Тэхналогіі, якія ўдзельнічаюць у сінтэзе мРНК

Мадальнасць

Тэхналогіі, якія ўдзельнічаюць у сінтэзе мРНК

Сінтэз мРНК in vitro

Асноўнымі кампанентамі мРНК з'яўляюцца 5'-кеп, 5'-UTR, адкрытая рамка счытвання (ORF), 5'-UTR і 5'-полі А хвост, якія важныя для падтрымання функцыі мРНК. Даследчыкі выкарыстоўвалі розныя метады для ідэнтыфікацыі і аптымізацыі паслядоўнасцей і структур мРНК.

Сінтэз мРНК праводзіцца на аснове транскрыптаў in vitro (IVT) з выкарыстаннем лінейных ДНК-матрыц, РНК-полимераз (Т3, Т7 або SP6), немадыфікаваных або мадыфікаваных нуклеатыдаў, ферментаў і адпаведных рэагентаў.

Мадыфікацыя шапкі 5'

Паслядоўнасці спелай мРНК з эўкарыяцытаў дэманструюць 7-метылгуаназін (m7G) кэп на 5'-канцы, што паляпшае стабільнасць мРНК і эфектыўнасць трансляцыі. Ёсць два агульных метаду захопу мРНК in vitro. Па-першае, мРНК можна каппаваць разам з транскрыптам in vitro, дадаўшы кэп-аналаг структуры m7GpppG (напрыклад, CleanCap) у сістэму IVT. Гэты метад сумеснай транскрыпцыі забяспечвае натуральную структуру капсулы даўжынёй 5 футаў і павялічвае эфектыўнасць капіравання амаль да 90-99%. Па-другое, адлюстраванне мРНК таксама можа быць выканана шляхам адлюстравання ферментных рэакцый пасля рэакцыі транскрыпцыі in vitro.

Мадыфікацыя PolyA

Poly(A) хвост таксама падаўжае перыяд паўраспаду мРНК in vivo і паляпшае эфектыўнасць трансляцыі мРНК. Даўжыня амплифицированного полі(А) хваста павінна складаць 100-300 нуклеатыдаў. Акрамя таго, мадыфікаваны адэназін павялічвае ўстойлівасць хваста полі А супраць дэградацыі клеткавай РНКазы. Хвост Poly A можа быць устаўлены з дапамогай транскрыпцыі in vitro з выкарыстаннем шаблону ДНК, які кадуе poly A, што прыводзіць да пэўнай даўжыні паслядоўнасці Poly A. Рэкамбінантная полі-А-палімераза таксама можа быць выкарыстана шляхам ферментатыўнага полиаденилирования пасля транскрыпцыі мРНК.

Мадыфікацыя нуклеатыдаў

Мадыфікаваныя нуклеазіды могуць інгібіраваць распазнаванне і/або актывацыю рэцэптараў распазнавання вобразаў (PRR) і павышаць эфектыўнасць мРНК-вакцын двума цалкам рознымі спосабамі. Даданне некаторых хімічна мадыфікаваных нуклеазідаў, уключаючы псеўдаурыдын (ψ), 1-метылпсеўдаурыдын (m1ψ), тиуридин (s4U) і 5-метилцитозин (m5C), можа прадухіліць актывацыю TLR7/8 і іншых прыроджаных імунных рэцэптараў, якія значна зніжаюць імунагеннасць мРНК.

Сістэма дастаўкі мРНК

Каб падтрымліваць функцыю мРНК, ёй неабходна пранікаць у цытаплазму гаспадара і экспрэсаваць спецыфічныя антыгены. Адна з самых складаных задач, з якімі сутыкаюцца мРНК-вакцыны і тэрапеўтычныя прэпараты, заключаецца ў дастаўцы мРНК у клеткі-мішэні з дастаткова высокім узроўнем трансляцыі, бо для гэтага патрэбны вельмі спецыфічныя і эфектыўныя сістэмы дастаўкі мРНК. Было распрацавана і выкарыстана некалькі вектараў дастаўкі мРНК, уключаючы дендрытныя клеткі (ДК), пратамін, катыённыя палімеры і катыённыя ліпасомы.

Комплексы катыённых ліпідаў з мРНК і іншымі прэпаратамі могуць разам утвараць наначасціцы памерам 80-200 нм, якія называюцца ліпіднымі наначасціцамі (ЛНП). З'яўляючыся адной з самых перадавых сістэм дастаўкі мРНК, LNP уключае іянізавальныя катыённыя ліпіды, натуральныя фасфаліпіды, халестэрын і поліэтыленгліколь (ПЭГ). Некалькі РНК-вакцын і метадаў лячэння (міРНК і мРНК), ухваленых Упраўленнем па кантролі за прадуктамі і лекамі ЗША, заснаваны на сістэмах дастаўкі LNP.

Yaohai Bio-Pharma прапануе ўніверсальнае рашэнне для РНК

Каталог прадуктаў РНК

Каталог прадуктаў мРНК
Каталог saRNA Products
Каталог прадуктаў circRNA

Сінтэз РНК на заказ

Карыстальніцкі сінтэз мРНК
Карыстацкі сінтэз saRNA
Карыстальніцкі сінтэз circRNA

Паслугі мРНК CDMO

Развіццё працэсу
GMP Вытворчасць
Асептычнае запаўненне і аздабленне
Аналіз і тэставанне

Індывідуальныя вынікі

Клас	Чаканыя вынікі	спецыфікацыя	прыкладанняў
не-GMP	Лекавае рэчыва, мРНК	0.1~10 мг (мРНК)	Даклінічныя даследаванні, такія як трансфекцыя клетак, распрацоўка аналітычных метадаў, даследаванні папярэдняй стабільнасці, распрацоўка рэцэптуры
	Прэпарат, LNP-мРНК
GMP, стэрыльнасць	Лекавае рэчыва, мРНК	10 мг~70 г	Даследаванне новага лекавага сродку (IND), дазвол на клінічнае выпрабаванне (CTA), пастаўка для клінічных выпрабаванняў, заяўка на ліцэнзію на біялагічны прэпарат (BLA), камерцыйная пастаўка
	Прэпарат, LNP-мРНК	5000 флаконаў або папярэдне запоўненых шпрыцаў/картрыджаў

усе раздзелы

Тэхналогіі, якія ўдзельнічаюць у сінтэзе мРНК Беларусь

Мадальнасць