تم استخدام mRNA بشكل واسع في دراسة وظائف الجينات أو البروتينات. كما هو شائع في تطوير البيولوجيات الوقائية والعلاجية. باعتباره استراتيجية شائعة لتكوين جزيئات RNA، يمكّننا التحويل الرباعي (IVT) من الحصول على نسخ مخصصة بكفاءة.
قامت Yaohai Bio-Pharma بتطوير مجموعة من تقنيات تركيب mRNA لتوفير RNA عالي الجودة، مثل تصميم وتحسين التسلسل، IVT، التنقية، التجفيف بالتجميد وتحويط الجسيمات النانوية الشحمية (LNP). يتم إصدار جميع المنتجات تحت معايير صارمة للتحكم في الجودة (QC).
مع اندلاع جائحة كوفيد-19 في عام 2020، تقدمت تقنية mRNA بخطوات كبيرة، وحصلت الأبحاث والتطبيقات المتعلقة بها على تنمية غير مسبوقة، بما في ذلك لقاحات وقائية ضد الأمراض المعدية، ولقاحات علاجية وأدوية لأمراض السرطان، وعلاج الأورام، وعلاج استبدال البروتين، والطب التجديدي، وعلاج الخلايا والجينات (CGT).
لقاح mRNA | علاجات mRNA |
|
العملية | خدمات إضافية متاحة | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) | المنجز |
تصميم وتحسين تسلسل mRNA | تصميم وتحسين التسلسلات المشفرة | تصميم تسلسل CDS وتحسين الكودون | 1-3 | ملف التسلسل |
تصميم وتحسين التسلسلات غير المشفرة | تصميم وتحسين تسلسلات UTR، polyA | |||
إعداد قالب النسخ الوراثي للبلازميد | إعداد بلازميد مُعاد التركيب | تركيب الجين | 7-10 | |
تكثيف واستخراج البلازميد | 4 | |||
تسيير وتنقية البلازميد | ||||
نسخ mRNA في المختبر | إغلاق التنسخي (الطريقة ذات الخطوة الواحدة) | النسخ الوراثي في المختبر (IVT) / نظير الكاب | 1-2 | غير متوفر |
تعديلات النوكليوتيدات (تعديلات UTP/CTP) | ||||
إزالة القالب ال DNA (إنزيم DNase I) | ||||
تغطية إنزيمية (عملية من خطوتين) | IVT | 2-3 | ||
تعديلات النوكليوتيدات (تعديلات UTP/CTP) | ||||
إزالة القالب ال DNA (إنزيم DNase I) | ||||
تنقية mRNA (ترسب كلوريد الليثيوم/كرات مغناطيسية) | ||||
تغطية إنزيمية | ||||
تنقية mRNA | مخطط تنقية تقليدي | تبلور كلوريد الليثيوم | 1 | مادة دوائية mRNA |
تصفيح الحبيبات المغناطيسية | ||||
مخطط تنقية عمود الكروماتوجرافي | مزيج من عدة طرق كروماتوجرافية | 1-2 | ||
تبديل المحلول المنجّز | الترشيح الفائق | 1 | ||
تجفيف mRNA | التجميد بالتجفيف | التجميد المسبق | 2-3 | مسحوق mRNA مجفف بالتجميد |
التجفيف الأولي (التحلل) | ||||
التجفيف الثانوي (الانفصال) | ||||
تغليف mRNA | التغليف بجزيئات LNP | التغليف بجزيئات LNP | 2-3 | منتج دوائي mRNA-LNP |
التركيز وتبديل المحلول العازل | ||||
تحليل جودة mRNA | مادة دوائية mRNA / مسحوق مجفف بالتجميد | التركيز، النقاء | 1 | تقرير الاختبار |
السلامة، كفاءة التغطية، توزيع ذيل polyA | 2-5 | |||
منتج دوائي mRNA-LNP | كفاءة التغليف | 1 | ||
حجم الجسيمات وتوزيعها | ||||
الشحنة السطحية | ||||
التحقق من تعبرة mRNA | تقييم خلايا 293T | زراعة الخلايا | 4 | |
النقل المؤقت للخلايا | ||||
مراقبة إشارة الفلورسنت | 1-3 | |||
بلوت غرباني (WB) / اختبار التفاعل المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) |
غطاء 5' |
▪ غير مغطى ▪ Cap0، مغطى بالتوازي ▪ Cap1، مغطى بالتوازي ▪ Cap1، تغطية إنزيمية |
5' UTR/3' UTR |
▪ تسلسل UTR طبيعي ▪ تسلسل UTR مُطَوَّر/مُتَحَوِّر |
ذيل PolyA 3' |
▪ ذيل 100A ~120A (مقترح) ▪ ذيل polyA مقسم ▪ أذناب مخصصة أخرى |
النيوكليوسيدات المعدلة |
▪ قواعد غير معدلة ▪ يوسودين الزائف (Ψ) ▪ N1-ميثيلبيودوريدين (N1Ψ) ▪ 5-ميثيلسيتوسين (m5C) ▪ 5-ميثيليوريدين (m5U) ▪ 5-ميثوكسييوريدين (5moU) ▪ 2-تيويوريدين (s2U) ▪ 2′-O-ميثيل-U ▪ تعديلات أخرى |
تدفق خدمة متكاملة
تقديم سلسلة من الخدمات من تصميم التسلسل في المقدمة إلى إعداد mRNA، والتحكم في الجودة وتأكيد التعبير في الخلفية.
تصميم تسلسل على مستوى عالمي متقدم وتحسينه
تصميم وتحسين تسلسل mRNA المهني يساهم في تعزيز التعبير الفعال لـ mRNA.
تعديلات نووية متنوعة
زيادة فعالة في التعبير عن mRNA وتقليل الاستجابات المناعية السلبية الناتجة عن mRNA.
منصة تنقية ناضجة
بفضل الجمع بين طريقة تنقية تقليدية ومصممة ذاتيًا، يتم الحصول على عينات mRNA بدرجة نقاء عالية.
منصة ضبط جودة كاملة
توسيع خيارات ضبط الجودة لتلبية متطلبات الاختبارات الروتينية مثل التركيز، درجة النقاء A260/280، والسلامة، بالإضافة إلى متطلبات ضبط الجودة العالية مثل كفاءة التغطية وتوزيع polyA.
توصيل سريع
يمكن تسليم mRNA المخصص خلال 7 أيام فقط، باستثناء تحليل التسلسل الخارجي.