Phân tích |
Phương pháp |
Trọng lượng phân tử |
Lý thuyết sắc ký lỏng - Phổ chất lượng (LC-MS) / Sắc ký lỏng/Phổ khối điện phun (LC/ES-MS) của protein nguyên vẹn, đã giảm và đã khử đường N- |
Phân tích Biến thể Kích thước |
LC-MS, Sắc ký loại trừ kích thước - Phổ khối (SEC-MS), Khuếch tán ánh sáng động (DLS), Phân tích ly tâm siêu tốc (AUC), Sắc ký loại trừ kích thước - Khuếch tán ánh sáng đa góc (SEC-MALS) |
Phân tích Biến thể Điện tích |
LC-MS, Sắc ký trao đổi ion - Phổ khối (IEX-MS) |
Độ ổn định nhiệt (Tm) |
Bình phân tích nhiệt độ quét vi sai (DSC) |
Hệ số hấp thụ |
Máy phân tích axit amin |
Bản đồ Peptide |
LC-MS sau khi tiêu protein bằng enzym protease |
Phạm vi chuỗi protein |
LC-MS sau khi tiêu protein một-ba lần |
Xác định trình tự N-terminus |
LC-MS sau khi tiêu protein, xác định bằng bản đồ peptit Edman degradation |
Phân tích chuỗi cuối C |
LC-MS Sau khi tiêu hóa |
Liên kết disulfide |
LC-MS Sau khi tiêu hóa |
Nhóm Sulfhydryl tự do |
Phương pháp Ellman |
Oxidation Axit Amino |
LC-MS, Cromatografi lỏng hiệu năng cao pha ngược (RP-HPLC) hoặc Cromatografi tương tác kỵ nước-Cromatografi lỏng hiệu năng cao (HIC-HPLC) và phổ khối (MS) |
Isomerization Axit Amino |
LC-MS sau khi phân cắt enzym |
Deamidation |
LC-MS sau khi phân cắt enzym |
Sửa đổi N-Terminal |
LC-MS Sau khi tiêu hóa |
Sửa đổi C-Terminal |
LC-MS Sau khi tiêu hóa |
Cắt Lysine ở vị trí C-terminal |
LC-MS Sau khi tiêu hóa |
Phân tích N-glycan |
LC-MS của glycans được giải phóng |
Vị trí N-glycosylation |
LC-MS sau khi phân cắt enzym |
Tỷ lệ chiếm chỗ của vị trí N-glycosylation |
LC-MS sau khi tiêu hóa bằng deglycosylase và protease (trypsin hoặc Asp-N) |
Cấu trúc bậc cao |
Chiếu xạ hai chiều (CD)Phổ hồng ngoại (IR) |