مقارنةً مع طريقة التغطية الإنزيمية ذات الخطوتين، يمكن أن تقلل الطريقة المشتركة ذات الخطوة الواحدة من عملية التدفق بشكل كبير. تعتمد هذه الطريقة على النتائج وتتضمن إضافة مواد مشابهة للتغطية إلى استجابة النسخ الاصطناعي (IVT). يمكن إدخال المواد المشابهة للتغطية في بداية النسخ والحصول على RNA المرسال المغطى عند اكتمال النسخ. يمكن للمواد المشابهة للتغطية الجيل الثالث الحالي تجنب التغطية العكسية وإضافة هيكل Cap 1 مباشرةً إلى منتج النسخ.
للاعتبارات المتعلقة بمناعة mRNA داخل الجسم وكفاءة الترجمة، غالبًا ما يستخدم عملية الـ IVT أنواع معينة من نوكلوتيدات مُعدّلة، والنو클وتيدات المعدلة الشائعة هي اليوريدين المزيف (Ψ)، N1-ميثيل-يوريدين مزيف (N1Ψ)، و السيتوسين 5-مثيل (5mC).
الشكل: رسم تخطيطي لرد فعل تغطية mRNA أثناء النسخ العابر
تفاصيل الخدمة
خدمة |
تفاصيل الخدمة |
فترة التسليم (يوم عمل) |
التغطية أثناء النسخ العابر |
استجابة النسخ العابر في المختبر (نظير Clean Cap) |
1-2 |
| تعديلات النوكليوتيدات (Ψ/N1Ψ/5mC) |
| إزالة القالب ال DNA (إنزيم DNase I) |
تحسين ظروف IVT - اختياري |
تصميم وتحسين مكونات الاستجابة |
3-7 |
ميزاتنا
- استراتيجيات متنوعة لتعديل النوكليوتيدات
تُحسِّن استراتيجيات تعديل النوكليوتيدات المتعددة من تعبير البروتين.
تحقيق نسبة نسخ عالية وكفاءة تغليف عالية.
تحقيق معدل تغليف يزيد عن 95٪.
- التحكم الصارم في إنزيمات RNase
منع تدهور mRNA بفعالية من خلال السيطرة الصارمة على إنزيم RNase في البيئة التجريبية والمواد الاستهلاكية.
دراسة حالة
قامت Yaohai Bio-Pharma بإنشاء منصة عملية تغليف مشتركة ناضجة، باستخدام مواد التغليف النظيفة لإضافة هيكل Cap1 مباشرة مع تجنب التغليف العكسي. وبعد المعالجة القياسية للعينات وفحص التحليل الكهربائي الرئوي (CE)، يمكن أن يصل معدل التغليف لبروتين الببتيد المضيء الأخضر المُعزز (eGFP) إلى أكثر من 95٪.
كفاءة تغليف mRNA الخاص بـ eGFP بأكثر من 95٪
تم نقل الحمض النووي الريبوزي الرسول eGFP والحمض النووي الريبوزي الرسول mCherry الذي تم إعداده بواسطة التاج المشترك إلى خلايا 293T على التوالي، وتم ملاحظة إشارة Florescent قوية بعد 48 ساعة، مما يشير إلى أن الحمض النووي الريبوزي الرسول يتم التعبير عنه بكفاءة في خلايا 293T.
التعبير عن الحمض النووي الريبوزي الرسول eGFP والحمض النووي الريبوزي الرسول mCherry في خلية 293T
AR
EN
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
