DNA الدائري الصغير (mcDNA) هو ناقل DNA أصغر غير فيروسي مشتق من بنية تشبه DNA البلازميد الأم. يختلف DNA الدائري الصغير عن البلازميد التقليدي في أنه يحتوي على مُحفِّز وجين الاهتمام (GOI)، دون وجود نقطة التكرار (ORI) والعلامة الانتقائية (selMark). يتم إنتاج DNA الدائري الصغير في البكتيريا من خلال إعادة التركيب الحيوي لإزالة التسلسلات الإضافية (يُطلق عليها البلازميد الصغير) من DNA البلازميد. بسبب سلامته، اكتسب DNA الدائري الصغير شعبية كناقل غير فيروسي لعلاج الجينات، اللقاحات DNA وما إلى ذلك.

الشكل 1. بنية DNA البلازميد (pDNA) وDNA الدائري الصغير (mcDNA)
أنظمة إعادة التركيب الحيوية لـ DNA الدائري الصغير
هناك أربع أنظمة رئيسية لإعادة التركيب الحيوي لـ DNA الدائري الصغير تم دراستها، بما في ذلك إنترغراز الفيروس λ، إنزيم Cre إعادة التركيب من الفيروس P1، إنزيم ParA resolvase، وPhiC31 integra se/I-SceI.
استراتيجية
|
إنترغراز الفيروس λ
|
إنزيم Cre إعادة التركيب من الفيروس P1
|
إنزيم ParA resolvase
|
PhiC31 integra se/I-SceI
|
آلية
|
إنزيم التايروسين إعادة التركيب، الذي يعمل من خلال البروتينات FIS و IHF لتحفيز إعادة تركيب مواقع الهجين att
|
إنزيم التايروسين إعادة التركيب المحدد للموقع، والذي يقوم بإعادة التركيب ثنائي الاتجاه عند ربطه بمواقع loxP
|
إنزيم السيرين إعادة التركيب، الذي يؤدي إلى إعادة التركيب غير القابل للعكس والواحد الاتجاه بين موقعي MRS المتطابقين
|
إنزيم السيرين إعادة التركيب، الذي يحفز إعادة التركيب الأحادي الاتجاه بين مواقع الربط attP/attB، بينما يقوم إنزيم I-SceIendonuclease بقطع الشوائب المتعلقة بالمنتج والبلازميد الأبوي غير المتداخل
|
سمات
|
تعتمد على تعبير عوامل المضيف FIS و IHF؛ سمية داخلية؛ وجود بقايا البلازميد الأبوي وبلازميد صغير
|
وجود بقايا البلازميد الأبوي وبلازميد صغير
|
إنتاجية عالية؛ وجود بقايا البلازميد الأبوي وبلازميد صغير
|
تدهور البلازميد الأبوي المرتبط بتقليل الإنتاجية
|
Yaohai Bio-Pharma يقدم حل CDMO الشامل لـ DNA الدائري الصغير
المصدر:
[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. DNA دائري صغير: هل هو المستقبل للحاقن القائمة على الحمض النووي؟ Trends Biotechnol. 2020 أكتوبر؛38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.