Tất cả danh mục
DNA vòng tròn nhỏ

DNA vòng tròn nhỏ

Trang chủ >  Phương thức  >  Axit nucleic  >  DNA vòng tròn nhỏ

Phương thức

DNA vòng tròn nhỏ

DNA vòng tròn nhỏ (mcDNA) là một vectơ DNA không chứa virus nhỏ hơn có nguồn gốc từ cấu trúc giống DNA plasmid của bố mẹ. DNA vòng tròn nhỏ khác với DNA plasmid thông thường ở chỗ nó chứa chất khởi đầu và gen quan tâm (GOI), không có nguồn gốc sao chép (ORI) và dấu hiệu chọn lọc (selMark). DNA vòng tròn nhỏ được tạo ra ở vi khuẩn thông qua tái tổ hợp in vivo để loại bỏ các chuỗi bổ sung (được gọi là mini-plasmid) khỏi DNA plasmid. Do tính an toàn của nó, DNA minicircle đã trở nên phổ biến như một vec tơ không chứa virus cho liệu pháp gen, vắc xin DNA, v.v.

图片

Hình 1. Cấu trúc của DNA Plasmid (pDNA) và DNA Minicircle (mcDNA)

Hệ thống tái tổ hợp DNA Minicircle

Có bốn hệ thống tái tổ hợp DNA in vivo minicircle chính đã được nghiên cứu, bao gồm Phage λ integrase, Phage P1 Cre recombinase, ParA resolvase, PhiC31 integra se/I-SceI.

Chiến lược

Tích phân phage λ

Phage P1 Cre tái tổ hợp

phân giải ParaA

Tích hợp PhiC31/I-SceI

Cơ chế

Tyrosine recombinase, hoạt động thông qua protein FIS và IHF để xúc tác cho sự tái tổ hợp của các vị trí lai att

Tyrosine recombinase dành riêng cho vị trí, thực hiện tái tổ hợp hai chiều khi liên kết với các vị trí loxP

Serine recombinase, thực hiện tái tổ hợp một chiều và không thể đảo ngược giữa hai vị trí MRS giống hệt nhau

Serine recombinase, làm trung gian cho quá trình tái tổ hợp một chiều giữa các vị trí gắn attP/attB, trong khi I-SceI endonuclease phân tách các tạp chất liên quan đến sản phẩm và plasmid gốc không tái tổ hợp

Tính năng

Phụ thuộc vào biểu hiện của yếu tố ký chủ FIS và IHF; độc tính nội tại; Plasmid gốc và mini-plasmid còn sót lại

Plasmid gốc và mini-plasmid còn sót lại

Năng suất cao; Plasmid gốc và mini-plasmid còn sót lại

Sự suy thoái của plasmid của cha mẹ liên quan đến năng suất giảm

Yaohai Bio-Pharma cung cấp giải pháp CDMO toàn diện cho DNA vòng tròn nhỏ
Tham khảo:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. DNA vòng tròn nhỏ: Tương lai cho các vectơ dựa trên DNA? Xu hướng công nghệ sinh học. 2020 tháng 38;10(1047):1051-10.1016. doi: 2020.04.008/j.tibtech.XNUMX.

Nhận báo giá miễn phí

Hãy liên lạc