أهمية فحص السلالة
يعد فحص المضيفين المناسبين أمرًا ضروريًا لتطوير البيولوجيا CMC، والذي يحدد جودة واتساق المنتج وعملية التصنيع. الهدف المباشر لفحص المضيف هو توفير بنك خلوي أولي مرشح (PCB)، يتمتع بمستويات تعبير عالية وثبات عالي من حيث استقرار المرور واستقرار التخزين. يعد فحص المضيف المناسب ضروريًا لسببين رئيسيين:
- أولاً، اختيار المضيف الميكروبي ذو مستوى التعبير العالي. هناك سلالات متعددة متاحة تجاريًا، والتي تستخدم للتعبير عن أنواع مختلفة من البروتينات، مثل البروتينات السامة أو البروتينات القابلة للذوبان أو البروتينات حقيقية النواة.
- ثانياً: فحص العائل بالثبات الوراثي. يعد اختبار الاستقرار الوراثي نقطة أساسية طوال دورة حياة الإنتاج. يقترح أن يتم التعرف على الاستقرار الجيني العالي كخاصية رئيسية أخرى للسلالة المناسبة.
الكلمات الرئيسية: اختيار السلالة الميكروبية، فحص السلالة الميكروبية، فحص الإنتاجية العالية للبكتيريا أو الخميرة، فحص السلالة عالية الإنتاج، فحص السلالة المستقرة للغاية، فحص السلالة الوراثية المستقرة التطبيق: الطب البشري، طب الحيوان، اللقاح، البيولوجيا الاصطناعية، الجزيء الكبير المؤتلف البيولوجيا، كاشف بيولوجي
خدمات فحص السلالة في شركة Yaohai Bio-Pharma
من خلال الاستفادة من أكثر من 10 سنوات من خبرة CDMO في البيولوجيا الميكروبية، فإننا ندعم تطوير وتصنيع العديد من الجزيئات الكبيرة، بما في ذلك لقاحات الوحدات الفرعية المؤتلفة، والجسيمات الشبيهة بالفيروسات (VLP)، والهرمونات (الأنسولين، GLP-1، هرمون النمو)، والسيتوكينات ( Interleukin-2/IL-2، IL-15، IL-21)، عوامل النمو (EGF، FGF، NGF)، الأجسام النانوية/الأجسام المضادة أحادية المجال (sdAbs)، الإنزيمات، إلخ.
لقد تراكمت لدينا تجارب غنية في اختيار أنواع مختلفة من ناقلات البلازميد، والمضيفات الميكروبية، بما في ذلك البكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli) ، والخميرة Pichia Pastoris (P. Pastoris)، Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae)، Hansenula polymorpha (H. polymorpha). يمكننا العثور على أفضل نظام تعبير عن المواد البيولوجية الفريدة الخاصة بك.
قمنا بجمع العديد من المضيفات الميكروبية بمصادر واضحة وCoA القياسية، بما في ذلك القولونية التعبير والتعبير الخميرة.
تفاصيل الخدمة
|
الخدمات
|
تفاصيل الخدمة
|
الحد الأدنى للجدول الزمني / اليوم
|
التسليمات
|
|
بناء السلالة (الإشريكية القولونية)
|
تحويل البلازميد (مضيفين متعددين)
|
5
|
شهادة توثيق البرامج للمضيفين التجاريين تقرير بناء السلالة
|
|
التحقق من PCR
|
|
تنقية السلالة
|
|
الحفاظ على السلالة
|
|
سلالة البناء (الخميرة)
|
تحضير خلايا الخميرة المختصة
|
10
|
|
الخطية البلازميد
|
|
التحول الكهربائي
|
|
فحص المقاومة/نقص التغذية
|
|
تنقية السلالة
|
|
الحفاظ على السلالة
|
|
فحص المضيف المناسب
|
استخراج الحمض النووي البلازميد أو الجينوم
|
15-20
|
عملية فحص المضيف COA للسلالات المهندسة
|
|
التحقق من PCR، وتقييد هضم الإنزيم
|
|
تسلسل الجينات المستهدف
|
|
فحص المضيفين عالية التعبير
|
|
فحص المضيفين مع الاستقرار الجيني
|
|
الحفاظ على السلالة
|
دراسة حالة
يقوم المضيف المناسب بتحسين مستوى التعبير البروتيني بمقدار 2.5 مرة.
نحن مكلفون بتطوير إنتاجية عالية E. كولاي أَضْنَى. وقمنا بتجربة ثلاثة أنواع تجارية E. كولاي المضيفين، على أساس خصائص البروتين المستهدف. لقد تبين أن السلالة S1-1 وS1-2 (الشكل أ: الخط 1,2،3.5) حسنت مستوى البروتين إلى 3 مرة مقارنة بالسلالة الأولية للعميل (الشكل أ: الخط XNUMX).
علاوة على ذلك، حققت السلالة S1-1 ثباتًا جينيًا عاليًا (الشكل ب)، وتم التعرف عليها كسلالة مرشحة للخدمات المصرفية الخلوية الأولية (PCB).
ميزات خدمتنا
أثبتت الخبرة مع مختلف المضيفات الميكروبية، على سبيل المثال، E. كولاي DH5α، TOP10، Trans10، BL21؛ P. باستوريس SMD1168H، X-33، GS115، بيشيابينك سلالة 1/2/3/4؛ س. خميرة ح. متعدد الأشكال.
نحن من ذوي الخبرة مع E. كولاي إفراز محيطي، تعبير الجسم القابل للذوبان والشمول، وكذلك تعبير الخميرة داخل الخلايا أو الإفراز. لا نضيف أي مضادات حيوية أو نضيف المضادات الحيوية بموجب التوجيهات التنظيمية.
نقوم بإنشاء منصة فحص عالية الإنتاجية لفحص السلالات عالية الإنتاج والمستقرة من أكثر من مائة سلالة مرشحة.
يتم التأكد من أن عملية هندسة الضغط والفحص يمكن تتبعها، في ظل الإدارة الجيدة للبيانات والسجلات.
AR
EN
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
