Xác định trọng lượng phân tử bằng LC-MS
Trọng lượng phân tử nguyên vẹn luôn được công nhận là một đặc tính quan trọng của sinh học. Phân tích trọng lượng phân tử nguyên vẹn được sử dụng để chứng minh các sản phẩm protein/peptide và xác minh thành phần sinh học. Đo trọng lượng phân tử là một yêu cầu của hướng dẫn quy định.
Yaohai Bio-Pharma cung cấp khả năng phân tích trọng lượng phân tử nguyên vẹn trong điều kiện tự nhiên, khử, N-khử khí. Chúng tôi sử dụng phương pháp sắc ký lỏng-khối phổ (LC-MS) để xác định trọng lượng phân tử nguyên vẹn.
Yêu cầu quy định về trọng lượng phân tử
Trong ICH Q6 khuyến nghị rằng “trọng lượng phân tử (hoặc kích thước) được xác định bằng phương pháp sắc ký loại trừ kích thước, điện di trên gel SDS-polyacrylamide (trong điều kiện khử và không khử), phép đo khối phổ (MS) và các kỹ thuật thích hợp khác”.
Phương pháp phân tích
| nghiên cứu |
Phương pháp |
| Trọng lượng phân tử |
LC-MS / Sắc ký lỏng/Phương pháp quang phổ khối phun điện (LC/ES-MS) của các protein hoặc tiểu đơn vị nguyên gốc, khử, N-deglycosyl hóa |
Thủ tục phân tích
Trọng lượng phân tử nguyên vẹn:
- Thực hiện LC-MS trên mẫu gốc như đã nhận được.
- Phân tích dữ liệu LC-MS.
Giảm trọng lượng phân tử:
- Xử lý mẫu protein bằng chất khử thích hợp;
- Thực hiện LC-MS trên protein đã khử;
- Phân tích dữ liệu LC-MS.
Trọng lượng phân tử N-deglycosyl hóa:
- Loại bỏ N-glycans bằng enzyme thích hợp;
- Thực hiện LC-MS trên protein N-deglycosyl hóa;
- Phân tích dữ liệu LC-MS.
Trọng lượng phân tử khử và khử N:
- Xử lý mẫu protein bằng chất khử thích hợp;
- Loại bỏ N-glycans bằng enzyme thích hợp;
- Thực hiện LC -MS trên protein khử và N-deglycosyl hóa;
- Phân tích dữ liệu LC-MS.
Trọng lượng phân tử của tiểu đơn vị protein:
- Sự phân chia tiểu đơn vị
- Thực hiện LC-MS trên tiểu đơn vị protein
- Phân tích dữ liệu LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
KHÔNG
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
