يعد إزالة السلاسل الجانبية من الجلوتامين والأسباراجين تعديلًا شائعًا من حيث التأثير على خصائص المستحضرات الصيدلانية الحيوية للبروتين. يمكن أن يحدث إزالة الرطوبة في بقايا الجلوتامين، ولكن عادة بمعدل أقل بكثير. وتتأثر معدلات إزالة الرطوبة بدرجة الحرارة ودرجة الحموضة وبنية البروتين المحلي وبقايا الأمينوسيل المحيطة.
تقدم شركة Yaohai BioPharma خدمة اختبار إزالة الأحماض الأمينية، والتي تسمح لك باكتشاف إزالة الأحماض الأمينية عن طريق التحليل اللوني السائل-قياس الطيف الكتلي (LC-MS).
لقد شاركنا في التوصيف الهيكلي للبروتين لمختلف الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، والأجسام النانوية/VHHs/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، وشظايا الأجسام المضادة، والهرمونات/الببتيدات، والسيتوكينات، وعوامل النمو (CF)، والإنزيمات، والكولاجين، إلخ.
المتطلبات التنظيمية لإزالة الأحماض الأمينية
وفقًا لإرشادات ICH Q6B، يمكن اكتشاف الأشكال المنزوعة الرطوبة وتمييزها باستخدام الطرق التحليلية الكروماتوغرافية والكهربائية و/أو غيرها من الطرق التحليلية ذات الصلة.
طرق تحليلية
| تحليل الأداء |
طرق |
| التهدئة |
اللوني السائل - مطياف الكتلة (LC-MS) |
الإجراءات
على سبيل المثال، إزالة الأسبارتيك
1. الهضم الأنزيمي
2. LC-MS تحت ظروف التحليل اللوني السائل عالي الأداء (HPLC).
3. تحليل البيانات
يحدث إزالة الأسباراجين عبر وسيط succinimide (Suc)، الذي يكون عرضة للسباق والتحلل المائي، مما ينتج عنه أربعة أيزومرات Asp، بما في ذلك L-Asp، وL-IsoAsp، وD-Asp، وD-IsoAsp.
من الناحية النظرية، يمكن أن يؤدي إزالة أميد Gln إلى توليد أربعة أيزومرات Glu مقابلة من خلال عملية مشابهة لعملية إزالة أميد Asn.
يحدد قياس الطيف الكتلي عالي الدقة بسهولة فرق الكتلة 1-Da بين الببتيدات المحتوية على Asn/Gln ونظيراتها المخففة من الرطوبة Asp/Glu.
AR
EN
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
