Значэнне атрымання адпаведнага штама
Атрыманне адпаведных хост-кампаный неабходна для розвіцця CMC біягалактыкаў, што вызначае якасць і канстыянтнасць працэсу вытвору. Прамая мэта атрымання хост-кампаный — забезпечыць кандыдата на ролю галоўнага банку клетак (PCB), з высоцкім узроўнем экспрэсіі і высокай стабільнасцю, абодва ў тэрмінах паслядоўнасці і захоўвання. Атрыманне адпаведных хост-кампаный неабходна па двух галоўных прычынах:
- Перш за ўсё, выбар мікробнага хоста з высоцкім узроўнем экспрэсіі. Існуе некалькі каммерчых штамаў, якія выкарыстоўваюцца для экспрэсіі розных тыпаў белкаў, уключаючы токсічныя белкі, развязныя белкі ці эукарыятныя белкі.
- У другую чаргу, неабходна экранаваць хост з генетічнай стаяснасцю. Тэсты на генетычную стаяснасць - гэта ключавая кропка ўвесь цяг produkcijnago жыцця. Прапануецца, каб выsoкае генетычнае стаяснасць расцэнявалася як іншы ключавы характарыстык для падходзялага штама.
Ключавыя словы: выбар мікробных штамоў, экранаванне мікробных штамоў, високачастатны скрeeniнг бактэрый ці дзеянцы, экранаванне штамоў з высокай выдачай, экранаванне штамоў з высокай стаяснасцю, тэсты на генетычную стаяснасць штамоў Прымененне: лікі для чалавека, лікі для жывёл, вакцыны, сінтэтычная біялогія, рекамбінатныя вялікія молекулы біялагічных працэдур, біялагічныя рэагенты
Паслугі па экранаванню штамоў Yaohai Bio-Pharma
Выкарыстоўваючы досвед балее 10 гадоў ў сферы CDMO для мікрабіялагічных працэсав, мы падтрымліваем разьвіццу і вытворчасць розных вялікіх молекулаў, уключна рекамбінантных суб'юнктных вакцын, вірусных чатыркоў (VLP), гармоны (інсулін, GLP-1, гармон росту), цытайны (Інтэрлейкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), факторы росту (EGF, FGF, NGF), нанатэлі (однадаменныя антыгены/sdAbs), энзымы і іншыя.
Мы набрали значны дасягнення ў выбары розных тыпаў плазмідных вектараў і мікрабіялагічных хастаў, уключна бактэрый Escherichia coli (E. coli), і дріжаўнымі Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Мы можам знайсці найлепшую сістэму экспresasii для вашых унікальных біялагічных працэсаў.
Мы збіралі розныя мікрабіялагічныя хасты з чыстыма крыніцамі і стандартным CoA, уключна E.coli экспresasii і дзеянцы экспresasii.
Дэталі сервісу
|
Услугі
|
Дэталі сервісу
|
Мінімальная лінія часу\/Дзень
|
Вынікі
|
|
Канструюванне штама (E. coli)
|
Трансформацыя плазміда (ў многіх хостах)
|
5
|
СВА комерчыных хостаў Адчыненне звіту пра канструюванне штама
|
|
Пацверджэнне PCR
|
|
Чысцэнне штама
|
|
Захаванне штама
|
|
Канструюванне штама (драсці)
|
Падготовка компетэнтных клетак драсці
|
10
|
|
Лінеарызацыя плазміда
|
|
Электрапераўтварэнне
|
|
Скранінг устойчывасці\/дыфіцыту ахавання
|
|
Чысцэнне штама
|
|
Захаванне штама
|
|
Скранінг падходзяшага хоста
|
Выдзеленне ДНК плазміда ці генама
|
15-20
|
Процэс скранінгу хоста COA інжынерных штамаў
|
|
ПЦР-верыфікацыя, рэстрыкцыйнае ферментаванне
|
|
Секвеніраванне таргетаванага гена
|
|
Скранінг хостаў з высоцкай экспрэсіяй
|
|
Скранінг хостаў з генэтічнай стабільнасцю
|
|
Захаванне штама
|
Прыклад даследвання
Падходзящы хост павялічвае ўзровень выразкі белкаў на 2.5 раза.
Нам заўtraцена розрыць високапрадуктыўны E. coli штам. І мы спрабавалі тры тыпы камерцыяльных E. coli хостаў, у залежнасці ад атрыбутаў цэлевага белка. Паказана, што штам S1-1 і S1-2 (Рыс A: Лан 1,2) павялічылі ўзровень белка на 3.5 раза ў порownanny з пачатковым штамам кліента (Рыс A: Лан 3).
Кропка, штам S1-1 паказаў високую генетычную стаяласць (Рыс B), і яго было распаўнёна як кандыдата для стварэння першачыннага банку клетак (PCB).
Асобыстасці нашых услуг
Даказанае masternasць з рознымі мікробнымі хостамі, напрыклад, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S. cerevisiae і H. polymorpha .
Мы маём дасвед у E. coli перыплазматычнай секцыяй, салюбным выразам і выразам уключных тэлаў, а таксама ўнутранішняцеллівым выразам ці секцыяй дзеянні ў дрязгах. Мы не дадаем антыбіятыкаў ці дадаем іх пад рэгуляваннем законаў.
Мы стварылі высокапрацавы платфарм для скрынінга штамаў з вялікай выдачай і стабільнасцю з больш за сто кандыдатскіх штамоў.
Зabezпachenaje, што працэс інжынерынга і скрынінга штамоў з’яўляецца вызначальным, пад выканаць Good Data and Record Management.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
