Biologiska aktiva substanser är komplexa stora molekyler och särskilt känsliga för miljöfaktorer: temperatur, oxidation, ljus, jonhalt och skjuvning. Det är avgörande att genomföra stabilitetsstudier på både aktiva substanser och färdiga läkemedel under avsedda lagringsförhållanden, accelererade förhållanden och tvingad nedbrytning. Stabilitetsdata används vanligtvis för att stödja holdbarhetstiden, utgångsdatum och lagringsförhållanden.
I enlighet med ICH Q5C-riktlinjer erbjuder Yaohai Bio-Pharma stabilitetsstudiestjänster för proteiner, peptider, plasmider och mRNAs, inklusive långsiktiga stabilitetsstudier, accelererade stabilitetsstudier och tvingad nedbrytningsstudier. Dessutom har vi alla nödvändiga möjligheter för provlagring och analys av Critical Quality Attributes (CQA) för att samla in stabilitetsdata.
Reglerkrav för stabilitetsstudier
Enligt ICH Q5C-riktlinjen, ”Det behövs lämpliga stödjande stabilitetsdata för biotekniska/biologiska produkter, eftersom många yttre faktorer kan påverka produkternas verkan, renhet och kvalitet. Det rekommenderas också starkt att studier genomförs på både aktiva ämnen och färdiga mediciner under accelererade och stressförhållanden.”
Tidsberoende (långsiktig) stabilitetsstudier
I tidsberoende (långsiktig) stabilitetstester lagras det aktiva ämnet eller den färdiga medicinen under de avsedda lagringsförhållandena och övervakas tills de biologiska egenskaperna ändras utanför de acceptabla gränserna. Som resultat av långsiktiga stabilitetsstudier kan produktens holdbarhet, utgångsdatum, lagringsförhållanden och provtagning/testintervall fastställas.
Tabell 1. Testfrekvensen i långsiktiga stabilitetsstudier av biologiska produkter före godkännande
| Förbrukningstider |
Testintervall |
Tidpunkter |
| 1 år eller mindre |
Månadsvis de första tre månaderna;
Varje 3:e månad därefter
|
På 0, 1, 2, 3, 6, 9 och 12 månader |
| Mer än 1 år |
Varje 3 månader under det första året;
Varje 6 månader under det andra året;
Årligen därefter
|
På 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 månader och årligen därefter |
Förställda stabilitetsstudier
Den rekommenderade lagringstemperaturen för injicerbara biopharmaceutiska produkter är vanligtvis mellan 2 och 8℃. Förställda stabilitetsstudier utförs med kortare varaktighet under förstärkta villkor, som hög temperatur. Stabilitetsdata anses vara stödjande information för produktsäkerhet och används bredvid i bestämning av hylllivstid och utgångsdatum, samt vid formuleringsutveckling.
Tabell 2. Exempel på förställda stabilitetsstudier
| Stabilitetsstudier |
Förstärkta villkor |
Provtagningspunkter |
| Förställda stabilitetsstudier |
ökat temperatur
relativ luftfuktighet
|
På 0, 1, 2, 3, 6 månader |
Tvingad Degradationsstudier
Målet med tvingad degradationsstudier är att samla stabilitetsinformation under stressförhållanden, såsom höga temperaturer, fuktighet, ljus, oxidation, frysförande eller mekanisk stress (skakning, skjuv). Tvingad degradationsstudier av läkemedlets substans eller slutprodukt under extremt villkor kan hjälpa till att identifiera nyckelfaktorer/parametrar som leder till biologiska degradationsprocesser. Denna data är användbar för robusthetsbedömning av formuleringen och produktionsprocessen.
Tabell 3. Exempel på Tvingad Degradationsstudier
| Spänning |
Stressförhållanden |
Varaktighetstid |
| Temperatur |
Hög temperatur (t.ex., 25℃, 30℃, 37℃, 40℃) |
Dagar-månader |
| Fuktighet |
Relativ fuktighet (0~100%) |
Dagar-månader |
| Ljus |
Minst 1,2 miljoner lx h och 200 W h/m2 |
Några dagar |
| Frys-nedsmältning |
frys–nedsmältning (från -20℃, -80℃ till 15℃) |
1~5 cykler |
| Skakning, rörning |
50~500 varv/min |
Timmar-dagar |
Analytiska metoder som stöder stabilitetsstudier
| Kritiska kvalitetsattribut (CKAs) |
Analytiska Metoder |
| Totalt proteinhalt |
UV, BCA, Bradford, Lowry |
| Synliga partiklar |
Visuell inspektion |
| Aggregation, fragment |
Dynamisk ljusstreu Storleksexkluderande kromatografi (SEC) HPLC/UPLC, Kapillärelektrofores CE (CGE, CZE, cIEF/iCIEF), Non-reducing SDS-PAGE |
| Peptidkartläggning och sekvensering |
LC-MS/MS |
| Disulfidbindningar |
LC-MS/MS |
| PTM (oxidation, isomerisering, deamidation, glykylering) |
LC-MS/MS |
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
