الصفحة الرئيسية > RNA IVT > تصنيع RNA المخصص > تصنيع mRNA المخصص > تغطية mRNA بالأنزيم
إن إغلاق النهاية 5' هو تعديل أساسي للـ mRNA. يساعد الـ mRNA الذي يحتوي على هيكل غطاء، وخاصة هيكل Cap1، الـ mRNA على تجنب استجابات المناعة الذاتية داخل الجسم، مما يؤدي إلى ترجمة بروتين فعالة.
الإغلاق الإنزيمي (الطريقة ذات الخطوتين) هو الطريقة التقليدية لإغلاق الـ mRNA، وهي مشابهة لعملية الإغلاق في الكائنات الحية الحقيقية. تحت تأثير سلسلة من الإنزيمات، يتم ربط الجوانين الميثيلية 7 (m7G) بالنهاية 5' من الـ mRNA عبر رابطة ثلاثية الفوسفات 5'-5' ويتم تعديلها بالتحذير لتشكيل هيكل الغطاء Cap1 (m7GpppN).
رسم توضيحي لتكوين الهيكل الطبيعي للغطاء
تتدفق عملية الإغلاق الإنزيمية كما يلي:
يُستخدم الحمض النووي الريبي الدائري المُستقيم كقالب لإنتاج النسخ الريبوزية في التجربة (IVT) في وجود إنزيم T7 polymerase، ويتم تكوين الرنا المرسال ذو البنية المصغرة عند النهاية 5' بعد تنقية واحدة باستخدام إنزيم التاج الفاكسيا و 2'-O-methyltransferase.
خدمات إضافية متاحة |
تفاصيل الخدمة |
فترة التسليم (يوم) |
تغطية mRNA بالأنزيم |
تفاعل تاجيب إنزيمي |
1 |
تحسين تفاعل التاج - اختياري |
تصميم وتحسين مكونات الاستجابة |
3~7 |
يتم تحسين مكونات تفاعل التاج، مما يؤدي إلى زيادة كبيرة في إنتاج نسخ الرنا المرسال.
يتم حقن الرنا المرسال المحبوس في خلايا 293T، ويمكن الكشف عن تعبير البروتين المستهدف.
من خلال التحكم الصارم في إنزيمات RNase في بيئة التجربة والمواد المستهلكة، يتم منع تحلل mRNA بكفاءة.
منصة mRNA الخاصة بشركة Yaohai Bio-Pharma قد طورت عملية تغطية مثالية.
بالنسبة لـ mRNA eGFP، وهو منتج أولي تم إعداده عن طريق التغطية الإنزيمية، يمكن ملاحظة إشارة ضوئية خضراء (التوهج الأخضر) على مستوى عالٍ بعد نقل 293T الخلايا لمدة 24 ساعة، والتي يتم الكشف عنها باستخدام تقنية Western Blot (WB)، مما يدل على أن البروتين المستهدف البروتين المضيء الأخضر المعزز (eGFP) يمكن تعبيره بكفاءة في البيئة المعملية.
التعبير عن mRNA eGFP المغطى إنزيميًا في خلايا 293T
تُركِز Yaohai Bio-Pharma على حلول CRDMO الدقيقة منذ أكثر من 14 عامًا. نقدم خدمات الأدوية البيولوجية الشاملة للعملاء في جميع أنحاء العالم.
No. 801, Jiankang Avenue, Taizhou, Jiangsu, China
Copyright © Yaohai Biopharmaceutical Co., Ltd. All Rights Reserved | سياسة الخصوصية
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN