У залежнасці ад цэнтральнага дактрэната, расічальная RNA (mRNA) — гэта мост для перадачы генаў ад DNA да белкаў.
mRNA ўжывает біялагічную ролю шляхам кодавання белкаў у живых арганізамах, і дарослае mRNA ў еукарыятных арганізамах складаецца з пяці кампанент: 5' Cap (каповая структура), 5' UTR (неракодуючая зона), ORF (адкрыты чытальны рамп), 3' UTR, і 3' polyA хвост (поліадэнавы хвост).
Дэталі служб
| ПРОЦЕС |
Апцыянальная служба |
Дэталі сервісу |
Перыяд дастаўкі (Дзень) |
| праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці mRNA |
Праектаванне і аптымізацыя кодуючых паследавательнасцей |
Выравнянне паследавательнасці CDS
Аптымізацыя кодонавай паследавательнасці CDS
|
1 |
| Праектаванне і аптымізацыя не кодуючых паследавательнасцей |
праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці 5' UTR
праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці 3' UTR
праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці polyA
|
1-2 |
Настраімыя апцыі
| 5’ UTR\/3’ UTR |
- Паслядоўнасць UTR натуральнага паходжання
- Паслядоўнасць UTR мутанта\/інжынеравана
|
| 3' ПоліA хвост |
- хвост 100A ~120A (рэкамендавана)
- Сегмэнтаваны поліA хвост
- Іншы цягамы хвост
|
Звычайныя стратэгіі дызайну паслядоўнасці mRNA
| кампаненты mRNA |
Біялогічныя функцыі |
Стратэгіі аптымізацыі |
| 5’ Кап |
Захішчыць мРНК ад дэградацыі экзонуклеазамі і працаваць разам з поліА хвостам у 3' канцы, белкамі, якія аб'яднаны з поліА, і фактарамі ініцыяцыі трансляцыі для пачатку пераводу белка. |
Прыродная структура Cap1 ухіляе выявлення рэцэптарамі патарговых сігналіў і, таму, зменшвае натуральную імунную адказ, што можна атрымаць праз адзінковую капінга ў час транскрыпцыі ці двухэтапную энзымную капінгу [доклады ў артыкулах про энзымную капінгу і капінгу падчас транскрыпцыі]. |
| 5’ НТР |
5' НТР можа быць распаўнёнутая рыйбасомамі, рэгулюе трансляцыю мРНК і ўплывае на стабільнасць мРНК. |
Уключайце секвенцыі Козак без надта стаялой другорыднай структуры. Прыродныя НТР висока экспрыміраваных генаў preferredStyle даецца для трансскрыпцыі ў тэчэнні (IVT) мРНК, такіх як α-глабін і β-глабін. |
| КДС |
Рэгіоны, якія кодуюць белкі, і секвенцыі, якія кодуюць антыгены, антывыябы или іншыя функцыяльныя белкі. |
Аптымізацыя кодонаў павялічвае ўзроўень трансляцыі, заўважваючы, што якія-небудзь неаптымал'ныя кодоны могуць граць ролю ў складанні белка. |
| 3’ UTR |
Рэгулююць трансляцыю mRNA і яго стабільнасць. |
Прыродныя UTR выsoвыячых генаў preferredStyle даюць для IVT mRNA, такіх як α-глабін і β-глабін. |
| 3’ polyA хвост |
Рэгулююць экспрэсію белка і захаваюць кап структуру ад дэгрadaцыі. |
Трэба дасягнута правільнай даўжыні (100-150 бп); кодыраванне polyA хвоста на плазмідзе транскрыпцыйнага шаблона забяспечвае больш вызначаную даўжыню polyA хвоста. |
Нашы харастыкі
Колькі сурцаў высоўванай прыроднай і змяненай бібліятэкі UTR; дасконалая стратэгія змянення UTR;
- Каманда аптымізацыі сучасных CDS
Супрацоўнічаць з прафесійнай камандай алгарытмаў штучнага інтэлекту, каб завяршыць аптымізацыю кодонав.
- Раўнамернае раскладанне polyA-хвоста
Дадаваць polyA-последавательнасці па шаблонах DNA, каб больш дакладна кантруляваць даўжыню mRNA.
- Зваротныя kombінацыі аптымізацыі
Дасягнуць эфектыўнага выразу mRNA з нізкім імунагенным падзёрам.
Прыклад даследвання
Дызайн последавательнасці двайчынага рэпартара mRNA: mCherry-eGFP mRNA
Служба mRNA Yaohai Bio-Pharma непрыстанна ўдосконаляецца за рахунак дызайну і аптымізацыі тандэмнай последавательнасці двайчынага гена-рэпартара, якая дасягае сумеснага выразу двух генаў.
Выкарыстоўваючы стандартныя рэагенты для трансфекцыі, тандэмная последавательнасць mCherry-eGFP mRNA трансфекуецца ў клеткі 293T, і пасля 48 гадзін абнаружваюцца два флуорэсцэнтных сігналы mCherry (чырвоны) і пазмажанага зеленага флуорэсцэнтнага белка (eGFP) з адночасовым выразам, а стаксаваная карта падкрэслена жовтой.
Выраз mCherry-eGFP mRNA ў клетцы 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
