تحليل البروفيل N-غليكاني ضروري لإنتاج الأدوية البيولوجية. توفر يوهاي بيوبيرما خدمة تحليل البروفيل N-غليكاني باستخدام الكروماتوغرافيا السائلة - الطيف الكتلي (LC-MS) للغلوكانات المحررة والمحددة. تتضمن الخطوات العامة لإعداد عينة N-غليكاني هضم البروتين السكري (GP)، إزالة الغليكوز، الت提ifyhrification، التسمية/التقنية، واستخراج الطور الصلب (SPE).
قد شاركنا في تحديد بنية البروتينات لجزيئات كبيرة متنوعة، بما في ذلك لقاحات الوحدة المُعاد تشكيلها، النانوباديز / VHHs / الأجسام المضادة ذات المجال الواحد (sdAbs)، شظايا الأجسام المضادة، الهرمونات / الببتيدات، السيتوكينات، عوامل النمو (GF)، الإنزيمات، الكولاجينات، وما إلى ذلك.
المتطلبات التنظيمية لتحليل البروفيل N-غليكاني
وفقًا لإرشادات ICH Q6B، "يتم تحديد محتوى الكربوهيدرات لبروتينات السكر (السكريات المحايدة، سكريات الأمينو، وأحماض السياليك). بالإضافة إلى ذلك، يتم تحليل بنية سلاسل الكربوهيدرات، نمط الزيتوكاريدات (ملف الأنتيناري)، ومواقع الجليكوزيلات للسلاسل الببتيدية قدر الإمكان."
الطريقة التحليلية
| تحليل |
طرق |
| تحليل ملف السكريات N-glycan |
تحليل الكرومتوغرافيا السائلة - الطيف الكتلي (LC-MS) للأجسام السكرية المحررة والمُعلمة |
إجراءات
1. إطلاق الغليكانيات إنزيمياً باستخدام ببتيد N-غليكوسيداز F (PNGase F)
2. إجراء الاشتقاق للغليكانيات المحررة بواسطة 2-أمينوبنزاميد (2-AB)
3. تنقية N-غليكانيات الحصاد على عمود TSK Amide - 80 إذا كانت كميات كبيرة من المنظفات، أو الأملاح غير القابلة للتطاير، أو المواد التي تحتوي على مجموعات أمين حرة موجودة
4. العلامات باستخدام 2-أمينوبنزاميد (2-AB) الفلورسنت
5. تحليل LC-MS للـ N-غليكانيات المعلمة
6. تحليل البيانات
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
