Enzyme cho sản xuất ADC
Antibody–drug conjugate (ADC) thường được cấu tạo bởi một kháng thể đơn dòng (mAb) liên kết cộng hóa trị với một thuốc độc tế bào thông qua một chất kết dính hóa học. ADC được thiết kế để lấp đầy khoảng trống giữa kháng thể đơn dòng và thuốc độc tế bào nhằm cải thiện khả năng nhắm mục tiêu cụ thể và hiệu quả tiêu diệt. Không dưới mười lăm ADC đã được phê duyệt hoặc đang trong quá trình xem xét quy định ở các quốc gia khác nhau trên toàn thế giới.
Các thuộc tính chất lượng quan trọng (tỷ lệ thuốc/kháng thể) của ADC bị ảnh hưởng bởi các phương pháp gắn kết, bao gồm gắn kết ngẫu nhiên và gắn kết cụ thể tại vị trí. Gắn kết cụ thể tại vị trí có thể giúp giảm sự không đồng nhất của ADCs.
Phản ứng cộng hợp glycans do enzym trung gian, tái cấu trúc glycans và kỹ thuật glycoengineering tại vị trí N297 của đoạn Fc IgG có thể tạo ra các ADC có tính đặc hiệu theo vị trí. Các enzym được sử dụng rộng rãi trong sản xuất ADC bao gồm Peptide-N-glycosidase (PNGase F), transglutaminase vi khuẩn (BTG), Sortase A (SrtA), β1,4-galactosidase, β1,4-galactosyltransferase (Gal T), α2,6-sialyltransferase (Sial T), Endo-N-acetylglucosaminidase (ENGase), Endoglycosidase S (EndoS) và Glycosyltransferases (GTs).
Ứng dụng
|
Enzyme
|
Chức năng
|
Liên kết glycans do enzym trung gian
|
Peptide-N-glycosidase (PNGase F)
|
Cắt đứt liên kết amide giữa saccharide đầu tiên GlcNAc và chuỗi bên Asn297; Giải phóng glycans từ kháng thể IgG.
|
Bacterial transglutaminase (BTG)
|
Kết hợp tải trọng một cách cụ thể để tạo ra ADCs.
|
Sortase A (SrtA)
|
Catalyze sự nối protein.
|
β1,4-galactosidase
|
Phóng thích tất cả các galactose đầu cuối và tạo thành dạng đồng nhất G0 của kháng thể.
|
β1,4-galactosyltransferase (Gal-T)
|
Chuyển một nhóm đường có chức năng phản ứng hóa học.
|
α2,6-sialyltransferase (Sial T)
|
Tiếp hợp các nhóm axit sialic đầu cuối vào cấu trúc glycanc bản địa của kháng thể.
|
Việc tái tạo glycan bằng enzym và kỹ thuật glycoengineering
|
Endo-N-acetylglucosaminidase (ENGase)
|
Thủy phân liên kết β1,4-glycosidic giữa GlcNAcβ1–4GlcNAc của N-glycans; Loại bỏ các glycanc liên kết N trên vùng Fc của kháng thể IgG.
|
Endoglycosidase S (EndoS)
|
Glycosyltransferases (GTs)
|
Chuyển N-glycan oxazoline sang IgGs không có fucose.
|
Yaohai Bio-Pharma Cung Cấp Giải Pháp CDMO Trọn Gói Cho Enzymes