Theo học thuyết trung tâm, RNA thông tin (mRNA) là cầu nối cho việc truyền tải vật liệu di truyền từ DNA đến protein.
mRNA đóng vai trò sinh học bằng cách mã hóa protein trong cơ thể, và mRNA trưởng thành ở sinh vật nhân thực bao gồm năm thành phần: nắp 5' (cấu trúc nắp), UTR 5' (khu vực không mã hóa), ORF (khung đọc mở), UTR 3', và đuôi polyA 3' (đuôi polyadenylate).
Chi tiết Dịch vụ
| Quy trình |
Dịch vụ tùy chọn |
Chi Tiết Dịch Vụ |
Thời gian giao hàng (Ngày) |
| thiết kế và Tối ưu Hóa Dãy mRNA |
Thiết kế và tối ưu hóa chuỗi mã hóa |
Căn chỉnh chuỗi CDS
Tối ưu hóa mật mã CDS
|
1 |
| Thiết kế và tối ưu hóa các chuỗi không mã hóa |
thiết kế và tối ưu hóa chuỗi UTR 5'
thiết kế và tối ưu hóa chuỗi UTR 3'
thiết kế và tối ưu hóa chuỗi polyA
|
1-2 |
Các tùy chọn tùy chỉnh
| 5’ UTR\/3’ UTR |
- Chuỗi UTR tự nhiên
- Chuỗi UTR đột biến/Kỹ thuật hóa
|
| đuôi PolyA 3' |
- đuôi 100A ~120A (được khuyến nghị)
- Đuôi polyA phân đoạn
- Đuôi tùy chỉnh khác
|
Các Chiến Lược Thường Dùng cho Thiết Kế Chuỗi mRNA
| các Thành Phần của mRNA |
Chức Năng Sinh Học |
Chiến lược tối ưu hóa |
| mũ 5' |
Bảo vệ mRNA khỏi sự phân hủy bởi exonucleases và hoạt động cùng với đuôi polyA ở đầu 3', protein gắn kết polyA và yếu tố khởi đầu dịch mã protein để bắt đầu quá trình dịch protein. |
Cấu trúc mũ Cap1 tự nhiên tránh được các receptor nhận diện mẫu và do đó giảm phản ứng miễn dịch tự nhiên, điều này có thể đạt được bằng cách đính mũ đồng thời trong quá trình chuyển lục hoặc bằng phương pháp enzym hai bước [xem chi tiết về việc đính mũ enzym mRNA và đính mũ đồng thời]. |
| khu Vực 5’ UTR |
Khu vực 5' UTR có thể được ribosome nhận diện, điều chỉnh quá trình dịch mã mRNA và ảnh hưởng đến độ ổn định của mRNA. |
Chứa chuỗi Kozak mà không có cấu trúc thứ cấp rất ổn định. Các UTR tự nhiên của gen biểu hiện mạnh thường được ưu tiên sử dụng cho mRNA chuyển lục in vitro (IVT) như α-globin và β-globin. |
| CDS |
Khu vực mã hóa protein và chuỗi mã hóa cho kháng nguyên, kháng thể hoặc các protein chức năng khác. |
Tối ưu hóa bộ ba nucleotide tăng cường mức độ dịch mã, lưu ý rằng một số bộ ba không tối ưu có thể đóng vai trò trong quá trình gấp protein. |
| uTR 3' |
Điều hòa sự dịch mã mRNA và độ ổn định của nó. |
UTR tự nhiên của các gen được biểu hiện cao thường được ưu tiên cho mRNA IVT như α-globin và β-globin. |
| đuôi polyA 3' |
Điều hòa biểu hiện protein và bảo vệ cấu trúc mũ khỏi bị phân hủy. |
Chiều dài thích hợp (100-150 bp) là cần thiết; mã hóa đuôi polyA trên plasmid bản mẫu phiên bản đảm bảo chiều dài đuôi polyA chính xác hơn. |
Tính năng của chúng tôi
Nhiều nguồn thư viện UTR tự nhiên và đã sửa đổi được biểu hiện cao; chiến lược sửa đổi UTR chín muồi;
- Đội ngũ tối ưu hóa CDS tiên tiến
Hợp tác với đội ngũ thuật toán AI chuyên nghiệp để hoàn thành việc tối ưu hóa các codon.
- Phân bố đuôi polyA đều đặn
Thêm chuỗi polyA theo mẫu DNA để kiểm soát độ dài mRNA chính xác hơn.
- Các tổ hợp tối ưu đa dạng
Đạt được biểu hiện hiệu quả của mRNA với mức miễn dịch thấp.
Nghiên cứu trường hợp
Thiết kế chuỗi của mRNA hai reporter: mRNA mCherry-eGFP
Dịch vụ mRNA của Yaohai Bio-Pharma tiếp tục được nâng cấp với thiết kế và tối ưu hóa chuỗi hai gene reporter nối tiếp, đạt được sự biểu hiện đồng thời của hai gene.
Sử dụng chất chuyển gen thông thường, chuỗi hai gene nối tiếp mCherry-eGFP mRNA được chuyển vào tế bào 293T, và sau 48 giờ, hai tín hiệu huỳnh quang của mCherry (đỏ) và protein huỳnh quang xanh lá mạnh (eGFP) được phát hiện với sự biểu hiện đồng thời, và đồ thị chồng lên nhau được làm nổi bật bằng màu vàng.
Biểu hiện mRNA mCherry-eGFP trong tế bào 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
