أهمية تطوير عملية المنبع
تعد عملية المنبع (USP)، والمعروفة أيضًا بعملية التخمير، إحدى المراحل الأولية للمعالجة الحيوية الأولية. تعد عملية التخمير الميكروبي أمرًا بالغ الأهمية لزراعة الخلايا عالية الكثافة والتعبير الجيني الخارجي، مما يؤثر بشكل مباشر على المحصول البيولوجي والتكلفة.
في المراحل الأولى من تطوير المنتجات البيولوجية (ما قبل السريرية أو المرحلة 1/2)، ينصب التركيز على تطوير عمليات خالية من الحيوانات وقابلة للتطوير وذات إنتاجية متوسطة وتلبية جميع معايير جودة المنتج.
بينما في المراحل المتأخرة (المرحلة 3 أو التجارية)، سنركز على الإنتاجية والمتانة وقابلية التوسع وإمكانية التكرار، مما يؤدي إلى إنشاء عملية فعالة من حيث التكلفة. الأنشطة التي تعالج هذه القضايا هي توصيف العملية ودراسات التحقق من صحة العملية. وفي الوقت نفسه، يتم عادةً تطبيق أدوات الجودة حسب التصميم (QbD) وتصميم التجارب (DoE).
الكلمات المفتاحية: تطوير العملية، التحسين، والتحقق من الصحة، عملية التخمير، تخمير الخلايا الميكروبية، التخمير البكتيري، تخمير الخميرة، التخمير عالي الكثافة، التخمير الهندسي
التطبيق: صناعة الأدوية الحيوية، الطب البشري، طب الحيوان، اللقاحات، البيولوجيا الجزيئية الكبيرة المؤتلفة، البيولوجيا المؤتلفة، الكاشف البيولوجي
حلول USP لشركة Yaohai Bio-Pharma
بالاستفادة من أكثر من 10 سنوات من تجارب التخمير الميكروبي، تتمتع شركة Yaohai Bio-Pharma بالخبرة اللازمة للمساعدة في حل تحديات عملية التخمير. يمكننا إنشاء استراتيجيات تخمير عالية الكثافة بسرعة الإشريكية القولونية (E. coli) الإفراز المحيطي، والتعبير الجسمي القابل للذوبان أو المتضمن داخل الخلايا، والتعبير خارج الخلية أو داخل الخلايا.
تشمل خدمات تطوير التخمير العامة المتوفرة لدينا ما يلي:
- تم تنفيذ تصميم عملية التخمير على نطاق صغير يبلغ 7 لتر في وضع التغذية الدفعية
- التحقق من صحة العملية على ثلاث دفعات في أجهزة تخمير سعة 7 لتر
- يصل حجم العملية المتوسطة إلى 30 لترًا/70 لترًا
يمكننا إجراء تحسين متعدد المعلمات بمرونة لتحقيق العائد أو النسبة المطلوبة، باستخدام عامل المرة الواحدة (OTAF) أو تصميم التجارب (DoE).
يتم سرد معلمات التخمير الرئيسية على النحو التالي:
تركيبات وسائط التخمير الخالية من الحيوانات
خالية من المضادات الحيوية أم لا، حجم اللقاح
درجة حرارة النمو، الرقم الهيدروجيني، مستوى الأكسجين المذاب (DO).
وضع التغذية (على سبيل المثال، دفعة التغذية)
تركيز المحفز (على سبيل المثال، IPTG، الميثانول)، نقطة الحث (الوزن الرطب للخلية/OD600)،
درجة حرارة الحث، وقت الحث
وما إلى ذلك.
تفاصيل الخدمة
| خدماتنا |
تدفق عملية |
| زراعة في قارورة رج (500 مل) |
تحضير الوسائط الخالية من الحيوانات ← زراعة البذور الميكروبية ← الزراعة في شاكر ← الحث ← الحصاد |
| زراعة في جهاز تخمير (7 لتر) |
إعداد الوسائط الخالية من الحيوانات ← زراعة البذور الميكروبية ← تخمير الخلايا عالي الكثافة في مفاعل حيوي سعة 7 لتر ← الحث ← الحصاد |
| مراقبة جودة البروتينات/الببتيدات |
المعالجة المسبقة التعبير القابل للذوبان داخل الخلايا: حصاد الخلايا الميكروبية وإعادة تعليقها ← التكسير بالموجات فوق الصوتية ← إزالة حطام الخلية ← المستخلص الخام تعبير الجسم المتضمن: حصاد الخلايا الميكروبية وإعادة تعليقها ← التكسير بالموجات فوق الصوتية ← تحضير الجسم المتضمن ← المستخلص الخام التعبير القابل للذوبان خارج الخلية: مجموعة طاف الثقافة ← التركيز والمخزن المؤقت التبادل ← تحليل جودة المستخلص الخام مستخلص الخام كعينة ← تحليل البروتين المستهدف بواسطة SDS PAGE أو النشاف الغربي (WB) |
| مراقبة جودة البلازميدات |
المعالجة المسبقة وتحليل الجودة استخراج البلازميد → تحليل الحمض النووي عن طريق الفصل الكهربائي لهلام الاغاروز |
دراسة حالة
لقد تم تكليفنا من قبل عملائنا لزيادة إنتاج هرمون البولي ببتيد المستهدف من 8 جم/لتر إلى 10 جم/لتر.
استنادًا إلى التصميم العاملي الكامل وتصميم سطح الاستجابة في أدوات DoE، تمكنا بسرعة من التعرف على معلمات التخمير الرئيسية وتحسينها. وفي ظل عملية التخمير عالية الكثافة للخلايا المحسنة، ارتفع مستوى التعبير إلى 10 جم/لتر.
خبراتنا
- لقد عملنا على أنواع مختلفة من المضيفات الميكروبية، على سبيل المثال، القولونية DH5α، TOP10، Trans10، BL21؛ بيشيا باستوريس (P. باستوريس) SMD1168H، X-33، GS115، بيشيابينك سلالة 1/2/3/4؛ خميرة الخباز (S. cerevisiae) هانسنولا متعددة الأشكال (H. polymorpha).
- نحن من ذوي الخبرة مع E. كولاي إفراز محيطي، وتعبير الجسم القابل للذوبان والشمول، وكذلك تعبير الخميرة داخل الخلايا أو خارج الخلية. يصل إنتاج الجسم المتضمن إلى 10 جم/لتر، بينما يتراوح إنتاج البروتين القابل للذوبان من 0.5 إلى 15 جم/لتر.
- لقد شاركنا في تطوير وتصنيع العديد من الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، والجسيمات الشبيهة بالفيروسات (VLPs)، والهرمونات (الأنسولين، GLP-1، هرمون النمو)، السيتوكينات (Interleukin-2/IL-2، IL). -15، IL-21)، عوامل النمو (EGF، FGF، NGF)، الأجسام النانوية/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، الإنزيمات، إلخ.
- معدات
نظام التخمير 7 لتر * 16
محلل Cedex الحيوي، محلل العمليات الحيوية
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
