Việc deamid hóa chuỗi bên của glutamine và asparagine là một sự biến đổi phổ biến về mặt ảnh hưởng đến đặc tính của protein dược phẩm sinh học. Deamid hóa có thể xảy ra ở các nhóm residu glutamine, nhưng thường ở tốc độ thấp hơn nhiều. Tốc độ deamid hóa bị ảnh hưởng bởi nhiệt độ, pH, cấu trúc protein cục bộ và các residu aminoacyl lân cận.
Yaohai BioPharma cung cấp dịch vụ kiểm tra deamid hóa axit amin, cho phép bạn phát hiện deamid hóa axit amin bằng Kỹ thuật Cromatografi Dung Dịch - Quang Phổ Khối (LC-MS).
Chúng tôi đã tham gia vào việc Đặc Trưng Cấu Trúc Protein của nhiều phân tử lớn khác nhau, bao gồm Vắc-xin Tiểu Đơn Vị Tái Tổ Hợp, Nanobodies/VHHs/ Antibody Đơn miền (sdAbs), Các Phân đoạn Antibody, Nội Tiết Tố/Peptide, Cytokines, Yếu Tố Tăng Trưởng (CF), Enzymes, Collagens, v.v.
Yêu cầu Quản Lý đối với Deamid hóa Axit Amin
Theo hướng dẫn ICH Q6B, các dạng deamidated có thể được phát hiện và đặc trưng bởi các phương pháp phân tích sắc ký, điện di và/hoặc các phương pháp phân tích khác liên quan.
Phương pháp phân tích
| Phân tích |
Phương pháp |
| Deamidation |
Sắc Ký Lỏng-Kỹ Thuật Phổ Khối (LC-MS) |
Quy trình
ví dụ, deamidation aspartic
1. Tiêu hóa enzym
2. LC-MS dưới điều kiện Sắc Ký Lỏng Hiệu Năng Cao (HPLC)
3. Phân tích Dữ liệu
Deamidation asparagine xảy ra thông qua trung gian succinimide (Suc), chất này dễ bị racemization và thủy phân, tạo ra bốn isomer Asp, bao gồm L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp, và D-IsoAsp.
Trong lý thuyết, deamidation Gln có thể tạo ra bốn isomer Glu tương ứng thông qua một quá trình tương tự như deamidation Asn.
Phổ khối phân giải cao dễ dàng nhận diện sự khác biệt về khối lượng 1-Da giữa các peptit chứa Asn/Gln và các đối ứng đã bị khử amid của chúng là Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
