Значэнне скрынінга штамаў
Скрынінг прыдатных гаспадароў неабходны для распрацоўкі біяпрэпаратаў CMC, які вызначае якасць і кансістэнцыю прадукту і вытворчага працэсу. Прамая мэта скрынінга гаспадара - забяспечыць кандыдат у першасны банк клетак (PCB) з высокім узроўнем экспрэсіі і высокай стабільнасцю як з пункту гледжання стабільнасці пассажу, так і стабільнасці пры захоўванні. Скрынінг падыходнага гаспадара неабходны па дзвюх асноўных прычынах:
- Па-першае, выбраць мікробнага гаспадара з высокім узроўнем экспрэсіі. Ёсць некалькі камерцыйна даступных штамаў, якія выкарыстоўваюцца для экспрэсіі розных тыпаў бялкоў, напрыклад, таксічных бялкоў, растваральных бялкоў або эукарыятычных бялкоў.
- Па-другое, для скрынінга гаспадара з генетычнай стабільнасцю. Выпрабаванне генетычнай стабільнасці з'яўляецца ключавым момантам на працягу ўсяго жыццёвага цыкла вытворчасці. Мяркуецца, што высокая генетычная стабільнасць прызнана яшчэ адной ключавой характарыстыкай падыходнага штаму.
Ключавыя словы: селекцыя мікробнага штаму, скрынінг мікробнага штаму, высокапрадукцыйны скрынінг бактэрый або дрожджаў, скрынінг высокапрадукцыйнага штаму, скрынінг высокастабільнага штаму, генетычна стабільны скрынінг штаму Ужыванне: чалавечая медыцына, медыцына для жывёл, вакцына, сінтэтычная біялогія, рэкамбінантная вялікая малекула біяпрэпараты, біялагічны рэактыў
Паслугі скрынінга штамаў Yaohai Bio-Pharma
Карыстаючыся больш чым 10-гадовым вопытам CDMO ў галіне мікробных біяпрэпаратаў, мы падтрымліваем распрацоўку і вытворчасць розных вялікіх малекул, у тым ліку рэкамбінантных субадзінак вакцын, вірусападобных часціц (VLP), гармонаў (інсулін, GLP-1, гармон росту), цітокіны ( Інтэрлейкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), фактары росту (EGF, FGF, NGF), нанацелы/аднадаменныя антыцелы (sdAbs), ферменты і г.д.
Мы назапасілі багаты вопыт выбару розных тыпаў плазмідных вектараў і мікробных гаспадароў, у тым ліку бактэрый Кішачная палачка (E. coli), і дрожджы Піхія пастуховая (P. pastoris), сахаромицес цэрэвізія (S. cerevisiae), гансенула паліморфная (H. polymorpha). Мы можам знайсці лепшую сістэму экспрэсіі для вашых унікальных біяпрэпаратаў.
Мы сабралі розныя мікробныя гаспадары з дакладнымі крыніцамі і стандартным CoA, у тым ліку E.coli экспрэсія і экспрэсія дрожджаў.
Падрабязнасці аб паслузе
Паслугі
|
Падрабязнасці аб паслузе
|
Мінімальны тэрмін/дзень
|
Чаканыя вынікі
|
Канструкцыя штаму (E. coli)
|
Трансфармацыя плазміды (мульты-хасты)
|
5
|
Сертыфікат сапраўднасці камерцыйных вузлоў Strain
|
ПЦР праверка
|
Ачыстка штаму
|
Захаванне штаму
|
Канструкцыя штаму (дрожджы)
|
Падрыхтоўка кампетэнтных дражджавых клетак
|
10
|
Лінеарызацыя плазміды
|
Электратрансфармацыя
|
Скрынінг рэзістэнтнасці/дэфіцыту харчавання
|
Ачыстка штаму
|
Захаванне штаму
|
Скрынінг падыходнага гаспадара
|
Вылучэнне ДНК плазміды або геному
|
15-20
|
Хост працэс скрынінга COA сканструяваных штамаў
|
ПЦР-верыфікацыя, пераварванне рестриктазами
|
Секвенирование гена-мішэні
|
Скрынінг хастоў з высокай экспрэсіяй
|
Скрынінг гаспадароў з генетычнай стабільнасцю
|
Захаванне штаму
|
Кейс
Прыдатны гаспадар павышае ўзровень экспрэсіі бялку ў 2.5 разы.
Нам даручана развіваць высокапрадукцыйныя E. палачкі працадзіць. І мы паспрабавалі тры віды рэкламы E. палачкі гаспадароў, на аснове характарыстык мэтавага бялку. Было паказана, што штам S1-1 і S1-2 (Малюнак A: Паласа 1,2) палепшыў узровень бялку ў 3.5 разы, чым першапачатковы штам кліента (Малюнак A: Паласа 3).
Акрамя таго, штам S1-1 паказаў высокую генетычную стабільнасць (мал. B), і ён быў прызнаны штамам-кандыдатам для першаснага банка клетак (PCB).
Асаблівасці нашых паслуг
Прадэманстраваны вопыт працы з рознымі мікробамі-хастамі, напрыклад, E. палачкі DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, штам PichiaPink1/2/3/4; S.cerevisiae і H. паліморфны.
У нас ёсць вопыт E. палачкі перыплазматычная сакрэцыя, экспрэсія растваральных цельцаў і ўключэнняў, а таксама ўнутрыклеткавая экспрэсія дрожджаў або экспрэсія сакрэцыі. Мы не дадаем антыбіётыкі або дадаем антыбіётыкі ў адпаведнасці з нарматыўнымі рэкамендацыямі.
Мы ствараем высокапрадукцыйную скрынінгавую платформу для адбору высокапрадукцыйных і стабільных штамаў з больш чым ста штамаў-кандыдатаў.
Забяспечваецца прасочванне працэсу дэфармацыі і скрынінга ў адпаведнасці з Правіламі добрага кіравання дадзенымі і запісамі.