У працэсе падрыхтоўкі мРНК транскрыпцыі in vitro (IVT) патрабуецца лінеарызаваная плазмідная ДНК у якасці матрыцы транскрыпцыі для IVT з дапамогай РНК-палімеразы Т7. Высакаякасная плазмидная ДНК мае вырашальнае значэнне для транскрыпцыі in vitro.
Yaohai Bio-Pharma можа прапанаваць лінеарызаваную паслугу па падрыхтоўцы плазміднай ДНК высокай чысціні і высокіх стандартаў для дасягнення эфектыўнай транскрыпцыі IVT.
Падрабязнасці паслуг
| Працэс | Дадатковая паслуга | Падрабязнасці аб паслузе | Перыяд дастаўкі (рабочы дзень) |
| Прэпарат цыркулярнай плазміды | Сінтэз генаў | Сінтэз генаў (трэці бок) | 7-10 |
| Ампліфікацыя плазмид | Ампліфікацыя плазмид | 2 |
| Вылучэнне плазмид |
| Лінеарызаваны прэпарат плазміды | Лінеарызацыя і ачыстка плазмид | Лінеарызацыя плазміды | 1 |
| Ачыстка ДНК лінеарызацыі |
| Кантроль якасці плазмидной ДНК | Чысціня канцэнтрацыі | Ультрафіялетавая (УФ) спектрафатаметрыя | 1-2 |
| Канфармацыя плазміды | Электрафарэз у агарозным гелі (AGE) |
| Капілярны электрафарэз (КЭ) - неабавязкова |
| Ідэнтыфікацыя плазміды | Ідэнтыфікацыя ферментаў рэстрыкцыі/ AGE |
нашы Асаблівасці
Гнуткі выбар метадаў лінеарызацыі
- Высокая хуткасць аднаўлення
Аптымізацыя метадаў экстракцыі і ачысткі ДНК для дасягнення высокіх паказчыкаў аднаўлення.
Строгія стандарты кантролю тэхналагічнага працэсу з хуткасцю звышспіральнай канфармацыі ўзораў плазмід для даследаванняў больш за 80%.
Высокія стандарты і высокая эфектыўнасць падрыхтоўкі плазмід і паслуг па кантролі якасці для задавальнення эксперыментальных патрэб.
Кейс
Калі ў якасці прыкладу браць прадукт мРНК_люцыферазы каталога Yaohai Bio-Pharma, то ўзор плазміды шаблону транскрыпцыі (даследчы клас) мае суперспіральныя суадносіны больш за 90%, каэфіцыент лінеарызацыі, блізкі да 100%, і наступны каэфіцыент транскрыпцыі да 1:200 ( лінеарызаваная плазмидная ДНК:мРНК).
МРНК_люцифераза, атрыманая шляхам падрыхтоўкі лінеарызаванай плазміды ў якасці матрыцы, трансфецируется ў клеткі 293T, і актыўнасць фермент-субстратнай рэакцыі ацэньваецца праз 24 гадзіны пасля трансфекцыі.
Відавочны моцны сігнал актыўнасці люциферазы можна выявіць, г.зн. бялок люциферазы эфектыўна экспрэсируется, мяркуючы, што чысціня шаблону транскрыпцыі можа цалкам задаволіць патрабаванне высакаякаснага падрыхтоўкі мРНК.
Аналіз суадносін суперскручанай плазміды
Праверка экспрэсіі мРНК люциферазы In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
