وفقًا للمفهوم المركزي، فإن الحمض النووي الريبوزي المرسال (mRNA) هو الجسر لنقل المادة الوراثية من الحمض النووي (DNA) إلى البروتينات.
يلعب mRNA دورًا بيولوجيًا من خلال تشفير البروتينات داخل الجسم الحي، ويتألف mRNA الناضج في الكائنات الحية ذوات النوى من خمس مكونات: 5' Cap (الهيكل العلوي)، 5' UTR (منطقة غير مشفرة)، ORF (الإطار القرائي المفتوح)، 3' UTR، وذيل 3' polyA (ذيل البولي أدينيلات).
العملية | خدمات إضافية متاحة | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم) |
تصميم وتحسين تسلسل mRNA | تصميم وتحسين التسلسلات المشفرة |
محاذاة سلسلة CDS تحسين كودون CDS |
1 |
تصميم وتحسين التسلسلات غير المشفرة |
تصميم وتحسين تسلسل UTR 5' تصميم وتحسين تسلسل UTR 3' تصميم وتحسين تسلسل polyA |
1-2 |
5' UTR/3' UTR |
|
ذيل PolyA 3' |
|
مكونات mRNA | الوظائف البيولوجية | استراتيجيات تحسين |
قبعة 5' | حماية mRNA من التحلل بواسطة العوامل النوكليوتيدية الخارجية والعمل بالتنسيق مع ذيل polyA عند النهاية 3'، وبروتين ربط polyA والعامل المبتدئ للترجمة لإحداث ترجمة البروتين. | الهيكل الطبيعي Cap1 يتجنب مستقبلات التعرف على الأنماط وبالتالي يقلل من الاستجابة المناعية الطبيعية، والتي يمكن تحقيقها عن طريق غلق مشترك في خطوة واحدة أو غلق إنزيمي في خطوتين [انظر تفاصيل الغلق الإنزيمي لـ mRNA والغلق المشترك أثناء النسخ]. |
uTR 5' | يمكن أن يتم التعرف على UTR 5' بواسطة الريبوسومات، ويتحكم في ترجمة mRNA ويؤثر على استقرار mRNA. | يحتوي على سلاسل Kozak دون وجود بنية ثانوية مستقرة جدًا. يُفضل استخدام UTR الطبيعية للجينات ذات التعبير العالي لنسخ mRNA خارج الجسم (IVT) مثل α-globin وβ-globin. |
CDS | مناطق تشفير البروتينات وسلسل التشفير للأجسام المضادة أو المستضدات أو بروتينات وظيفية أخرى. | تحسين الكودون يزيد من مستوى الترجمة، مع ملاحظة أن بعض الكودونات غير المثلى قد تلعب دورًا في طي البروتين. |
uTR 3' | تنظم ترجمة الحمض النووي الريبوزي المرسال واستقراره. | تُفضل UTR الطبيعية للجينات ذات التعبير العالي لاستخدامها في الحمض النووي الريبوزي المرسال المصنع مثل α-غلوبين وβ-غلوبين. |
ذيل polyA 3' | تنظم تعبير البروتين وتحمي البنية الرأسية من التحلل. | يتطلب وجود طول كافٍ (100-150 زوج قاعدي)؛ تشفير ذيل polyA على بلازميد القالب النصلي يضمن طولًا أكثر تعريفًا لذيل polyA. |
مصادر متعددة لمكتبات UTR الطبيعية والمعتدلة ذات التعبير العالي؛ إستراتيجية تعديل UTR ناضجة;
التعاون مع فريق خوارزميات AI محترف لإكمال تحسين الكودونات.
إضافة سلاسل polyA بناءً على قوالب الحمض النووي للتحكم بدقة أكبر في طول الرنا المرسال.
تحقيق تعبير كفؤ للرنا المرسال بمناعة منخفضة.
تصميم تسلسل الرنا المزدوج: الرنا mCherry-eGFP
خدمة الرنا الخاصة بشركة Yaohai Bio-Pharma مستمرة في الترقية من خلال تصميم وتحسين تسلسل جيني مزدوج لتقرير الجينات، مما يحقق التعبير المشترك للجينات المزدوجة.
باستخدام مادة نقل تقليدية، يتم نقل تسلسل الجين المزدوج mCherry-eGFP RNA إلى خلايا 293T، ويتم اكتشاف إشارتين مضئتين بعد 48 ساعة، الأولى mCherry (حمراء) والثانية بروتين البروتين الفلوري الأخضر المعزز (eGFP) مع التعبير المتزامن، ويظهر الرسم المكدس باللون الأصفر.
تعبير mRNA mCherry-eGFP في خلية 293T