Liên kết disulfide đôi khi được gọi là liên kết SS hoặc cầu nối disulfide. Cầu nối disulfide ảnh hưởng đến hoạt động sinh học của các chất sinh học, như peptide, protein và kháng thể.
Yaohai Bio-Pharma cung cấp các dịch vụ phân tích liên kết disulfide chủ yếu dựa trên phương pháp sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS).
Chúng tôi đã tham gia vào Nghiên cứu đặc tính cấu trúc protein của nhiều phân tử lớn khác nhau, bao gồm Vắc xin tiểu đơn vị tái tổ hợp, Nanobody/VHH/Kháng thể miền đơn (sdAbs), Mảnh kháng thể, Hormon/Peptit, Cytokine, Yếu tố tăng trưởng (GF), Enzyme, Collagen, vân vân.
Yêu cầu pháp lý đối với trái phiếu disulfide
Có số lượng và sự hình thành cầu nối disulfide khác nhau trong các sản phẩm sinh học khác nhau, cần được đánh giá đầy đủ trong quá trình nghiên cứu đặc tính protein nếu trình tự axit amin chính dự kiến của sản phẩm có chứa axit amin cysteine. Điều này cũng được yêu cầu trong tài liệu quy định ICH Topic Q6B.
Phương pháp phân tích
nghiên cứu |
Phương pháp |
Liên kết disulfua |
Sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) sau khi phá hủy |
Để có dữ liệu cần thiết để đánh giá đầy đủ các cầu nối disulfide và thiol tự do, các nhà khoa học từ Yaohai Bio-pharma tiến hành lập bản đồ peptide sau tiêu hóa bằng một protease cụ thể. Sau đó, phân tích bằng phương pháp quang phổ khối ion hóa LC/Electrospray (ES-MS) và/hoặc LC/ES-MS/MS trực tuyến trước và sau quá trình khử.
Yaohai Bio-pharma cũng có thể tiến hành thử nghiệm của Ellman, đây là một phần quan trọng trong mọi đánh giá sản phẩm có chứa Cysteine hoàn toàn. Trong thử nghiệm của Ellman, chúng tôi tạo dẫn xuất sulfhydryl bằng cách sử dụng (5,5'-dithio-bis- [2-nitrobenzoic acid]). Để xác định mức thiol tự do, sản phẩm thu được được phân tích bằng phép đo quang phổ UV ở bước sóng 412nm.