أهمية تطوير العملية النهائية (DSP).
يحتوي مرق التخمير بالكامل على البروتين المستهدف أو البلازميد، بالإضافة إلى الشوائب المرتبطة بالمنتج والعملية، على سبيل المثال، المجاميع، ركائز الخلايا الميكروبية، بروتينات الخلية المضيفة (HCP)، الحمض النووي للخلية المضيفة (HCD)، الذيفان الداخلي، والمضادات الحيوية.
لذلك، من المهم تصميم عملية تنقية DSP فعالة لإزالة بعض الشوائب وإنتاج مادة دوائية عالية النقاء وعالية الجودة. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يساعد تحسين عملية التنقية على زيادة استرداد المنتج، وخفض التكاليف، وتحسين قابلية التوسع في العملية وإمكانية تكرار نتائجها.
الكلمات المفتاحية: تطوير العملية، والتحسين، والتحقق من الصحة، عملية التنقية، اللوني، إزالة الشوائب، إزالة HCP، إزالة HCD، إزالة السموم الداخلية، تمسخ البروتين وإعادة طيه، تجميع VLP، الاقتران
التطبيق: صناعة الأدوية الحيوية، الطب البشري، طب الحيوان، اللقاحات، البيولوجيا الجزيئية الكبيرة المؤتلفة، البيولوجيا المؤتلفة، الكاشف البيولوجي
حلول DSP لشركة Yaohai Bio-Pharma
لدينا خبرة واسعة في عزل البروتينات المستهدفة أو البلازميدات من المصفوفات المعقدة من خلال تطوير وتحسين عملية التنقية النهائية. هناك أنواع مختلفة من عمليات الوحدة المناسبة لتنقية المواد البيولوجية، بما في ذلك الطرد المركزي، والترشيح، والتجانس، والتحلل القلوي، والترشيح الفائق، والترسيب، وتمسخ البروتين وإعادة طيه، والكروماتوغرافيا، وما إلى ذلك.
تشمل خدمات تطوير التنقية المتوفرة لدينا ما يلي:
- تطوير عملية التنقية بأكملها بدءًا من تجميع الخلية أو المادة الطافية وحتى العنصر النشط النهائي.
- تحسين عملية التنقية بناءً على الشوائب المرتبطة بالمنتج والعملية لزيادة جودة المنتج وسلامته، على سبيل المثال، HCP، HCD، والسموم الداخلية.
- تعريف وتحسين المعلمات الرئيسية في وحدة واحدة أو عدة عمليات، بما في ذلك تحلل الخلايا، وترشيح التدفق العرضي، وفحص الراتنج، واللوني، وتمسخ البروتين وإعادة طيه، وما إلى ذلك.
- تحسين العملية من حيث الجودة والإنتاج والاسترداد والتكلفة وقابلية التوسع.
- التحقق من صحة عملية تنقية المصب.
- تقييم نطاق المعلمات على أساس المخاطر وتصميم التجارب (DoE) في نمذجة العمليات.
تفاصيل الخدمة
تعتمد منصات تنقية البروتين أو البلازميد الموحدة على خطوات تنقية خام متعددة وأقل من 4 خطوات كروماتوغرافيا، بما في ذلك الالتقاط والتنقية المتوسطة والتلميع.
| تفاصيل الخدمة |
عمليات الوحدة |
المعلمات |
| تنقية الخام |
الطرد المركزي |
سرعة الدوران، الزمن |
| تجانس الضغط العالي |
إجمالي المحتوى الصلب والضغط والدورات |
| التحلل القلوي المستمر |
نسبة الخلايا المعلقة إلى محلول التحلل، وقت التحلل |
| ترشيح التدفق المماسي |
مادة الغشاء وحجم المسام، ومعدل تدفق التغذية، وضغط الغشاء (TMP)، وحجم الترشيح إلى نسبة مساحة الغشاء |
| ترسيب |
نوع الراسب وتركيزه، المادة المضافة، الرقم الهيدروجيني، درجة الحرارة، الوقت |
| تمسخ و Refolding |
إدراج إذابة بروتين الجسم |
تركيز المادة المذيبة (على سبيل المثال، اليوريا، جوانيدين حمض الهيدروكلوريك، المنظفات الأيونية القوية)، المنظفات (على سبيل المثال، كبريتات دوديسيل الصوديوم، SDS)، عوامل الاختزال (على سبيل المثال، ديثيوثريتول، DTT)، العوامل المخلبية (حمض إيثيلين ثنائي أمين رباعي أسيتيك، EDTA)، درجة الحرارة، الوقت |
| إعادة طي البروتين |
طرق إعادة التشكيل (التخفيف أو غسيل الكلى أو إعادة طي SEC)، تركيزات البروتين، المخازن المؤقتة، درجة الحموضة، درجة الحرارة، الوقت، عوامل الأكسدة والاختزال (على سبيل المثال، الجلوتاثيون، GSH/ الجلوتاثيون المؤكسد، GSSH، DTT/GSSH، السيستين/السيستين)، إضافات الجزيئات الصغيرة (إل-أرجينين، واليوريا، والجوانيدين/حمض الهيدروكلوريك، والمنظفات) |
| التقاط وتنقية متوسطة وتلميع |
AC (التحليل اللوني المتقارب) |
عدة أنواع من الراتنج/العمود اللوني (على سبيل المثال، AC، IEX، HIC، SEC، RPC، MMC)، طول العمود وقطره، تكوين المخزن المؤقت، حجم الحقن، تكوين الطور المتحرك (الامتزاز والامتزاز)، الرقم الهيدروجيني، معدل التدفق، الربط، شروط الغسل والشطف. |
| IEX (تحليل كروماتوغرافي لتبادل الأيونات أو الأيونات الموجبة) |
| HIC (كروماتوغرافيا التفاعل الكارهة للماء) |
| تحلية المياه و/أو كروماتوغرافيا استبعاد الحجم (SEC) |
| RPC (تحليل كروماتوغرافي الطور المعكوس) |
| يعنيMMC كروماتوغرافيا الوضع المختلط |
دراسة حالة
حالة 1
نحن مكلفون بتطوير وتحسين عملية التنقية النهائية لزيادة نقاء البروتين من 85% إلى 90% مع تقليل خطوات التحليل اللوني.
قدمت Yaohai عملية تنقية قوية وقابلة للتطوير مع 3 خطوات من التحليل اللوني للبروتين المستهدف، وهو حساسية بكتيرية. ووصلت نسبة النقاء النهائي إلى 95%.
حالة 2
تم تعيين Yaohai من قبل عميلنا لتحسين عملية إزالة السموم الداخلية للقاح الجسيمات الشبيهة بالفيروس (VLP).
أجرى فريقنا تحسين معلمات التحليل اللوني وأعد مادة دوائية بدرجة نقاء 98% وبقايا ذيفان داخلي بنسبة 12.8EU/مجم.
خبراتنا
- لقد شاركنا في تطوير وتصنيع العديد من الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، VLPs، والهرمونات (الأنسولين، GLP-1، هرمون النمو)، السيتوكينات (Interleukin-2/IL-2، IL-15، IL-21). ) ، عوامل النمو (EGF، FGF، NGF)، الأجسام النانوية/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، الإنزيمات، إلخ.
معدات
نحن نستخدم أنظمة AKTA Pure وAKTA Avant وPreparative HPLC الرائدة في الصناعة لأداء طرق كروماتوغرافيا مختلفة بما في ذلك التقارب والتبادل الأيوني والتفاعل الكاره للماء والمرحلة العكسية واللوني لاستبعاد الحجم.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
