Месца N-глікозыдаціі займаюць фізіалагічную ўласцівасць глікопротеінаў і галоўным чынам вырашэнне N-глікан. Усlugа аналізу месца N-глікозыдаціі Yaohai Bio-Pharma працягваецца праз пераварэнне, выдатку, багатшанне і аналіз з дапамогай Жидкаснай Хроматографіі-Электраспрыскной Іонізацыі Мас-Спектраметры (LC-ESI-MS/MS).
Мы ўдзельнічалі ў характарыстыцы структуры белкаў розных вялікіх молекулаў, уключаючы Рекамбінатныя Пададзелы Вакцын, Нанатэлі/ВНН/ Единственныя Дамены Антагенаў (sdAbs), Антагенныя Фрагменты, Гормоны/Пептыды, Цытайкіны, Факторы Росту (GF), Энзымы, Коллагены і іншыя.
Рэгуляваныя Трабаванні да Mесц N-глікозыдаціі
Згодаю з дырэктывай ICH Q6B, «для гликапротеінаў визначаецца цукраная частка (нейтральныя цукаркі, амінацыйныя цукаркі і сіалавыя кісліны). Падрабязна аналізуецца структура цукарных ланцагоў, патэрн олигасахарыдаў (антэнны прафілю), а таксама месцы глікозыкацыі поліпептыднага ланцага насколькі можна больш детальна».
Аналітычны метад
| Аналіз |
Метады |
| Занятаść месц N-глікозылювання |
LC-MS пасля деглікозылацыі і пептыднай дыгестцыі |
Процэдуры
1. Пептыдная дыгестцыя белкаў для вытворэння малых пептыдных фрагментаў.
2. Адпушчэнне N-гліканоў з выкарыстаннем эндаглікозідазы H ці PNGase F. Эндаглікозідаза H разрывае звязку паміж двума рэзідамі GlcNAc у ядре N-звязаных гліканоў, тым часам PNGase F — глыкоамідаза, якая разрывае звязку паміж GlcNAc і Asn, вызвалюючы ўся цукарны ланцуг і пераўтвараючы Asn у Asp з павелічэннем масы на 1-Da.
3. Энрычэнне N-глікопептыдамі праз HILIC (Гідрофільная інтэракцыя Liquid Chromatography)
4. Аналіз занятасті месц N-звязанай глікозыкацыі з выкарыстаннем LC-ESI-MS/MS.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
