампліфікацыя плазмид | 2 |
| Вылучэнне плазмид |
| Лінеарызаваны прэпарат плазміды | Лінеарызацыя і ачыстка плазмид | Лінеарызацыя плазміды | 1 |
| Ачыстка ДНК лінеарызацыі |
| Кантроль якасці плазмидной ДНК | Чысціня канцэнтрацыі | Ультрафіялетавая (УФ) спектрафатаметрыя | 1-2 |
| Канфармацыя плазміды | Электрафарэз у агарозным гелі (AGE) |
| Капілярны электрафарэз (КЭ) - неабавязкова |
| Ідэнтыфікацыя плазміды | Ідэнтыфікацыя ферментаў рэстрыкцыі/ AGE |
нашы Асаблівасці
Гнуткі выбар метадаў лінеарызацыі
- Высокая хуткасць аднаўлення
Аптымізацыя метадаў экстракцыі і ачысткі ДНК для дасягнення высокіх паказчыкаў аднаўлення.
Строгія стандарты кантролю тэхналагічнага працэсу з хуткасцю звышспіральнай канфармацыі ўзораў плазмід для даследаванняў больш за 80%.
Высокія стандарты і высокая эфектыўнасць падрыхтоўкі плазмід і паслуг па кантролі якасці для задавальнення эксперыментальных патрэб.
Кейс
Калі ўзяць у якасці прыкладу прадукт Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA, суперскручаны каэфіцыент узораў плазмід з матрычнымі транскрыпцыямі (даследчы ўзровень) складае больш за 70 %, з хуткасцю лінеарызацыі, блізкай да 100 %.
ЦыркРНК mCherry рыхтуецца з лінеарызаванай плазміды ў якасці шаблону і трансфецыруецца ў клеткі 293T. Высокі ўзровень флуарэсцэнцыі (чырвоная флуарэсцэнцыя) выяўляецца праз 24 гадзіны пасля трансфекцыі, які ўзмацняецца праз 48 гадзін і ўсё яшчэ можа быць выяўлены на 7-ы і 14-ы дзень пасля трансфекцыі.
Бялок mCherry стабільна і эфектыўна экспрэсуецца, а чысціня шаблону транскрыпцыі можа адпавядаць патрабаванням лекавага прадукту circRNA (DP) высокай якасці.
Праверка экспрэсіі in vitro circRNA mCherry
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
