mRNA đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu về chức năng gen hoặc protein. Trong khi đó, nó phổ biến trong việc phát triển sinh học dự phòng và điều trị. Là một chiến lược tổng hợp phổ biến cho các phân tử RNA, phiên mã in vitro (IVT) cho phép chúng tôi thu được các bản phiên mã tùy chỉnh một cách hiệu quả.
Yaohai Bio-Pharma đã thiết lập một bộ công nghệ tổng hợp mRNA để cung cấp RNA chất lượng cao, chẳng hạn như thiết kế và tối ưu hóa trình tự, IVT, tinh chế, đông khô và đóng gói hạt nano lipid (LNP). Tất cả các sản phẩm đều được phát hành theo tiêu chuẩn kiểm soát chất lượng (QC) nghiêm ngặt.
Với sự bùng nổ của đại dịch COVID-19 vào năm 2020, công nghệ mRNA đã có những bước phát triển vượt bậc, các nghiên cứu và ứng dụng liên quan của nó đã đạt được sự phát triển chưa từng có, bao gồm vắc xin dự phòng để phòng bệnh truyền nhiễm, vắc xin và thuốc điều trị ung thư, liệu pháp khối u, protein liệu pháp thay thế, y học tái tạo và liệu pháp tế bào và gen (CGT).
Thuốc chủng ngừa mRNA | liệu pháp mARN |
|
Quy trình xét duyệt | Dịch vụ tùy chọn | Chi tiết dịch vụ | Thời gian giao hàng (ngày làm việc) | Có thể giao được |
Thiết kế và tối ưu hóa trình tự mRNA | Thiết kế và tối ưu hóa trình tự mã hóa | Thiết kế trình tự CDS và tối ưu hóa codon | 1-3 | Tệp trình tự |
Thiết kế và tối ưu hóa các chuỗi không mã hóa | Thiết kế và tối ưu hóa trình tự UTR, polyA | |||
Chuẩn bị Plasmid mẫu phiên mã | Chuẩn bị plasmid tái tổ hợp | tổng hợp gen | 7-10 | |
Khuếch đại và trích xuất plasmid | 4 | |||
Tuyến tính hóa và tinh chế plasmid | ||||
Phiên mã trong ống nghiệm mRNA | Giới hạn đồng phiên mã (phương pháp một bước) | Phiên mã in vitro (IVT) / Cap analog | 1-2 | N/A |
Sửa đổi nucleotide (sửa đổi UTP/CTP) | ||||
Loại bỏ mẫu DNA (DNase I) | ||||
Đóng nắp bằng enzyme (quy trình hai bước) | TTTON | 2-3 | ||
Sửa đổi nucleotide (sửa đổi UTP/CTP) | ||||
Loại bỏ mẫu DNA (DNase I) | ||||
tinh chế mRNA (lithium clorua/hạt từ tính) | ||||
Nắp enzyme | ||||
Thanh lọc mRNA | Sơ đồ thanh lọc thông thường | Kết tủa liti clorua | 1 | dược chất mARN |
Tinh chế hạt từ tính | ||||
Sơ đồ tinh chế cột sắc ký | Sự kết hợp của nhiều phương pháp sắc ký | 1-2 | ||
Trao đổi bộ đệm | Siêu lọc | 1 | ||
đông khô mRNA | Đông khô | đóng băng trước | 2-3 | bột đông khô mRNA |
Sấy sơ cấp (thăng hoa) | ||||
Sấy thứ cấp (giải hấp) | ||||
đóng gói mRNA | Đóng gói LNP | Đóng gói LNP | 2-3 | sản phẩm thuốc mRNA-LNP |
Nồng độ và trao đổi đệm | ||||
Phân tích chất lượng mRNA | dược chất mRNA/bột đông khô | Nồng độ, độ tinh khiết | 1 | Báo cáo thử nghiệm |
Tính toàn vẹn, hiệu quả giới hạn, phân phối đuôi polyA | 2-5 | |||
sản phẩm thuốc mRNA-LNP | Hiệu quả đóng gói | 1 | ||
Kích thước hạt và phân bố | ||||
Thay đổi bề mặt | ||||
Xác thực biểu thức mRNA | Đánh giá tế bào 293T | Mạ tế bào | 4 | |
Sự biến đổi tạm thời của tế bào | ||||
Quan sát tín hiệu huỳnh quang | 1-3 | |||
Western blot (WB)/ Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA) |
Mũ 5' | ▪ Chưa khai thác ▪ Cap0, đồng nắp ▪ Cap1, đồng nắp ▪ Cap1, nắp enzyme |
5'UTR/3'UTR | ▪ Bản chất trình tự UTR ▪ Trình tự UTR đột biến/được thiết kế |
Đuôi 3' PolyA | ▪ Đuôi 100A ~120A (khuyên dùng) ▪ Đuôi polyA phân đoạn ▪ Đuôi tùy chỉnh khác |
Nucleoside biến đổi | ▪ Căn cứ không được sửa đổi ▪ Pseudouridin (Ψ) ▪ N1-Metylpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-metyluridin (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-metyl-U ▪ Các sửa đổi khác |
Luồng dịch vụ tích hợp
Cung cấp một loạt dịch vụ từ thiết kế trình tự mặt trước đến chuẩn bị mRNA mặt sau, kiểm soát chất lượng và xác thực biểu thức.
Thiết kế và tối ưu hóa trình tự tiên tiến quốc tế
Thiết kế và tối ưu hóa trình tự mRNA chuyên nghiệp tạo điều kiện cho việc biểu hiện mRNA hiệu quả.
Sửa đổi nucleotide đa dạng
Tăng hiệu quả biểu hiện mRNA và giảm phản ứng miễn dịch bất lợi của mRNA.
Nền tảng thanh lọc trưởng thành
Bằng cách kết hợp phương pháp tinh chế thông thường và phương pháp tự thiết kế, các mẫu mRNA thu được có độ tinh khiết cao
Nền tảng QC hoàn chỉnh
Làm phong phú các tùy chọn QC để đáp ứng các yêu cầu của các thử nghiệm thông thường, chẳng hạn như nồng độ, độ tinh khiết và tính toàn vẹn A260/280, cũng như các yêu cầu kiểm soát chất lượng cao, chẳng hạn như hiệu suất giới hạn/phân phối polyA.
Giao hàng nhanh chóng
MRNA tùy chỉnh có thể được phân phối trong vòng 7 ngày ngoại trừ việc tổng hợp trình tự thuê ngoài.