في عملية تحضير mRNA للنسخ المختبري (IVT)، يلزم استخدام DNA البلازميد الخطي كقالب نسخ لـ IVT بمساعدة بوليميريز T7 RNA. يعد الحمض النووي البلازميد عالي الجودة أمرًا بالغ الأهمية للنسخ في المختبر.
استنادًا إلى منصة خدمة تحضير البلازميد الناضجة، يمكن لشركة Yaohai Bio-Pharma أن تقدم خدمة تحضير DNA البلازميد الخطي ذات درجة نقاء عالية ومعايير عالية لتحقيق نسخ IVT فعال.
طريقة عملنا | خدمة اختيارية | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) |
إعداد البلازميد الدائري | التوليف الجيني | التوليف الجيني (طرف ثالث) | 7-10 |
تضخيم البلازميد | تضخيم البلازميد | 2 | |
استخراج البلازميد | |||
إعداد البلازميد الخطي | الخطية البلازميد وتنقيتها | الخطية البلازميد | 1 |
تنقية الحمض النووي الخطي | |||
مراقبة جودة الحمض النووي البلازميدي | نقاء التركيز | قياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية | 1-2 |
التشكل البلازميد | الاغاروز هلام الكهربائي (AGE) | ||
الرحلان الكهربائي الشعري (CE) - اختياري | |||
تحديد البلازميد | تحديد إنزيم التقييد / AGE |
اختيار مرن لطرق الخطية
تحسين طرق استخراج وتنقية الحمض النووي لتحقيق معدلات استرداد عالية.
معايير صارمة للتحكم في العمليات، مع معدل تشكل حلزوني فائق لعينات البلازميد للبحث يزيد عن 80%.
خدمات إعداد البلازميد ومراقبة الجودة عالية المستوى وعالية الكفاءة لتلبية الاحتياجات التجريبية.
بأخذ منتج mRNA_luciferase في كتالوج Yaohai Bio-Pharma كمثال، فإن عينة البلازميد لقالب النسخ (درجة البحث) تحتوي على نسبة حلزونية فائقة تزيد عن 90%، ونسبة خطية قريبة من 100%، ونسبة نسخ لاحقة تصل إلى 1:200 ( DNA البلازميد الخطي: مرنا).
يتم نقل mRNA_luciferase الذي تم الحصول عليه من خلال تحضير البلازميد الخطي كقالب إلى 293T من الخلايا، ويتم تقييم نشاط تفاعل الإنزيم والركيزة على مدار 24 ساعة بعد ترنسفكأيشن.
يمكن اكتشاف إشارة نشاط لوسيفيراز قوية واضحة، أي يتم التعبير عن بروتين لوسيفيراز بكفاءة، مما يشير إلى أن نقاء قالب النسخ يمكن أن يلبي تمامًا متطلبات إعداد mRNA عالي الجودة.
فحص نسبة البلازميد الفائق
التحقق من صحة التعبير مرنا لوسيفيراز في المختبر