Yaohai Bio-Pharma рыхтуе circRNA на аснове сістэмы PIE (выраўноўванне экзонаў і інтронаў), якая абапіраецца на функцыю самазрошчвання інтронаў тыпу I для дасягнення цыклізацыі РНК. Структура PIE распрацавана з выкарыстаннем гена T4 td або гена-папярэдніка тРНК, і размяшчэнне наступнае:
Інтрон РНК і апорны фрагмент экзона падзелены на дзве часткі (5'-канцавая і 3'-канцавая), дзе 5'-канцавая паслядоўнасць пераносіцца ў хвост паслядоўнасці-мішэні, а 3'-канцавая паслядоўнасць устаўляецца ў пярэднюю частку мэтавая паслядоўнасць, а паслядоўнасць мэтавага гена ўстаўлена ў сярэдзіну.
Пры каталізе GTP структура PIE прыводзіць да цыклізацыі паслядоўнасцей, акрамя інтронаў. У спалучэнні з разумнай стратэгіяй павышэння хуткасці цыклізацыі Yaohai Bio-Pharma можа дасягнуць цыклізацыі паслядоўнасцей да 4 кб з хуткасцю цыклізацыі больш за 80%.
Малюнак 1. Цыркуляцыя circRNA in vitro на аснове сістэмы PIE
Падрабязнасці паслуг
| Працэс |
Дадатковая паслуга |
Падрабязнасці аб паслузе |
Тэрмін дастаўкі (працоўны дзень) |
| праектаванне і аптымізацыя паслядоўнасці circRNA |
Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасцей кадавання |
Выраўноўванне паслядоўнасці CDS
Аптымізацыя кодона CDS
|
1 |
| Дызайн і аптымізацыя некадуючых паслядоўнасцей |
Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасці інтронаў і экзонаў
Дызайн і аптымізацыя гамалагічнай паслядоўнасці рук
Праектаванне і аптымізацыя паслядоўнасці спейсераў
|
1-2 |
Агульныя стратэгіі распрацоўкі паслядоўнасці мРНК
| Кампаненты CircRNA |
Біялагічныя функцыі |
Стратэгіі аптымізацыі |
| Двухканцавыя паслядоўнасці інтронаў і экзонаў |
GTP-катализируемый інтрон самосплайсинг для цыклізацыі паслядоўнасцяў па-за інтрона. |
Распрацаваны ў адпаведнасці з генам T4 td або генам-папярэднікам тРНК рыбінага тлушчу. |
| Кадаванне |
IRES |
Унутраны сайт распазнання рыбасомы, які рэгулюе трансляцыю circRNA. |
Скрынінг паслядоўнасцей унутранага сайта ўваходу ў рыбасомы (IRES) з розных вірусных крыніц, напрыклад, крыніц EMCV, CVB3. |
| CDS |
Участкі, якія кадуюць вавёркі, паслядоўнасці, якія кадуюць антыгены, антыцелы або іншыя функцыянальныя вавёркі. |
Аптымізацыя Codon павышае ўзровень трансляцыі; некаторыя неаптымальныя кодоны могуць гуляць пэўную ролю ў згортванні бялку. |
| Некадзіраванне |
Некадуючыя паслядоўнасці |
Нацэліцеся на мікраРНК або вавёркі для рэгуляцыі генаў або бялкоў. |
Нацэльванне на пэўныя сайты звязвання мікраРНК або бялкоў можа паўтараць паслядоўнасці сайта звязвання. |
нашы Асаблівасці
- Аптымізаваная сістэма цыклізацыі PIE Камбінацыя з разумнымі стратэгіямі аптымізацыі для дасягнення хуткасці цыклізацыі больш за 80%;
- Перадавая каманда па аптымізацыі CDS Супрацоўніцтва з прафесійнай камандай алгарытмаў штучнага інтэлекту для завяршэння аптымізацыі кодонаў рэгіёнаў CDS;
- Спелая і ідэальная працэсная circRNA можа быць дасягнута з высокай эфектыўнасцю цыклізацыі, высокай стабільнасцю і высокай эфектыўнасцю трансляцыі.
Кейс
Кампанія Yaohai Bio-Pharma выпусціла кантрольны прадукт, узмоцнены зялёным флуарэсцэнтным бялком (eGFP) circRNA, які заснаваны на сістэме PIE для дасягнення цыклізацыі РНК.
Выкарыстоўваючы звычайны рэагент для трансфекцыі, eGFP circRNA трансфікуецца ў клеткі 293T, і eGFP (зялёны) флуоресцентный сігнал можа быць выяўлены праз 24 гадзіны, які будзе ўзмацняцца праз 48 гадзін. Флуарэсцэнтны сігнал усё яшчэ можа быць выяўлены на 7-ы дзень і на 14-ы дзень пасля трансфекцыя.
In vitro праверка экспрэсіі eGFP circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
