Дэзамідаванне бакавых ланцугоў глютамінам і аспарагінам - звычайная мадыфікацыя з пункту гледжання ўплыву на ўласцівасці бялковых біяфармацэўтычных прэпаратаў. Дэзамідаванне можа адбывацца ў рэштках глютаміну, але звычайна са значна меншай хуткасцю. На хуткасць дэзамідавання ўплываюць тэмпература, pH, мясцовая структура бялку і фланкуючыя амінацыльныя рэшткі.
Yaohai BioPharma прапануе паслугі тэсціравання дэзамідавання амінакіслот, якія дазваляюць выявіць дэзамідаванне амінакіслот метадам вадкаснай храматаграфіі-мас-спектраметрыі (LC-MS).
Мы ўдзельнічалі ў структурнай характарыстыкі бялку розных вялікіх малекул, у тым ліку рэкамбінантных субадзінак вакцын, нанацелаў/VHH/аднадоменных антыцелаў (sdAbs), фрагментаў антыцелаў, гармонаў/пептыдаў, цітакінаў, фактараў росту (CF), ферментаў, калагенаў, г.д.
Нарматыўныя патрабаванні да дэзамідавання амінакіслот
Згодна з рэкамендацыямі ICH Q6B, дэзамідаваныя формы можна выявіць і ахарактарызаваць з дапамогай храматаграфічных, электрафарэтычных і/або іншых адпаведных аналітычных метадаў.
Аналітычныя метады
| Аналіз |
Методыка |
| Дэзамідаванне |
Вадкасная храматаграфія-мас-спектраметрыя (LC-MS) |
Працэдуры
напрыклад, дэзамідаванне аспарагінавай кіслаты
1. Ферментатыўнае страваванне
2. ВХ-МС ва ўмовах высокаэфектыўнай вадкаснай храматаграфіі (ВЭЖХ).
3. аналіз дадзеных
Дэзамідаванне аспарагіну адбываецца праз сукцынімідны прамежкавы прадукт (Suc), які схільны рацемізацыі і гідролізу, утвараючы чатыры ізамера Asp, у тым ліку L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp і D-IsoAsp.
Тэарэтычна, дэзамідаванне Gln можа стварыць чатыры адпаведныя ізамеры Glu праз працэс, аналагічны дэзамідаванню Asn.
Мас-спектраметрыя з высокім дазволам лёгка вызначае розніцу ў масе ў 1 Да паміж пептыдамі, якія змяшчаюць Asn/Gln, і іх адпаведнымі дэзамідаванымі аналагамі Asp/Glu.
BE
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
MK
UR
BN
