Hồ sơ N-glycans là điều cần thiết để sản xuất dược phẩm sinh học. Yaohai Bio-Pharma cung cấp dịch vụ lập hồ sơ N-glycan bằng phương pháp sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) của glycans được phát hành và dán nhãn. Các bước chung để chuẩn bị mẫu N-glycans bao gồm tiêu hóa glycoprotein (GP), khử glycosyl hóa, tinh chế, ghi nhãn/tạo dẫn xuất và Chiết pha rắn (SPE).
Chúng tôi đã tham gia vào Nghiên cứu đặc tính cấu trúc protein của nhiều phân tử lớn khác nhau, bao gồm Vắc xin tiểu đơn vị tái tổ hợp, Nanobody/VHH/Kháng thể miền đơn (sdAbs), Mảnh kháng thể, Hormon/Peptit, Cytokine, Yếu tố tăng trưởng (GF), Enzyme, Collagen, vân vân.
Yêu cầu quy định đối với hồ sơ N-Glycan
Theo hướng dẫn của ICH Q6B, “đối với glycoprotein, hàm lượng carbohydrate (đường trung tính, đường amin và axit sialic) được xác định. Ngoài ra, cấu trúc của chuỗi carbohydrate, kiểu oligosacarit (mặt anten) và (các) vị trí glycosyl hóa của chuỗi polypeptide được phân tích trong phạm vi có thể.
Phương pháp phân tích
| nghiên cứu |
Phương pháp |
| Hồ sơ N-glycan |
Phân tích sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) của glycans được giải phóng và dán nhãn |
Thủ tục
1. Giải phóng glycan bằng enzym với Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. Tạo dẫn xuất glycans được giải phóng bằng 2-aminobenzamide (2-AB)
3. Tinh chế N-glycan thu được trên cột TSK Amide - 80 nếu có lượng lớn chất tẩy rửa, muối không bay hơi hoặc vật liệu có nhóm amino tự do
4. Đánh dấu bằng huỳnh quang 2-aminobenzamide (2-AB)
5. Phân tích LC-MS của N-glycan được dán nhãn
KHAI THÁC. Phân tích dữ liệu
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
KHÔNG
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
