تحليل موقع N-Glycosylation ضروري لفهم وظائف الجليكوزيدات. تستخدم يواهي بيو-فارما كروماتوجرافيا السوائل - الطيف الكتلي (LC-MS) بعد القصzymatic للحصول على موقع N-Glycosylation.
قد شاركنا في تحديد بنية البروتينات لجزيئات كبيرة متنوعة، بما في ذلك لقاحات الوحدة المُعاد تشكيلها، النانوباديز / VHHs / الأجسام المضادة ذات المجال الواحد (sdAbs)، شظايا الأجسام المضادة، الهرمونات / الببتيدات، السيتوكينات، عوامل النمو (GF)، الإنزيمات، الكولاجينات، وما إلى ذلك.
المتطلبات التنظيمية لموقع N-Glycosylation
وفقًا لإرشادات ICH Q6B، "بالنسبة للبروتينات السكرية، يتم تحديد محتوى الكربوهيدرات (السكريات المحايدة، السكريات الأمينية، والأحماض السيلائية). بالإضافة إلى ذلك، يتم تحليل بنية سلاسل الكربوهيدرات، وأنماط الوليغوسكاريد (ملف الأنتيناري)، ومواقع التحلية السلسلة الببتيدية إلى أقصى حد ممكن.
الطريقة التحليلية
تحليل |
طرق |
موقع التعديل السكري N-Glycosylation |
كروماتوغرافيا السائل-طيف الكتلة (LC-MS) بعد التحلل الإنزيمي |
إجراءات
1. هضم البروتين باستخدام إنزيم tripsin أو إنزيم بروتيني آخر
2. فصل الجليكوببتيدات المجزأة
3. تأكيد موقع N-الجليكوزيلات بواسطة LC-MS
4. تحليل البيانات