Rekombinant enzym för terapeutisk användning
Terapeutiska enzym som erhålls genom bioteknologiska processer används allmänt för flera kliniska tillämpningar, inklusive enzymersättningsterapi, nedbrytning av ackumulerade metaboliter och gift, cancerbehandling och genomredigering. Flera terapeutiska enzym kan produceras i mikrobiella uttryckssystem.
Rekombinant enzym som material
Det finns flera enzym som används i produktionen av lång kodande RNA (t.ex., mRNA, saRNA, circRNA), produktion av antikropp–längd konjugat (ADCs) och andra. Mikroberproducerade enzym är kostnads-effektivare än dem från djurceller, speciellt E. coli-uttryckssystemet.
|
Ansökan
|
Enzymer
|
Funktion
|
|
Enzym för linjär RNA-produktion, RNase-fritt
|
Restriktionsendonukleaser
|
Linjärisering av plasmid DNA (pDNA) för att undvika att skapa längre transkript.
|
|
T7 RNA polymeras (T7 RNAP)
|
Bind till T7-promotorn och generera specifikt RNA-transkript; Spelar en nyckelroll under in vitro transkription (IVT)-reaktionen.
|
|
Vaccinia kapningsenzym
|
Lägger Kap-strukturer på 5′-endarna av IVT-mRNA.
|
|
Pirofosfatase, inorganisk (iPPase)
|
Förhindrar pirofosfat under IVT-reaktionen.
|
|
RNase-inhibitor, rekombinant
|
Inhiberar RNase-aktivitet under IVT-reaktionen.
|
|
DNase I
|
Ta bort DNA-mallen.
|
|
Enzym för circRNA-produktion, RNase-fritt
|
Rnase R
|
Förädlings av linjär RNA och berikning av cirkulär RNA.
|
|
Enzymbaserad glykankonjugation
|
Peptide-N-glykosidase (PNGase F)
|
Kliver amiddbandet mellan det första sockernas GlcNAc och Asn297 sida; Frigör glykaner från IgG-antikroppar.
|
|
Bakteriell transglutaminas (BTG)
|
Konjugera laster på plats-spesifikt sätt för att skapa ADC:er.
|
|
Sortase A
|
Katalysér ligationen av proteiner.
|
|
β1,4-galaktosidase
|
Frigöra alla terminalgalakteroser och skapa en homogen G0-isoform av antikroppen.
|
|
β1,4-galaktosyltransferas (Gal-T)
|
Överföra en sockerrelikv med en kemiskt reaktiv funktionsgrupp.
|
|
α2,6-sialyltransferas (Sial T)
|
Inkorporera terminal-sialinsyror i den nativa glykanstrukturen av en antikropp.
|
|
Enzymbaserad glykanremodellering och glykoingenjörskonst
|
Endo-N-acetylglucosaminidase (ENGase)
|
Hydrolisera β1,4-glykosidiska bindningen mellan GlcNAcβ1–4GlcNAc av N-glykaner; Ta bort N-länkade glykaner på Fc-regionen av IgG-antikroppar.
|
|
Endoglykosidas S (EndoS)
|
|
|
Glykosyltransferaser (GTs)
|
Transfererar N-glykan oxazolin till defukosylerade IgGs.
|
|
Övrigt
|
Enzymer producerade av mikrober
|
Anpassad behov
|
Rekombinant Enzym som Reagens
Taggfjäderingsproteaser
Fusionsmärken används ofta för att förbättra upplösbarheten och stabiliteten hos rekombinanta protein av intresse och göra dem enklare att rensera. De vanligaste märkena inkluderar His-märke, maltos-bindningsprotein (MBP), glutation-S-transferas (GST) etc.
Vanligtvis läggs en länksekvens mellan fusionsmärket och målproteinssekvensen för att ta bort märket. Borttagandet av fusionsmärken kräver ortspecifika proteaser, såsom enterokinase (EK), trombin, tobaksetikvirusproteas (TEVp), mänsklig rinovirusproteas 3C (HRV3C), små ubiquitin modifierande protein (SUMO) proteas, tobaksvenmörklingsvirus (TVMV) proteas och karboksypeptidas A/B (CPA/CPB).
|
TYP
|
Enzymer
|
Genkännningssida
|
|
Taggfjäderingsendoproteaser
|
Enterokinase (EK), enteropeptidas
|
DDDDK↓
|
|
trombin
|
LVPR↓GS
|
|
TEV-proteas
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C-proteas
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO-proteas
|
SUMO tertiär struktur
|
|
TVMV-proteas
|
ETVRFQG↓S
|
|
Taggborttagande exoproteaser
|
Carboxypeptidas A (CPA)
|
C-terminala aminosyror, förutom Pro, Lys och Arg
|
|
Carboxypeptidas B (CPB)
|
C-terminala Lys och Arg
|
Andra Proteaser, Nukleaser och Amidaser
|
Ansökan
|
Enzymer
|
Funktion
|
|
Andra proteaser
|
Protease K
|
En serinproteas som förvarar protein genom att hydrolysera peptidsyner.
|
|
IdeS, IgG protease
|
IgG-degraderande enzym (Ides) som klyver på ett specifikt ställe av immunoglobulin G (IgG), vilket genererar Fab- och Fc-fragment.
|
|
IgA1 protease
|
Ett proteolytiskt enzym som klyver på ett specifikt ställe i sekvensen av den mänskliga immunoglobulin A1 (IgA1) hinkregionen.
|
|
Nuklease
|
Nuklease
|
Klyver nukleinsyror (DNA eller RNA) genom att hydrolysera fosfodiesterbindningarna.
|
|
Restriktionsenzym
|
Ett endonuclease som klyver DNA vid eller nära specifika platser.
|
|
Amidase
|
PNGase F
|
Kliver mellan den inre N-acetylglucosamin (GlcNAc) och asparaginresiduen i hög mannose, hybrid och komplexa oligosaccharider.
|
Yaohai Bio-Pharma erbjuder en total lösning för CDMO för rekombinant enzym.
Referens:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Det förflutna, nuet och framtiden för enzymbaserade behandlingar. Drug Discov Today. 2022 Jan;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
SV
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
