Вызначэнне малекулярнай масы метадам ВХ-МС
Непашкоджаная малекулярная маса заўсёды прызнавалася важнай характарыстыкай біяпрэпаратаў. Аналіз непашкоджанай малекулярнай масы выкарыстоўваецца для дэманстрацыі бялковых/пептыдных прадуктаў і праверкі біяпрэпаратаў. Вымярэнне малекулярнай масы з'яўляецца патрабаваннем нарматыўных інструкцый.
Yaohai Bio-Pharma прапануе аналіз малекулярнай масы цэласнасці ў натыўных, адноўленых, N-дэгліказіляваных умовах. Мы выкарыстоўваем вадкасную храматаграфію-мас-спектраметрыю (LC-MS) для вызначэння малекулярнай масы непашкоджанага стану.
Нарматыўныя патрабаванні да малекулярнай масы
У ICH Q6 рэкамендуецца, што «малекулярная маса (ці памер) вызначаецца з дапамогай эксклюзійнай храматаграфіі, электрафарэзу ў поліакрыламідным гелі з SDS (у аднаўленчых і неаднаўленчых умовах), мас-спектраметрыі (МС) і іншых адпаведных метадаў».
Аналітычныя метады
| Аналіз |
Методыка |
| малекулярны вага |
LC-MS / вадкасная храматаграфія / электрараспыляльная мас-спектраметрыя (LC/ES-MS) натыўных, адноўленых, N-дэгліказіляваных бялкоў або субадзінак |
Аналітычныя працэдуры
Непашкоджаная малекулярная маса:
- Выкананне ВХ-МС на натыўным узоры ў атрыманым выглядзе.
- ВХ-МС аналіз даных.
Зніжаны малекулярны вага:
- Апрацоўка ўзору бялку прыдатным аднаўляльнікам;
- Выкананне ВХ-МС на адноўленым бялку;
- ВХ-МС аналіз даных.
N-дегликозилированный малекулярная маса:
- Выдаленне N-гликанов з дапамогай падыходнага фермента;
- Выкананне ВХ-МС на N-дегликозилированном бялку;
- ВХ-МС аналіз даных.
Паменшаная і N-дэгліказіляваная малекулярная маса:
- Апрацоўка ўзору бялку прыдатным аднаўляльнікам;
- Выдаленне N-гликанов з дапамогай падыходнага фермента;
- Выкананне ВХ -МС на адноўленым і N-дегликозилированном бялку;
- ВХ-МС аналіз даных.
Малекулярная маса субадзінак бялку:
- Расшчапленне субадзінак
- Выкананне ВХ-МС на субадзінак бялку
- Аналіз даных LC-MS
BE
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
MK
UR
BN
