Tất cả danh mục
ENEN
Phiên mã in vitro, IVT

Phiên mã in vitro, IVT Việt Nam

Trang chủ >  ARN IVT  >  Tổng hợp RNA tùy chỉnh  >  Tổng hợp mRNA tùy chỉnh  >  Phiên mã in vitro, IVT

ARN IVT

IVT, Phiên mã trong ống nghiệm

Liên quan đến việc sản xuất hàng loạt mRNA, phiên mã in vitro (IVT) là một phương pháp hiệu quả và hoàn thiện hơn. Phản ứng IVT sử dụng DNA plasmid được tuyến tính hóa có chứa chất khởi động T7 làm mẫu và mRNA được tổng hợp với nucleoside triphosphate (NTP) làm cơ chất với sự có mặt của T7 RNA polymerase.

Sửa đổi nucleotide là một bước đột phá trong việc khám phá mRNA, trong đó các phân tử mRNA chưa sửa đổi được các cảm biến RNA nội bào nhận ra để kích hoạt khả năng miễn dịch bẩm sinh. Để xem xét khả năng sinh miễn dịch mRNA in vivo và hiệu quả dịch mã, quy trình IVT thường sử dụng một số loại NTP biến đổi nhất định và các nucleotide biến đổi phổ biến là pseudouridine (Ψ), N1-methyl-pseudouridine (N1Ψ) và 5-methylcytosine (5mC).

không xác định

Quá trình phiên mã in vitro của mRNA

图片

Sơ đồ phản ứng phiên mã in vitro (IVT)

Chi tiết dịch vụ
Dịch vụ tùy chọn
Chi tiết dịch vụ
Thời gian giao hàng (Ngày làm việc)
Phiên mã in vitro (IVT)
 IVT, phiên mã in vitro 1
Sửa đổi nucleotide (Ψ/N1Ψ/5mC, v.v.)
Loại bỏ mẫu DNA (DNase I)
Tối ưu hóa điều kiện IVT - tùy chọn
 Thiết kế và tối ưu hóa các thành phần phản ứng IVT 2-5
Các tính năng của chúng tôi
  • Chiến lược sửa đổi nucleotide đa dạng

Cải thiện sự ổn định của mRNA và biểu hiện protein trong cơ thể.

  • Thiết kế và tối ưu hóa thử nghiệm nghiêm ngặt

Có thể đạt được sự chuẩn bị đoạn mRNA lên tới 10kb.

  • Phiên âm hiệu quả

Bằng cách tối ưu hóa các điều kiện phản ứng IVT, tốc độ phiên mã lên tới 1:200.

  • Kiểm soát chặt chẽ RNase

Kiểm soát chặt chẽ RNase thông qua môi trường thử nghiệm và vật tư tiêu hao có thể ngăn chặn sự suy thoái mRNA một cách hiệu quả.

trường hợp nghiên cứu

Hệ thống phản ứng IVT hiện tại được tối ưu hóa đại khái cho các hệ thống tổng hợp có chiều dài khoảng 100 nt, không dành cho các mRNA có độ dài tùy ý. Trình tự mRNA càng dài thì càng khó phiên mã và càng dễ bị thoái hóa.

Để chuẩn bị các chuỗi mRNA tùy chỉnh có độ dài khoảng 10 kb, Yaohai Bio-Pharma đã chuẩn bị thành công các mẫu chất lượng cao với tỷ lệ phiên mã cao 1:135 và thu được 135 μg sản phẩm mRNA tinh khiết ban đầu sau 1 μg plasmid được tuyến tính hóa. được sao chép in vitro thông qua thiết kế thử nghiệm nghiêm ngặt, tối ưu hóa liên tục các điều kiện phản ứng và kiểm soát chặt chẽ RNase.

图片

Xác định mRNA (Điện di trên gel agarose)

Nhận báo giá miễn phí

Hãy liên lạc