Tổng hợp saRNA tùy chỉnh

ARN IVT

MRNA tự khuếch đại (saRNA), còn được gọi là RNA sao chép, mã hóa các chuỗi mRNA phiên mã in vitro (IVT) và các gen sao chép của virus có nguồn gốc từ alphavirus hoặc flavivirus. Các gen sao chép của virus cho phép tự khuếch đại mRNA, dẫn đến tăng biểu hiện protein và liều RNA cần thiết tối thiểu so với các mRNA không khuếch đại. Một khía cạnh khác là saRNA là một phân tử tương đối lớn (hơn 14 kb).

Yaohai Bio-Pharma đã thiết lập một bộ công nghệ tổng hợp mRNA để cung cấp mRNA không khuếch đại và mRNA tự khuếch đại (1000 nt ~ 14000 nt), chẳng hạn như thiết kế và tối ưu hóa trình tự, IVT, tinh chế, đông khô và đóng gói hạt nano lipid (LNP) . Tất cả các sản phẩm được phát hành theo tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt.

Hình 1 Đặc điểm cấu trúc của mRNA IVT: mRNA thông thường, tròn và tự khuếch đại.

Đặc điểm trình tự của mRNA tự khuếch đại

RNA tự khuếch đại bao gồm bốn protein phi cấu trúc (được ký hiệu là nsP1, nsP2, nsP3 và nsP4), có nguồn gốc từ alphavirus, virus viêm não ngựa Venezuela (VEEV). Trong số này, nsP1 thể hiện các hoạt động enzyme kép, cụ thể là GTase và N7MTase, trong khi nsP2 sở hữu hoạt động RTPase, mấu chốt để giới hạn mRNA IVT để tạo ra cấu trúc Cap 0. Ngoài ra, nsP2 còn đóng vai trò là protease và helicase, tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình xử lý phức tạp của toàn bộ phức hợp nsP. Chức năng chính xác của nsP3 vẫn còn khó nắm bắt, tuy nhiên nó tham gia vào các tương tác với các protein khác nhau của tế bào chủ, do đó góp phần làm suy giảm phản ứng chống vi-rút do vật chủ thực hiện.

Vùng khởi động gen phụ alphavirus (SGP) nằm trước gen quan tâm (GOI). Yếu tố SGP tạo điều kiện thuận lợi cho việc bắt đầu phiên mã GOI bằng cách bỏ qua việc đọc trình tự mã hóa protein nsP của virus.

Hình 2 Tổng hợp và xét nghiệm tế bào của eGFP saRNA của Nền tảng RNASci Bio-Pharma Yaohai.

Giải pháp tùy chỉnh của saRNA

Giao thức tổng hợp saRNA tương tự như mRNA: Tổng hợp mRNA tùy chỉnh

Thiết kế trình tự
Chuẩn bị mẫu Plasmid
phiên mã in vitro (IVT)
Đóng nắp enzyme mRNA
Giới hạn đồng phiên mã mRNA
Thanh lọc mRNA
đông khô mRNA
Đóng gói LNP
Phân tích và thử nghiệm

Tất cả danh mục

Tổng hợp saRNA tùy chỉnh

ARN IVT

Danh mục sản phẩm

Danh mục sản phẩm mRNA

Danh mục sản phẩm saRNA

Catalogue CircRNA Sản phẩm

Tổng hợp RNA tùy chỉnh

Tổng hợp mRNA tùy chỉnh

Tổng hợp saRNA tùy chỉnh

Tổng hợp CircRNA tùy chỉnh

CDMO mARN

Ngân hàng tế bào E. coli

Phát triển Plasmid mRNA

Phát triển quy trình mRNA

Phát triển công thức LNP

Sản xuất mRNA GMP

Điền & Hoàn thiện vô trùng

Phân tích và thử nghiệm mRNA

Phát triển phương pháp phân tích mRNA

thử nghiệm mARN

Xét nghiệm hiệu lực dựa trên tế bào